Fibrinolizės tyrimas

Klinikai nepaprastai svarbu nustatyti, kaip padidėja kraujo fibrinolitinis aktyvumas, ir jo nuosmukis, kuris gali būti susijęs arba su intensyviu plazminogeno ir jo aktyvatorių vartojimu jų metu aktyvinimas ir fiksavimas krešuliuose ir kraujo krešuliuose, arba padidėjus plazmos antiplazmino ir antiaktyvatoriaus aktyvumui. Tačiau visada turėtumėte prisiminti, kad intensyvi fibrinolizė krešuliuose ir kraujo krešuliuose, aptikti padidėjus PDP turiniui plazmoje, natūraliai kartu su plazminogeno ir jo aktyvatorių atsargų sumažėjimu plazmoje (cirkuliuojantis kraujas).

Natūralios krešulių lizės būklė

Natūralios krešulių lizės būsenos supratimas gali pateikti Kotovščikovos-Kuzniko metodą B modifikacijoje. P. Baludės arba modifikacijos E. P. Ivanova.

Metodo principas yra, kad atsižvelgiant į hematokrito skaičių ir eritrocitų kiekį kraujyje, nustatomas pastarųjų skaičius, nusėdo iš krešulio per tam tikrą inkubacijos laikotarpį. Padidėjus kraujo fibrinolitiniam aktyvumui, šios frakcijos tūris (trečias) padidėja eritrocitų. Gilios hipokoaguliacijos ir hipofibrinogenemijos atveju, kurioje susidaro brokuoti ir laisvesni krešuliai, suteikta technika gali duoti klaidingų rezultatų.

Pagal Bidvelo metodą G modifikacijoje. Į. Andrenko fibrinolizė vertinama pagal fibrino praradimą iš krešulių.

Kraujo plazmos euglobulino frakcijos fibrinolitinio aktyvumo tyrimas

Kraujo plazmos euglobulino frakcijos fibrinolitinio aktyvumo tyrimas yra svarbiausias pagrindinis tyrimas., kurį patvirtina Europos trombozės draugijos komisija.

Tam naudojami arba klasikiniai krešulių euglobulino lizės nustatymo metodai, arba nustatant euglobulino frakcijos lytinį aktyvumą fibrino plokštelėse (pastaruoju atveju skirtingo fibrino kiekio poveikis bandymo rodmenims yra išlygintas). Šių bandymų lizę lemia, kad plazminogenas ir jo aktyvatoriai išsiskiria į euglobulino frakciją, o fibrinolizės inhibitoriai dažniausiai pašalinami. Todėl, naudojant euglobulino testus, įvertinamas plazminogeno ir jo aktyvatorių kiekis kraujo plazmoje.

Gaunant kraują pagrindinėmis medžiagų apykaitos sąlygomis, T. tai yra. į nevalgius ryte, prieš išvesdamas pacientą iš lovos, kraujyje beveik nėra audinių plazminogeno aktyvatorių. Taigi, tokiomis sąlygomis vidaus būklė (tinkamo kraujo) plazminogeno aktyvavimo procesas.

Šį procesą galima smarkiai paspartinti išankstiniu kontaktiniu XIIa - kallikreino - VM kininogeno komplekso aktyvavimu su kaolinu, dėl to euglobulino lizė sumažėja nuo 2,5-3 valandų iki 2-10 minučių. Šis kontaktų aktyvavimo principas yra pagrįstas nustatymo metodai XIIa-priklausoma fibrinolizė.

Kraujagyslių endotelio gebėjimas išskirti išorinį fibrinolizės aktyvatorių į kraują (audinio tipo aktyvatorius, GODA) vertinamas pagal euglobulino lizės pagreitėjimą po kraujagyslių suspaudimo kraujagyslių iš kraujospūdžio matuoklio (Oyvino-Čekalinos testas), arba po dozuoto pratimo ant dviračio ergometro, arba su farmakologine stimuliacija (vazopresino dariniai - desmopresinas arba adiuretinas).

Literatūroje aprašoma daugybė šių metodų modifikacijų..

