Анемия, свързани с дефицит на фолиева киселина

Каквато и да е причина, фолиева киселина дефицит анемия се характеризира с появата на megaloblasts на костния мозък, ИНТРАМЕДУЛАРНА унищожаване erythrokaryocytes, patsitopeniey, макроцитоза и hyperchromia червени кръвни клетки, а понякога - психични разстройства.

Фолиевая (pteroilglutaminovaya) киселина (витамин В₉) Тя се състои от три компонента:

• птеридиновия пръстен;
• Р-аминобензоена киселина (представляват заедно pteroievuyu киселина);
• глутаминова киселина.

Молекулното тегло на фолиева киселина - 441. Фолиевата киселина е активна във формата на производни тетрахидрофолиеви киселина. Фолиевата киселина съдържание в различни форми в човешкото тяло е около 5-10 мг. Запасите в нарушение на нейното приемане в тялото могат да бъдат изчерпани през 4 на месец.

Дневната изискването на фолиева киселина е 100-200 микрограма, Бременност, хемолитична анемия, увеличава многократно.

Общият размер на фолиева киселина в храната, с пълната сила на 500-600 микрограма на ден. Фолиева киселина - фолати съдържащ се в значителни количества в черния дроб, мая, спанак, месо. Още 50 % фолиева киселина, в храните, Това могат да бъдат унищожени при готвене.

Фолиевата киселина се абсорбира в горната част на тънките черва. Способността на червата да абсорбират фолиева киселина е много по-висока от дневния си изискване.

Фолиевата киселина участва в синтеза на пиримидинови и пуринови бази, заедно с метилкобаламин - синтеза на uridinmonofosfata timidinm nofosfata. Фолиева киселина коензими Повече участва в редица реакции. По-специално, тетрахидрофолат участва в синтеза на хистидин глутаминова киселина.

Етиология и патогенеза на анемия по време на недостиг на фолиева киселина

Недостигът Фолиевата киселина, както и дефицит на кобаламин, Тя води до развитието на мегалобластна анемия.

Малабсорбция на фолиева киселина наблюдавани при индивиди, резекция на тънките черва, особено йеюнума, както и в дългосрочен план, като антиконвулсанти като дифенилхидантоин (дифенина) и фенобарбитала (луминалния). Приемът на фолиева киселина е счупен, когато спру и цьолиакия на. Недостигът Фолиевата киселина, както и дефицит на кобаламин, наблюдава при синдром на сляпата бримка. Описван редки случаи на наследствени заболявания на транспорта фолиева киселина през чревната стена и в цереброспиналната течност. Усвояването на други вещества, без да страдат.

Недостигът на фолиева киселина при новородени наблюдавана при недоносени, нарушение на чревната абсорбция, хранени козе мляко, съдържащ малко количество фолиева киселина.

Значителна малабсорбция на фолиева киселина може да се появи при пациенти, алкохолици.

Повишена консумация на фолиева киселина по време на бременност Това може да доведе до недостиг на фолиева киселина, Въпреки това, в развитите страни днес е рядкост. Недостигът на фолиева киселина при бременни жени е намерена в малка мощност, присъствието на хемолитична анемия, използвате преди бременността голям брой безалкохолни напитки.

Клиничните прояви на фолатна недостатъчност

Недостигът на фолиева киселина при деца и млади жени. В същото време, пациентите се оплакват от обща слабост, виене на свят. За разлика от дефицит на кобаламин наблюдава рядко възпалено език. Парестезии и други признаци на въжен myelosis липсващите. Склерата често ikterichnost.

За разлика от дефицит на кобаламин дефицит на фолиева киселина е рядко наблюдавана gistaminoupornaya Акхил, gastratrophia, Въпреки че намаляването на стомашната секреция често.

За дефицита на фолиева киселина, както и за дефицит на кобаламин, характеризира с появата на периферна кръв Макроцитозата, мегалоцитов и мегалобластна, присъствието на хиперхромна анемия, намаляване на броя на ретикулоцитите, тромбоцитите и левкопения с неутрофилен изместване на ляво и дясно. В костния мозък - megaloblasts.

Промените в нервната система са различни от проявите в B₁₂-дефицитна анемия.

Доказа, че хората с епилепсия, Недостигът на фолиева киселина води до чести атаки, на тяхната по-голяма тежест. Това е особено важно поради факта,, че като антиконвулсанти може да доведе до малабсорбция на фолиева киселина. Според литературата, при индивиди с дефицит на шизофрения фолиева киселина води до влошаване на заболяването, по-тежки симптоми и по-малко ефективно лечение.

Диференциална диагноза на кобаламин дефицит и фолиева киселина

За диференциалната диагноза на кобаламин дефицит и фолиева киселина се използва радиоимуноанализ метод за определяне на фолиева киселина в серума и особено в еритроцитите. Съдържанието на кобаламин се определя от микробиологичен метод. Като тестов организъм използва като Streptococcus множество видове и Lactobacillis casei. Обикновено, съдържанието на фолиева киселина в кръвния серум диапазони, Според авторите, използване на различни методи на изследване, от 3 към 25 нг / мл, и еритроцитите - от 100 към 425 нг / мл.

