Наследственная гемолитическая анемия, поради активността на пируват киназа дефицит на червени кръвни клетки

Наследственная гемолитическая анемия, Свързани еритроцитите пируваткиназа дефицит - сравнително рядка форма на хемолитична анемия, която се унаследява по автозомно рецесивен, Той дава клинични прояви в хомозиготите, постъпленията с признаци на вътреклетъчния хемолиза, макроцитоза на еритроцитите, ниско съдържание на калий. Има повече от 200 случаи на хомозиготни носители на piruvatkinaznoy дефицит дейност.

Pathogenesis

Пируват киназа е един от ензимите, сключване гликолиза. Тази връзка гликолиза и ATP формира nikotinamiddinukleotid. По-голямата част от пациентите с дефицит на пируват киназа активност се намалява в съдържанието на червените кръвни клетки на тези две метаболити, В някои случаи съдържанието на АТР е нормално, но наруши стабилността на АТФ по време на инкубацията. Нормалните нива на ATP намерени в значителна ретикулоцитоза. Това се дължи на присъствието на ретикулоцити и възможността за митохондриална АТР не само чрез гликолиза, но дължи и на окислително фосфорилиране.

Последицата от пируват дефицит киназа Също така е натрупването на продуктите на гликолиза, образува при предишните етапи - fosfofenolpiruvata, 3-фосфоглицерат, и по-специално 2,3-diphosphoglycerate. Content piruvatanlaktata намалява броя на червените кръвни клетки.

Липсата на ATP в еритроцитите пируват дефицит киназа Това води до нарушаване на функцията на АТР-aznogo помпа червени кръвни клетки и до загуба на калиеви йони, където концентрацията на натриеви йони в еритроцитите на не по-голям. Това води до намаляване на съдържанието на моновалентни йони в еритроцитите, дехидратация на клетката и свиването. Това явление се нарича dessikotsitoz. Намалението на червените кръвни клетки на вода усложнява процеса на насищане с кислород и кислород освобождаване от хемоглобина. В тази връзка, някои компенсаторна роля, изиграна от значително натрупване в еритроцитите на 2,3-киселина difosfoglitserinovoy.

Афинитетът на хемоглобин за кислород се намалява с неговото взаимодействие с 2,3-diphosphoglycerate. Следователно, при по-високи концентрации на 2,3-diphosphoglycerate връща кислород към тъканите се улеснява.

Клиничните прояви на активността на пируват киназа дефицит

Клиничните прояви на дефицит пируват киназа активност зависи от степента на хемолиза. В някои случаи, увеличена хемолиза се проявява при раждането и е придружена от появата на тежка хемолитична криза, налага кръвопреливане, за да се поддържа хемоглобина на ниво под нормална. В други случаи, заболяването може да се случи почти безсимптомно с първите признаци на повишена хемолиза (subikterichnost склери и кожа) възраст 17-30.

Общо; в сравнение с microspherocytosis, пируват дефицит киназа има по-тежко.

Почти всички пациенти с осезаем далак. Лекото увеличение на своя разкрити някои аномалии хетерозиготни носители, въпреки че те имат анемия, обикновено, липсващ. А броят на пациентите възможно спленомегалия. Значително увеличение на черния дроб рядко се среща. При отделни пациенти с идентифицирани язви на краката.

Лабораторни показатели на дейността на пируват киназа дефицит

По-голямата част от пациентите с дефицит на пируват киназа активност, наблюдавана умерена анемия (4,34- 6,21 ммол / л, или 70-100 г / л), Въпреки това, по време на хемоглобина кризи може да се намали до 3,1 3,72 ммол / л (50-60 G / L). Content eritrotsitov- 2,5-3,0 T 1 л. Хемолитична криза може да бъде причинено от инфекция. Има случаи на хемолиза печалба по време на менструация.

Червените кръвни клетки от пациенти с пируват киназа дефицит характеризира с макроцитоза с normohromiey, лека анизоцитоза и пойкилоцитоза. Имаше една справедлива polychromatophilia. Понякога намерена mishenevidnye червени кръвни клетки и червените кръвни клетки с печени ръбове или под формата на черница, често идентифициран базофилен еритроцитите punktatsiya, Jolly телца. Някои пациенти в периферната кръв показаха значителен брой erythrokaryocytes, по време на кризата, тя може да бъде увеличена до 60-70 %. ESR, на броя на белите кръвни клетки, leukogram, броя на тромбоцитите в рамките на нормалното. Както и при други форми на хемолитична анемия, в костния мозък разкри рязко дразнене хемопоетични стволови червено.

Нивото на билирубина, обикновено, увеличава поради непряката.

Размерът на свободната плазмена хемоглобина нормален, но може да се намали нивото на хаптоглобин. Хемосидерин в урината отсъства. Фетална съдържание на хемоглобин и хемоглобин₂ в рамките на нормалното.