Taip, pvz, metu suspaudimo testas pagal klasikinį metodą manžetės slėgis palaikomas 10,7 kPa, (80 mmHg. Str.) bet kuriame 1,3 kPa, (10 mmHg. Str.) virš diastolinės 15-20 minučių, ir moderniau modifikavus testą pagal B. P. Balude - 3 min. su suspaudimu 1,3 kPa, (10 mmHg. Str.) didesnis sistolinis slėgis. Abiem atvejais antrą kartą paimamas kraujas tyrimams iš sugniaužtų indų prieš manžetės nuėmimą.

Tokių tyrimų pagalba galima tirti suspaudimo poveikį ne tik fibrinolizei, bet ir apie kitas antitrombozines kraujagyslių sienelių savybes (antikoaguliantai, antiagregatorija ir kt.).

Apkrovos bandymai tokiu būdu, kad euglobulino lizė paprastai paspartėtų 2 arba daugiau kartų (atliekant tyrimą ne bazinėse medžiagų apykaitos sąlygose, atsiranda labai didelių atsitiktinių klaidų, todėl prieš pradedant tyrimą pacientas neturėtų keltis iš lovos ryte, venų punkcija turėtų būti atliekama palatoje).

Silpnėjanti reakcija į suspaudimą arba mankšta rodo nepakankamą fibrinolitinės sistemos reaktyvumą ir padidėjusią trombogeninę riziką, kurį patvirtino daugybė tyrimų.

Plazminogeno kiekis kraujo plazmoje

Plazminogeno kiekis kraujo plazmoje galima pusiau kiekybiškai įvertinti pridedant tam tikrą streptokinazės dozę į euglobulino frakciją. Pagal Slobožankinos metodą - Fedorova, parenkamas toks streptokinazės aktyvumas, kuris euglobulinus lizuoja per 9–11 minučių, tačiau galima naudoti dideles koncentracijas (norminiai rodikliai rodomi kiekvienoje laboratorijoje atskirai). Esant plazminogeno trūkumui, šio tyrimo metu daugiau pailgėja lizės laikas, tuo mažiau šio proenzimo.

Kraujo plazmos krešulių lizės tyrimas

Lygiagretus kraujo plazmos krešulių lizės tyrimas pagal tą patį metodą, kai procesas stimuliuojamas streptokinaze, tai leidžia įvertinti antiplasmino aktyvumą tiriamoje kraujo plazmoje pagal gautų rodiklių skirtumą, kadangi euglobulino frakcijoje praktiškai nėra antiplasmino, koaguliuotoje plazmoje jo yra.

Antiplasmino kiekis apskaičiuojamas pagal koeficientą

(PLS - ELS)/ELS;

kur PLS yra plazmos krešulio lizės laikas esant streptokinazei,

ELS - euglobulino krešulio lizės laikas, esant vienodai streptokinazės dozei.

Toliau, naudojant šį koeficientą, nustatyti antiplasmino aktyvumą procentais pagal anksčiau sudarytą praskiedimo kreivę (gautas iš mišrių normalios kraujo plazmos mėginių).

Tikslesnis ir lengvai įgyvendinamas fibrinolizės tyrimo metodai skaidant azofibriną, fibrino junginys, kovalentiškai susietas su chromogeniniu substratu (azopeptidas)

Metodo principas yra, kad pridėti trys mėgintuvėliai 10 mg azofibrino, sumaišytas su buferiu (pH vertė 7,4), po kurio du iš jų pridedami 0,15 ml analizuojamos kraujo plazmos ir papildomai į vieną iš šių mėgintuvėlių - 10000 U / ml streptokinazės.

Po inkubacijos 1 h tirpalai filtruojami ir fotometriniai spektrofotometru, esant bangos ilgiui 440 nm arba medicininiame kolorimetre su mėlynos šviesos filtru.

Plazminis plazmos aktyvumas nustatomas mėginyje be streptokinazės pakeitus filtrato optinį tankį, lyginant su 3-iojo mėgintuvėlio turiniu, ir plazminogeno kiekis plazmoje - mėginyje su streptokinaze. Kai tas pats plazminas ir tiriamoji plazma inkubuojami ant to paties substrato, nustatomas antiplazmino aktyvumas. Lyginamieji indeksai, gautas tiriant normalią kraujo plazmą, paimtas 100 %.

