Định nghĩa về đặc điểm định lượng và định tính của tinh trùng

Xác định khả năng vận động của tinh trùng

Xác định khả năng vận động của tinh trùng là một tham số quan trọng, về chất lượng của xuất tinh. Tinh dịch, có khả năng thụ tinh, có tính di động - Thực hiện chuyển động thẳng về phía trước với tốc độ 50 Cô. Có thể được tìm thấy trong các lần xuất tinh tinh trùng có tính di động bị suy giảm - diskinospermiey trong các hình thức rung động, Sân tập bò và các phong trào khác, mà thường vắng mặt.

Tinh trùng được đánh giá khả năng vận động để chuẩn bị bản địa xuất tinh với một lĩnh vực hạn chế về tầm nhìn (sử dụng cửa sổ Digitaria exilis), Sử dụng ống kính thị kính 7X và 40X, khi ngưng trùm đầu. Đếm 100 tế bào, lưu ý số lượng của chúng di chuyển, tinh trùng ít vận động và cố định. Thông thường, active-hoạt lực tinh trùng 80-90 %, ít vận động - 10-12, cố định - 6 10 %. Đi vào tài khoản chỉ có những hoạt động lưu chuyển và di chuyển chậm tinh trùng, có tiến bộ ổn định.

Bạn cũng có thể sử dụng một năm điểm thang đánh giá chi tiết hơn:

• "4" - tính di động tuyệt vời (tất cả đều có khả năng di chuyển của tinh trùng tịnh tiến thẳng với một tốc độ đáng kể);
• "3" - di động tốt (một vài giọt);
• "2" - di động tầm thường (Vẫn còn rất nhiều tinh trùng, nhưng với rung đuôi);
• "1" - di động nghèo (việc thiếu vận động về phía trước, Chỉ có các đuôi của nhu động tinh trùng);
• "0" - sự di chuyển của tinh trùng mất tích.

Khả năng sinh sản xuất tinh Nó phụ thuộc vào thời gian vận động của tinh trùng, do đó nó là cần thiết để xác định khả năng vận động của tinh trùng ở động lực (Năng động kinezisgramma).

Một giọt tinh dịch được áp dụng cho kính bọc ngoài, biến nó lộn ngược và đặt trên một bản thủy tinh với một lưỡi liềm cho thả treo như vậy, mà thả là ở trung tâm của giải lao. Các cạnh của lamen bôi trơn bằng parafin lỏng và kính hiển vi xác định tỷ lệ tích cực motile-, ít vận động và tinh trùng cố định thông qua 1, 3, 6, 12 và 24 giờ sau khi xuất tinh. Nghiên cứu được tiến hành ở nhiệt độ phòng. Thông thường, số lượng tinh trùng hoạt động-di chuyển được giảm 2-3 h 20 % ,

• Chú Ý. Soi kính hiển vi của tinh dịch phải được thực hiện trong phòng thí nghiệm của một người, có đủ kinh nghiệm trong lĩnh vực chẩn đoán phòng thí nghiệm, là kết quả của việc xác định khả năng vận động của tinh trùng trong các nhà nghiên cứu khác nhau lên tới ± 40 % và phụ thuộc phần lớn vào kinh nghiệm với các lần xuất tinh.

Các thử nghiệm trên "hồi sinh" của tinh trùng

Các thử nghiệm trên "hồi sinh" của tinh trùng основана на восстановлении нормальной подвижности неподвижных, но живых сперматозоидов с помощью стимулирующих растворов:

1) раствора Бекера (глюкоза — 3 g, Trên₂HPO₄ - 0,6 g, NaCl — 0,2 g, KH₂PO₄ —0,01 г, дистиллированная вода до 100 ml; pH — 7,8);

2) 0,1 % раствора кофеина (только не в ампулах!) - 10 % от объема эякулята;

3) 0,1 М раствора аргинина.

Phương pháp. Мерной пипеткой емкостью 1 мл насасывают 0,1 мл эякулята (хорошо перемешанного) и этой же пипеткой набирают 0,9 мл стимулирующего раствора. Содержимое пипетки выдувают на часовое стекло, хорошо перемешивают путем многократного всасывания и выдувания жидкости на часовое стекло, và sau đó là sản phẩm hoàn treo thả. Qua 5 10 min cố định, nhưng tinh trùng sống bắt đầu chuyển động.

Tỷ lệ hoạt lực tinh trùng xác định ngay lập tức khi khôi phục lại tính di động và sau 3, 6, 12 và 24 không. Để có kết quả đáng tin cậy hơn, được thực hiện song song với mẫu với hai giải pháp đầy thách thức. Только при условии невозможности «оживить» неподвижные сперматозоиды можно говорить о некроспермии.

Выявление живых сперматозоидов среди неподвижных

Принцип метода основан на том, что ферменты живых сперматозоидов обесцвечивают эозин. В качестве реактивов используются 5 % водный раствор эозина калия и 10 % водный раствор нигрозина.

Phương pháp. Trên trượt gây ra và nhỏ một giọt tinh dịch, đặt gần hai lần thả 5 % giải pháp eosin và một giọt kali 10 % Giải pháp Nigrosine, cũng là giọt hai lần lớn eosin kali. Đầu tiên, xuất tinh được trộn với kali eosin, chờ đợi một vài giây, và sau đó trộn với một giọt Nigrosine, một lần nữa chờ đợi một vài giây và làm phiến đồ mỏng đánh bóng trượt kính.