В дефицит на фолиева киселина намалява нивото на серумния, и в еритроцитите. Съдържание На дефицит kolabaminov фолиева киселина в кръвния серум често се издига, еритроцити и понякога могат да бъдат намалени, макар спадът, обикновено, малък.

За диагностика на дефицит на фолиева киселина се използва Метод Load хистидин (15 ж), тогава се определя съдържанието на киселина в урината formiminglutaminovoy. Обикновено, по-голямата част от формите на хистидин глутаминова киселина. С отделянето на урина 1-18 мг formiminglutaminovoy киселина. В дефицит на фолиева киселина 8 часа след въвеждането му в организма се освобождават от урината 20 към 1500 мг formiminglutaminovoy киселина. Значителен брой от formiminglutaminovoy киселина се екскретира в урината след прилагане на хистидин на хора, лекувани с метотрексат. В дефицит на кобаламин, цироза на черния дроб уринарната екскреция на киселина увеличава formiminglutaminovoy, по-малка степен, отколкото с дефицит от фолиева киселина. Нормалните нива на пикочните увеличения метилмалонова киселина съдържание formiminglutaminovoy киселина хистидин след получаване на доказателства за недостиг на фолиева киселина, вместо кобаламин.

Той помага да се разграничат тези две държави и радионуклид проучване. В дефицит на кобаламин, свързан с нарушаването на секреция на вътрешен фактор, нарушена абсорбция на цианокобаламин, недостиг на фолиева киселина, тя се усвоява правилно.

В дефицит на фолиева киселина, въвеждането му в организма води до по-високо съдържание на ретикулоцити, докато инжектиране на цианокобаламин (производни) неефективен. Фолиева киселина дефицит метилкобаламин повишава нивото на ретикулоцити.

Определяне индекс сегментиране неутрофили

Преброяват неутрофили, с 4 сегмент и по- (Общо 200 клетка). Определя се процентът на клетки, с 5 сегменти и по отношение на количеството на клетки, с 4 сегмент. Индексът се определя по формулата:

Е =(KS (5 и още))/KS(4);

когато IC - сегментиране на индекса;

KS (5 и още) - Броят на сегментирани неутрофили (На 200 клетка), в които броят на сегментите е равен на 5 или по;

KS (4) - Броят на сегментирани неутрофили, в които броят на сегментите е равен на 4.

Обикновено това индексни диапазони 2,5 към 25 %. Където, когато тя надвишава 30 % (трептения 120%), Можете да говорите за hypersegmentation неутрофили. Той наблюдава недостиг на фолиева киселина, metilkoʙalamina, и уремия.

Определяне на метилмалонова киселина в урината от Giordio и Plaud

Реактиви.

1. Йонообменната смола Dowex-ZX4 (форма хлорид, 200-400 Mesh). Смолата се промива с пет обема дестилирана вода 3 пъти, се суспендира в два тома дестилирана вода и се съхранява на тъмно ястие при 4 ° С.

2. Разтвор на р-нитроанилин 0,075 % получен чрез разтваряне на 37,5 мг реактива в 500 мл 0,2 М разтвор на солна киселина. Да се ​​съхранява в тъмна пот, Той е останал стабилен в продължение на няколко месеца при стайна температура.

3.Ацетатен буфер (рН 4,3) изработен от 1 М натриев ацетат и 1 М разтвор на оцетна киселина.

4.Diazoreaktiv: 4 мл 0,5 % разтвор на натриев нитрат се смесва с 15 мл пара-нитроанилин. Сместа се поставя в хладилник при 4 ° С и се прибавя охладения разтвор 4 мл 0,2 М натриев ацетат. Реактив стабилен при температуре 4 ° С в продължение на един ден.

5.Нормален 0,05 М разтвор на метилмалонова киселина: 295 мг метилмалонова киселина се разтварят в 50 мл вода.

Метод

Урината се събира в стъклена бутилка и се замразяват до изследването. За проучване на такса част на урината (20- 25 мл), размразени, центрифугируют, и супернатантата се събира с помощта на слаб разтвор на натриев хидроксид или солна киселина за регулиране на рН 6,5.

Хроматографски височина колона 20 см и диаметър 1 cm се запълва със смола Dowex-ZX4. Слой смола трябва да бъде в рамките на 3 см. Се пропуска през смолата 5 мл урина, промива се с дестилирана вода (2 × 50 мл в размер на не повече от 15 мл 1 от). Метилмалонова киселина може да се елуира от смолата 20 мл 0,1 М разтвор на солна киселина. Още 2 мл елюат се смесват с 3 мл 1 М ацетатен буфер рН 4,3 в епруветка със стъклена запушалка (15×2см). Към сместа се добавя 3 мл студена diazoreaktiva, където рН се повишава до 4,0. Сместа се загрява на водна баня при температура 94 С. 3 мин и 2 мл 3 М разтвор на натриев хидроксид. След това тръбата се изважда от водната баня, затваря и съдържанието се разбърква. Сместа се охлажда при стайна температура в продължение на 10 мин и фотометрируют при 620 пМ в кювета с дължина на пътя 1 см.