Taip, naudojant palyginti nedidelį paprastų laboratorinių funkcinių metodų rinkinį, galima sužinoti apie įvairių fibrinolizės mechanizmų būklę, plazmos ir plazminogeno išsiskyrimas iš kraujagyslių sienelės, jo aktyvatoriai ir inhibitoriai.

Kaip ir tiriant kraujo krešėjimo sistemą, šiuos duomenis galima iš esmės papildyti imunologiškai nustatant fibrinolizės sistemos komponentus ir fibrinogeno bei fibrino skilimo produktus..

Stebėtojų ir intravaskulinės koaguliacijos bei fibrinolizės molekulinių žymenų nustatymo metodai

Vykdant intravaskulinę kraujo krešėjimą ir su juo susijusią intensyvią fibrinolizę,, viena pusė, vartojimas ir daugiau ar mažiau ryškus daugelio hemostazės sistemos komponentų kiekio kraujyje sumažėjimas, kita vertus, jų dalių išvaizda, fragmentai ir metabolitai, kurių nėra normalioje kraujo plazmoje arba jų yra nedaug.

Tokių „pašalinių asmenų“ ir intravaskulinės koaguliacijos bei fibrinolizės aktyvacijos žymenų nustatymas yra labai diagnostinis DIC sindromų atveju., tromboembolinės ligos ir įvairios kilmės mikrotrombovaskulitas (infekcinis, imuninis, navikas ir kt.. d.).

Trombocitų hemostazės vartojimo ir aktyvavimo žymenys

Trombocitų hemostazės vartojimo ir aktyvacijos žymenys apima trombocitopenija, granulių komponentų - antiheparino faktoriaus - padidėjimas plazmoje 4 Trombocitų, (3-tromboglobulinas ir kt., taip pat išlaikyti apyvartoje funkciškai mažiau aktyvias ir blogiau agreguojančias trombocitus.

Pagrindiniai kraujagyslių endotelio pažeidimo ir funkcinio nevisavertiškumo žymenys - von Willebrand faktoriaus lygio padidėjimas kraujo plazmoje, euglobulino lizės reakcijos susilpnėjimas kraujagyslių suspaudimo metu manžete, mankšta ar vazopresino analogų vartojimas.

Hiperkoaguliacija

Hiperkoaguliacija, jei bet kuris, gali būti kraujo krešėjimo sistemos suaktyvėjimo ženklas. Jis atskleidžiamas naudojant bendruosius krešėjimo testus ir instrumentinius tyrimo metodus. (tromboelastografija), o klinikoje - remiantis sunkumu gauti kraujo iš venos - lengvoji trombozė kaip pati kraujagyslė, taip ir adatos, taip pat neišsamus kraujo stabilizavimas maišant su citratu (formavimasis in vitro iš arti- ir mikrokupės).

Toks dalinai krešėjęs kraujas yra visiškai netinkamas tolesniems hemostatinės sistemos tyrimams., todėl prieš centrifuguodami kraują būtinai patikrinkite, ar jame yra krešulių?. Kraujo krešuliai nėra tiriami toliau (bet gali būti naudojamas serumui paruošti ir atlikti daugybę biocheminių tyrimų). Patirtis rodo, kad nepakankamai griežtas šios rekomendacijos laikymasis dažnai yra grubių klaidų šaltinis tiriant hemostazės sistemą.

Hiperkoaguliacija atliekant daugelį tyrimų dar neparodo, kad yra trombogeninis pavojus. Be to, žinoma daugybė trombofilijų, kuriems būdingas pradinis hipo-, nėra hiperkoaguliuojamas. Tai apima trombofiliją, dėl XII faktoriaus trūkumo, prekallikreinas ir VM chininogenas, disfibrinogenemija, baltymo C trūkumas ir kt.. d. Krešėjimas praktiškai nesikeičia linkus į trombozę dėl hematokrito padidėjimo (dažnai stebima hipokoaguliacija), trombocitemija, fibrinolizės nepilnavertiškumas ir kt.. d.

Dėl nurodytų priežasčių, negalima sutapatinti hiperkoaguliacijos ir trombogeninio pavojaus, dėl kurio šis simptomas šiuo metu nėra įtrauktas į trombofilijos stigmatų skaičių.