Осмотичен резистентност на еритроцитите пируваткиназа дефицит в повечето случаи нормални, понякога намалява след ден инкубиране. Autogemoliz, обикновено, обновен до различна степен. Има случаи на пируват киназа дефицит с нормална autogemolizom. В първите регистрирани случаи на пируваткиназа недостатъци не са регистрирани тип II autogemoliza, коригира добавянето на АТР, и не коригира или леко коригиране на добавянето на глюкоза. Впоследствие много случаи са били описани с тип ензимна недостатъчност I autogemoliza или не. Поради това не се препоръчва да се прилагат метода autogemoliza за диференциалната диагноза на хемолитични анемии. Продължителността на живота на червените кръвни клетки с дефицит на пируват киназа активност е винаги съкратен.

Тип наследство пируват киназа дейност автозомно-рецесивно. Хетерозиготите практически здрави, Според различни изследователи, тежестта на дефицита да варира от 50 към 70 % норми.

Диагностична дейност на пируват киназа дефицит

Диагнозата на пируват киназа дефицит на червени кръвни клетки може да се очаква да доведат в случай на хемолитична анемия, преминаващ през годините с увеличаването на далака, липса на натривка от периферна кръв признаци microspherocytosis, elliptotsitoza и stomatotsitoza.

Качествени тестове за определяне на активността на пируват киназа. За тази цел, методът се използва широко флуоресцентно багрило, въз основа на, че в хода на реакцията, катализируемой пируваткиназой, nikotinamiddinukleotid окислява и флуоресценцията изчезва.

Активността на пируват киназа в здрави индивиди варира от 4,0 към 7,7 ммол (мин / 1010 еритроцити) или от 4,0 към 7,7 Мощност. По-голямата част от хомозиготна ензим активност на заболяването по-малко 1 Мощност. Въпреки това, може да има случаи, лек спад в активността на ензима. Диагностика на рядка форма на хемолитична анемия е много трудно, и диагнозата може да се направи само в изучаването на ензимната кинетика.

Диференциална диагноза на хемолитична анемия, свързани с дефицит на пируват киназа

Диференциалната диагноза на хемолитична анемия, свързани с дефицит на пируват киназа, необходимо да се извърши други форми на наследствена хемолитична анемия.

Тъй като повечето пациенти с дефицит на пируват киназа активност разлика лица, страдащи microspherocytosis, elliptotsitozom, стоматоцитозом, хемолитична анемия, обусловено превоз нестабилна хемоглобина, и таласемия заболяване се унаследява по автозомно-рецесивно, че тази патология се среща само в една и съща генерация и почти никога не е виждал сред родители.

Когато наследствена анемия, обусловено превоз нестабилна хемоглобина, особено в тежко заболяване, понякога пробанд е първият носител на мутацията, и след това заболяването се предава на следващото поколение. Ето защо, диференциалната диагноза трябва да се извършва с хемоглобинопатии, обусловено превоз нестабилна хемоглобина, както и рецесивен наследствено хемолитична анемия, причинена от дефицит на активност на други ензими.

Той играе поддържаща роля стабилност хемоглобина, Йего електрофореза. За да се изключи друга fermentopathia изследва активността на други ензими на еритроцитите, и за да се изключи автоимунна хемолитична анемия извършва Coombs, agregatgemagglyutinatsionnaya.

Fluorescent метод за определяне на активността от piruvatkiiazy Бойтлер

Реактиви.

1. Fosfoenolpirovinogradnaya киселина (tritsiklogeksilammoniynaya сол) 0,15 М разтвор на, неутрализира до рН 7,0-8,0 0,2 М разтвор на NaOH (0,03 мл).
2. ADF 0,03 М разтвор на, неутрализира (0,1 мл).
3. NAD-N 0,015 М разтвор на, неутрализира (0,1 мл).
4. Магнезиев сулфат 0,08 М разтвор на (0,1 мл).
5. Разтвор на фосфатен буфер калиев 0,25 M, рН 11 7,4 (0,05 мл).
6. Дистиллированная вода (0,62 мл). Сместа може да се съхранява при - 20 ° С е не повече от една седмица.

Метод.

За изследвания използване на кръв, взето с хепарин или натриев цитрат. Той се центрофугира, аспирира и подготвят плазма 20 % суспензия от червените кръвни клетки чрез добавяне на четири обема на изотоничен разтвор на натриев хлорид.

Еритроцитите суспензия в количество, 0,02 мл се смесва с 0,2 мл реактив и инкубирани за 30 минути при 37 ° С. Капчица се поставя върху филтърна хартия, и да разглеждате fluoroscope. Изходен флуоресценция се открива веднага след добавянето на еритроцитите към сместа преди инкубиране. Обикновено след 30 минути инкубиране тя изчезва, и активността на пируват киназа дефицит останки. Това е, NADH който флуоресцира под въздействието на UV радиация в областта, близо до видимия, като има предвид, NAD не флуоресцират. Тъй като разтворът горе е нестабилна и лесно се разгражда, изисква наблюдение. Трябва внимателно да се отдели слой на белите кръвни клетки, тъй като дейността на пируват киназа недостиг на еритроцитите ензимна активност в левкоцитите може да е нормален.