Като контрола, смес от, състояща се от 2 мл 0,1 М разтвор на солна киселина, 3 мл и diazoreaktiva 3 мл ацетат буфер. Стандартен разтвор метилмалонова киселина се състои от същите компоненти и 0,02 мл 0,05 М разтвор на метилмалонова киселина. Абсорбцията на тези разтвори се измерва при същите условия.

Съдържание метилмалонова киселина (мг) за единица обем на урината (1 л) определя по формулата:

(Е_Проба-Е_{контрол})/(Е_{стандарт}-Е_{контрол})*A*((1000*т)/М)

където E - абсорбцията на различни проби;

А - количеството на метилмалонова киселина в стандартна епруветка, мл;

1000 - Количеството на урината, взети за научни изследвания, мл;

T - размерът на солна киселина, взети за елуиране, мл;

М - броят на елуата, взети за научни изследвания, мл.

При горните условия, формулата може да се опрости, както следва::

(Е_Проба-Е_{контрол})/(Е_{стандарт}-Е_{контрол})*236

Където, когато количеството на метилмалонова киселина в урината е по-голяма от 300 мг / л, трябва отново да се смесва с ацетатен буфер елуат и diazoreaktivom, но вместо 2 мл елюат е целесъобразно да се вземат 4- 10 пъти по-нисък и че обемът да стане 2 мл 0,1 М разтвор на солна киселина. Изчислението следва да отчита разреждането.

Обикновено на ден с отделянето на урина 0,6-4,7 мг на метилмалонова киселина. На дефицит на кобаламин дневна екскреция на метилмалонова киселина достига 294 мг. Обикновено, рецепция 10 г валин не увеличат клирънса на метилмалонова киселина, кобаламин дефицит повишава екскрецията на метилмалонова киселина.

Определяне на метилмалонова киселина в урината от Green

Реактиви.

1. Етер.
2. Етанол.
3. Разтвор на солна киселина 0,1 M.
4. Амониев сулфат.
5. Силна deatsidit база смола FF (200 отвор, форма хлорид).
6. Разтвор на натриев нитрат 0,5 % (тегло / обем).
7. Разтвор на р-нитроанилин (750 мг разтваря в 1 л 0,2 М разтвор на солна киселина).
8. Натриев ацетат 0,2 M.
9. Ацетатен буфер 1 M, pH 4,3: смесен 1 М натриев ацетат разтвор и 1 М разтвор на оцетна киселина в съотношение 16,35:33,9.
10. Воден разтвор на натриев хидроксид 3 M.

A. Стандартен разтвор метилмалонова киселина: 100 мг разтваря в 100 мл вода, съхранява в хладилник.

B. Работен стандартен метилмалонова киселина: стандартен разтвор се разрежда в 20 време 0,1 М разтвор на солна киселина (1 мл на стандарта и 19 мл солна киселина). Това количество еквивалентно метилмалонова киселина 100 мг метилмалонова киселина 1 Условия за изпитване л урина.

За приготвянето на смесени diazoreaktiva 4 мл 0,5 % разтвор на натриев нитрат и 15 мл пара-нитроанилин. Сместа се поставя в ледена баня и се добавя 4 мл 0,2 М натриев ацетат.

Метод.

Урината се събира за един ден, измерва обема си и 10 мл подкисляют 1 М разтвор на сярна киселина до рН 2,0 или малко под. Добавя се амониев сулфат до насищане. Сместа се поставя в делителна фуния и се екстрахира три пъти с етер и етанол в съотношение 3:1. За да се предотврати образуването на емулсии екстрагент смес се използва в излишък.

Екстрактът се прекарва през малка колона хроматография (1 – 1,5 см диаметър), завършен 5 мл смола. Колоната се промива 50 мл дестилирана вода. Метилмалонова киселина елуира 0,1 М разтвор на солна киселина. След елуиране избран 2 мл елюат, W се добавя мл буфер ацетат, и 3 мл diazoreaktiva.

След смесване, епруветката се поставя във водна баня при температура 95 °С на 3 м. След това се прибавя 2 мл 3 М натриев хидроксид и веднъж запушалка затворена епруветка се сведе до минимум контакт с въздуха. След охлаждане, Абсорбцията се измерва при дължина на вълната 620 аз съм. За заготовката, вместо да използват елуатът 2 мл 0,1 М разтвор на солна киселина, и за стандартния разтвор - 2 мл работен стандартен.