„Tilto“ tarp XIIa + kalikreino ir VII faktoriaus suaktyvinimas

„Tilto“ tarp XIIa + kalikreino ir VII faktoriaus suaktyvinimas, kuris atpažįstamas tiriant protrombino laiką galvijų tromboplastinu prieš ir po 18–24 valandų aušinamos tiriamos kraujo plazmos + 4 ° С temperatūroje. (šalto aktyvavimo bandymas). Esant daugybei trombofilijų po aušinimo, protrombino laikas sutrumpėja 25-50 %. Kiti tromboplastinai, išskyrus jautį, netinkami šiam tyrimui.

Laisvo peptido A buvimas kraujo plazmoje

Laisvo peptido A buvimas kraujo plazmoje, identifikuojami imunologiniais metodais, yra tiesioginis trombinemijos įrodymas, kadangi trombinas pirmiausia skaldo peptidus A iš fibrinogeno molekulės. Ši metodika yra ribota, nes sunku gauti imuninį anti-A serumą.

Be, peptido kiekio padidėjimas kraujo plazmoje paprastai yra trumpalaikis, nes mononuklearinių fagocitų sistema jį greitai pašalina iš kraujotakos. Šiuo atžvilgiu peptido A lygis yra informatyvus tik tada, kai jis padidėja, o tai yra patikimas aktyvaus trombino buvimo kraujyje požymis.

Fibrinogeno telkinio sluoksniavimas ir tirpių fibrino-monomerų kompleksų susidarymas plazmoje (RFMK)

Sveikiems žmonėms - fibrinogeno savybės, elektroforetinis judrumas ir jautrumas trombinui, trombino tyrime visiškai koaguliuoja, pridedant 12–14 sekundžių trombino.

Priešingai, suaktyvėjus kraujo krešumui į kraujagysles (trombinemija) ir fibrinolizė, įvyksta fibrinogeno telkinio stratifikacija, RFMK formavimas, surišanti fibrinogeno dalis (užblokuotas fibrinogenas), ir galbūt, ankstyvieji fibrinolizės produktai (X ir V fragmentai), taip pat ankstyvieji ir vėlyvieji PDF failai laisvoje valstybėje. RFMK ir susijęs fibrinogenas arba krešėja veikiami trombino (lieka serume), arba krešėti lėtai ir tik veikiant didelei trombino koncentracijai (3-antra). Šie parakoaguliacijos testai naudojami norint nustatyti RFMK ir kitus inertinius fibrinogeno baseino komponentus plazmoje ir serume.

Beta naftolio testas

Beta naftolio testas (buvęs pavadinimas - fibrinogeno B apibrėžimas) nepakankamai konkretus, todėl dabar jis naudojamas retai.

Jo esmė yra, kad į kraujo plazmą pridedamas β-naftolio tirpalas 50 % etanolis (5 lašai 1 ml). Jei po 10 min. purtant susidaro nuosėdos rupių dribsnių pavidalu, imtis laikoma teigiama.

Etanolio tyrimas

Etanolio testas - lengva atlikti, jį nešti 0,4 ml ištirtos plazmos, stabilizuoto citrato tirpalo, sumaišyto su aminokaprono rūgštimi (blokuoti fibrinolizę), papildyti 0,15 ml 50 % etanolio tirpalas (koncentracija tikrinama alkoholio matuokliu).

Švietimas per 10 min. minkšto krešulio rodo, kad kraujo plazmoje yra RFMK. Konkretus testas, bet leidžia identifikuoti tik dalį RFMK (daugiausia didelių molekulių), duoda teigiamą rezultatą su vidaus degimo varikliu, trombozė ir kitos trombinemijos rūšys. III stadijos DIC su sunkia hipofibrinogenemija (mažiau nei 0,5–0,7 g / l), kaip ir su heparinizacija, etanolio testas dažnai būna neigiamas.

Protamino sulfato bandymas

Protamino sulfato bandymas pagrįstas ankstyvosios fibrinolizės produktų ir RFMK dalies nusodinimu protamino sulfatu, gaunamas iš žuvų pieno. Testas yra gana konkretus, bet jam tinka tik kai kurios protamino sulfato rūšys.

Protamino sulfato gebėjimas inaktyvuoti hepariną ir sukelti parakoaguliaciją nėra susijęs. Dėl to protamino sulfato mėginiai, naudojamas parakoaguliacijos tyrimui, reikia iš anksto išbandyti fibrino monomero tirpalu, arba normalioje kraujo plazmoje, prie kurių iš anksto pridedamas nedidelis kiekis trombino ir streptokinazės (arba tik streptokinazę).

Jei tuo pačiu metu testas bus teigiamas, tada protamino sulfatas yra tinkamas diagnostikai. Daugelyje firminių diagnostikos rinkinių yra valdiklis (nuoroda) plazma, teigiamas protamino sulfato testas. Jis naudojamas reagentui tirti.

Reikėtų atsižvelgti į, ką naudojant etanolio ir protamino sulfato testus, atskleidžiami skirtingi fibrinogeno telkinio komponentai, todėl jų rezultatai ne visada sutampa. Taip, kai kuriems pacientams, kuriems yra išplitusi intravaskulinė koaguliacija, abu testai yra teigiami, kiti jų turi tik vieną. Todėl norint nustatyti patikimesnę diagnozę, reikia atlikti abu tyrimus..

Ortofenantrolino tyrimas

Ortofenantrolino tyrimas (OFT) - labai informatyvus, leidžia kokybiškai ir kiekybiškai nustatyti RFMK plazmoje su nedideliu trombocitų skaičiumi (papildomai centrifuguojamas 20 minučių 4000 / Min).

Tinka tik bandymams ortofenantrolino druskos rūgštis. Ortofenantrolino tirpalas 0,033 M (0,78 %) maišosi kambario temperatūroje vienodais kiekiais (iki 0,1 ml) tiriant plazmą ant stiklinės stiklinės ir siūbuojant, nustatomas pirmųjų mišinyje dribsnių atsiradimo laikas.

Apskaita tvarkoma 2 m,.

Rezultatai (per kelias sekundes) naudojant kalibravimo kreivę paverčiama RFMK kiekiu. Kalibravimo kreivė gaunama pridedant skirtingas fibrino monomero koncentracijas, gautas Radzevičiaus-Chodorovos metodu, į sveikų žmonių kraujo plazmos baseiną (donorai). Paprastai dribsniai atsiranda po 120 nuo; tuo greičiau jie atsiranda, tuo daugiau RFMK yra tiriamoje plazmoje.

Testas yra patikimesnis, nei etanolis ir protamino sulfatas.

RFMK nustatymas eritrocitų agliutinacijos būdu, padengtas fibrino monomerais (FM testas)

Žmogaus eritrocitai I(O) grupės yra padengtos fibrino monomerais ir naudojamos diagnostikoje.

Kraujo plazma ant stiklo sumaišoma su tiriamaisiais eritrocitais. Agliutinacijos išvaizda (įvertintas iš + į +++) rodo RFMK buvimą, sąveikaujant su eritrocitų paviršiaus fibrino monomerais.

Testas yra labai jautrus, leidžia aptikti RFMK esant didesnei koncentracijai 10 mg / ml,.

Visiškas koaguliacinės fibrinogeno telkinio dalies ir RFMK identifikavimas smėlio epos nuodų pagalba

Smėlio ffora nuodų arba jo krešėjimo frakcijos tirpalas (echitoksas, ekarinas) visiškai koaguliuoja fibrinogeną, visi RFMC ir ankstyvosios fibrinolizės produktai, atsižvelgiant į tai, jis gali būti naudojamas apskaičiuojant bendrą kraujo plazmoje esančių fibrinogeno krešėjimo komponentų kiekį ir RFMK bei blokuoto fibrinogeno kiekį, likęs po pirminio krešėjimo serume, gautas krešėjus trombinu.

Taikoma nuodų koncentracija, kuris sukelia normalios plazmos krešėjimą per 20-30 s.

Mėginyje esant RFMK, kurio kraujo plazmoje yra nuodų, nustatomas didesnis fibrinogeno kiekis, nei trombino tyrimas, ir kraujo serume, gautas krešėjus 15 sekundžių trombinu, pridedant nuodų, susidaro antras krešulys, į kurį patenka visas RFMC ir su juo susijęs blokuotas fibrinogenas, taip pat ankstyvieji PDF failai.

Šie reiškiniai būdingi trombinemijai ir masinei intravaskulinei koaguliacijai. (DIK, tromboembolija ir kt.), kadangi sveikų žmonių kraujo serume nuodų testas neranda RFMK ir blokuoja fibrinogeną. Po krešėjimo nuodais fibrinogenas ir jo didelių molekulių dariniai nebebūna aptikti nei chromatografiškai, nei atlikus stafilokokų sukibimo testą.

Be to, kas išdėstyta pirmiau, RFMK ir ankstyviesiems fibrinogeno skilimo produktams nustatyti (arba fibrino) plazminą, galima naudoti šiuos bandymus.

Staphylococcus sukibimo bandymas

Staphylococcus sukibimo bandymas (TSS, stafilokokų susikaupimo testas) - paprastas ir labai informatyvus metodas nustatyti RFMK ir ankstyvos fibrinolizės produktus serume (fragmentai X, taip pat susijęs blokuotas fibrinogenas).

Remiantis tam tikrų stafilokoko padermių gebėjimu (Neumannas Д₂S ir kt.) dėl to, kad ant jų paviršiaus yra specialus klumpėjimo faktorius, veikiamas agliutinacijos veikiant likusiems serume, po krešėjimo RFMK ir ankstyvo PDF (fragmentai X).

Kraujas tyrimams paimtas stabilizuojančiame tirpale, sumaišytame su aminokaprono rūgštimi, kad būtų išvengta fibrinolizės mėgintuvėlyje.

Tyrimas atliekamas ant stiklo arba tabletėmis 74 lizdus maišant vienodą kiekį diagnostinio ir tiriant kraujo serumą skiediniuose 1:2, 1:4, 1:8 ir t,. d.

Atsižvelgiama į galutinį skiedimą, kurioje vis dar nustatoma agliutinacija. Sveikiems žmonėms RFMK ir ankstyvojo PDP kiekis serume neviršija 0,002 g / l, (2 ug / ml,).

Ankstyvo ir vėlyvo PDP imunologinis nustatymas kraujo serume

Ankstyvo ir vėlyvo PDP imunologinis nustatymas kraujo serume pagrįstas antifibrinogeno serumo gebėjimu sukelti imuninį nuosėdą su fibrinogeno baseino komponentais (serumo jautrumas nustatomas praskiedus fibrinogeną).

Su imunoelektroforeze, dėl skirtingo RFMK mobilumo, fragmentai X, IR, D ir E galimas jų apytikslis apibrėžimas. Kiekybinis įvertinimas atliekamas tiriant skirtingus fibrinogeno praskiedimus, plazma ir serumas. Konkretesni tyrimai su specifiniais anti-D serumais, anti-dimeris D ir kiti.

PDF latekso testas

Latekso dalelių sukibimo bandymas, pakrautas anti-D antikūnų, anti-E, antidimer D ir kt. (PDF latekso testas), sudaro diagnostinių rinkinių pagalba išvardyti latekso dalelių sukibimo PDF failai, sumaišyti su skirtingais tiriamojo serumo praskiedimais.

Aktyvuoto XIII faktoriaus kiekio nustatymas kraujo plazmoje kaip trombino cirkuliacijos rodiklis kraujyje

XIII faktorius, trombinas suaktyvinamas esant kalcio jonams, skyla į A grandinę, su fibriną stabilizuojančiu aktyvumu, ir inertinė grandinė S.

Atskiras jų turinio apibrėžimas (pagal fibrino oligomerų stabilizavimo laipsnį ir imunologinius) leidžia diagnozuoti intravaskulinį kraujo krešėjimą pagal trombinemiją. Metodas yra sudėtingas, naudojama daugiausia moksliniams tyrimams. Kuriami labiau prieinami XIIIa faktoriaus nustatymo metodai..

Protrombino aktyvacijos nustatymas

Kai protrombiną aktyvina Xa faktorius, F1-2 fragmentas yra atskirtas nuo substrato., nustatoma imunologiškai. Pastarojo kiekio padidėjimas plazmoje rodo kraujo krešėjimo sistemos suaktyvėjimą..

Intravaskulinės koaguliacijos aktyvacijos ląstelių žymenų nustatymas

Žalos reiškinys (suskaidymas) eritrocitas

Skleidžiant intravaskulinę koaguliaciją ir kitų tipų mikrocirkuliacijos blokadą mažuose induose, sužeisti eritrocitai, dėl ko padidėja suskaidytų ląstelių skaičius kraujyje (daugiau nei 7 - 10%).

Tiksliau, šis reiškinys nustatomas atskiriant kraujo ląsteles ficoll-verografino tankio gradiente (tankis 1,077) metodu, naudojamas imunologijoje limfocitams ir monocitams išskirti. Paprastai leukocitų tarpfazis žiedas turi balkšvą opalescuojančią spalvą ir, skaičiuojant Goryajevo kameroje, jame yra mažiau 400 eritrocitai 1 L (dažniau anksčiau 200).

Naudojant DIC, iššokančiųjų langų skaičius (sugadintas) eritrocitų dramatiškai padidėja (iki 1000-40 000 į 1 μl ir daugiau), dėl kurio žiedas nudažytas rausva arba raudona spalva. Reiškinys kiekybiškai įvertinamas skaičiuojant eritrocitų kiekį tarpfazėje (kamera Goryaeva).

Metodas leidžia diferencijuoti DIC sindromą su mikrocirkuliacijos blokada ir didžiųjų indų tromboze, kurioje raudonųjų kraujo kūnelių pažeidimas yra nereikšmingas.

Monocitų tromboplastino gamybos reiškinys

Kai kuriems išplitusios intravaskulinės koaguliacijos tipams (ypač imuninė ir infekcinė genezė) monocitai suaktyvėja ir įgyja galimybę gaminti audinių tromboplastiną.

Norint nustatyti šį reiškinį, kraujo ląstelės yra atskiriamos tankio gradientu (ficoll-verografino mišinys, tankis 1,077) norint gauti trupmeną, daug monocitų, trumpai auginamas, tada suspensijos krešėjimo aktyvumas nustatomas prieš ir po ląstelių sunaikinimo. Esant sunkiam infekciniam-septiniam procesui, ši monocitų funkcija gali būti nuslopinta.

Nustatant sumažėjusį plazmos kiekį (vartojimas) krešėjimo komponentai, fibrinolitinės ir kalikreino-kinino sistemos

Esant ūminiam ir poūmiam DIC sindromui, padidėja daugelio hemostazės sistemos komponentų vartojimas ir metabolizmas., dėl to jų lygis plazmoje yra žymiai sumažėjęs. VIII faktorių slopinimas yra ypač ryškus, V, antitrombinas III, baltymai C ir S, fibronektinas, prekallikrein, didelės molekulinės masės kininogenas, plazminogeno.

Kai kuriuos iš šių parametrų nustatyti diagnozei yra mažiau svarbu., kiek įvertinti proceso sunkumą ir pakaitinės terapijos efektyvumą.

I faktoriaus lygis (fibrinogeno) taip pat dažnai mažėja, ką, Tačiau, užmaskuotas iš pradžių padidėjusiu infekcinių ir imuninių ligų plazmos kiekiu, nėštumo toksikozė ir kitos patologijos rūšys.

Neoantigenų identifikavimas

Krešėjimo faktorių aktyvavimo ir fibrinolizės bei vėlesnio jų kompleksų su fiziologiniais antagonistais formavimosi procese atsiranda nauji antigeniniai žymenys, trūksta atskirai sudedamosiose šių porų dalyse. Taip, pvz, trombino-antitrombino III kompleksas suformuoja antigeną, nėra būdingas vien trombinui, nei antitrombinas III.

Lygiai taip pat poriniame junginyje plazmine susidaro neoantigenas - antiplazminas ir kt.. d. Esant šių neoantigenų antiserumams, lengva nustatyti, ar kraujyje yra aktyvuotų pagrindinių kraujo krešėjimo fermentų. (Trombino) ir fibrinolizė (plazminu).

Šiuolaikinėje klinikoje yra gana didelis testų rinkinys, atskleidžiantis kraujo krešėjimo ir fibrinolizės intravaskulinį aktyvavimą.

Daugelis šių testų yra viešai prieinami., greitai ir lengvai atliekama. Jų naudojimas kartu su kai kuriais kitais tyrimais suteikia patikimą DIC ir kitų tipų masyvios intravaskulinės koaguliacijos laboratorinę diagnozę.. Norint teisingai įvertinti patologinio proceso dinamiką, taip pat svarbu stebėti intravaskulinės koaguliacijos žymenis, terapijos veiksmingumo ir pakankamumo laipsnis.