Sử dụng một kính hiển vi hệ thống nhúng, trong smears được tính ít nhất 200 tinh dịch, выделяя живые (Không màu) и погибшие (окрашенные эозином в красный цвет). Количество живых и погибших сперматозоидов выражают в процентах. При отсутствии нигрозина каплю эякулята смешивают с каплей 5 % раствора эозина калия и готовят тонкие мазки для микроскопии. Нигрозин окрашивает только фон препарата, на котором сперматозоиды выделяются более контрастно. В норме живые сперматозоиды составляют 80—90 % от общего их количества.

Подсчет сперматозоидов в 1 мл и во всем объеме эякулята

Количество сперматозоидов в 1 мл и во всем эякуляте подсчитывается в счетной камере Горяева.

Количество сперматозоидов во всем эякуляте определяют путем умножения числа сперматозоидов в 1 мл на количество эякулята (в миллилитрах).

• Chú Ý. В счетной камере можно также определить число подвижных сперматозоидов, Tại sao xuất tinh nên được pha loãng với nước ấm đẳng trương natri hloridz và đếm số lượng tinh trùng cố định, và sau đó trừ nó từ tổng.

Thông thường, trong 1 мл эякулята содержится 60—120 млн. tinh dịch, при гиперспермии — более 120 млн., при олигоспермии — от 30 đến 60 млн., cái gì, thông thường, делает оплодотворение невозможным. Однако описаны случаи, когда оплодотворение наступает и при содержании в 1 мл эякулята от 5 đến 30 triệu. tinh dịch.

Dẫu sao thì при выявлении олигоспермии необходимы 2—3 контрольных подсчета числа сперматозоидов с интервалами времени в 3—4 недели для установления их максимального количества. У одного и того же мужчины число сперматозоидов подвержено значительным физиологическим колебаниям.

В норме во всем эякуляте содержится более 150 triệu. tinh dịch.

Подсчет сперматограммы

Сперматограмма — это процентное соотношение различных морфологических форм сперматозоидов и клеток сперматогенеза.

В мазке, окрашенном гематоксилинэозином или по Паппенгейму, подсчитывается не менее 200 tinh dịch, при этом количество нормальных и патологических форм, а также клеток сперматогенеза выражается в процентах. Подсчет производится с использованием иммерсионной системы микроскопа и машинки для подсчета лейкограммы с предварительно измененными названиями клавишей.

В нормальном эякуляте нормальные формы сперматозоидов составляют 80—85 %, đôi khi 100 %, в их число входят физиологические варианты, которые характеризуются или необычно суженной, или уменьшенной, или увеличенной головкой.

Молодые, или незрелые, формы сперматозоидов имеют вокруг головки и шейки остаток цитоплазмы («воротничок»), наблюдаются при частых половых сношениях и не способны к оплодотворению.

Старые формы сперматозоидов (гиперхромия, ахромия, вакуолизация головки) появляются в эякуляте после продолжительного полового воздержания и не пригодны для оплодотворения.

К патологическим формам относятся сперматозоиды с деформациями головки: мегалосперматозоиды (гигантосперматозоиды), макро-, микросперматозоиды, giảm dần, двуглавые сперматозоиды с одной шейкой и одним хвостом, без шейки с одним или несколькими хвостами, без хвоста, с хвостом без головки и пр.

У здоровых мужчин в нормальном эякуляте патологические формы сперматозоидов обычно не встречаются, но иногда их количество при нормальной оплодотворяющей способности эякулята может достигать 20 %, из них приблизительно 15 % составляет патология головки, 3-5 % — тела, 2-5 % — хвоста.

При патологическом сперматогенезе, секреторной форме бесплодия выявляются сперматозоиды с патологией головки и шейки. Патология хвоста обычно экскреторного происхождения, возникает при прохождении сперматозоида по семявыносящим путям.

В окрашенных препаратах также четко просматриваются отдельно расположенные герминативные клетки на разных стадиях дифференцировки и созревания, что имеет важное значение для дифференциации аспермии и азооспермии.

Сперматогонии имеют округлую, иногда овальную форму, диаметр их 5—12 мкм. Ядро занимает приблизительно одну треть клетки, tối- или светлоокрашенное, с 1—2—3 нуклео- лами, часто расположенными вблизи кариолеммы (Màng nhân), структура хроматина мелкозернистая. Các tế bào chất là hẹp, basophilic, Đồng tính. Сперматогонии несколько раз митотически делятся. Встречаются клетки с хорошо определяемыми стадиями митоза.

Часть клеток, образовавшихся в результате митоза, дифференцируются в сперматоциты I, а затем II порядка. Сперматоциты I порядка — круглые или полигональные клетки диаметром 17—19 мкм с крупным круглым ядром и светлой мелкозернистой цитоплазмой. В окрашенных препаратах видна четкая перинуклеарная зона.

Сперматоциты II порядка образуются в результате мейоза. Они меньше, чем сперматоциты I порядка (диаметр 15 m), но по морфологии почти идентичны. В эякуляте встречаются чаще, чем сперматоциты I порядка, но значительно реже, чем сперматиды.

Spermatydы — мелкие, круглые или вытянутой формы клетки диаметром 12—15 мкм с круглыми гиперхромными ядрами, расположенными центрально или эксцентрично. Возможно наличие многоядерных сперматид. Tế bào chất Pale, базафильная, thường vacuolated.

Сперматиды превращаются в сперматозоиды.

Клетки сперматогенеза в нормальной сперматограмме составляют не более 2 %. Большое количество их наблюдается при бесплодии секреторного характера.

Для фазово-контрастной микроскопии эякулят разводится изотоническим раствором хлорида натрия с добавлением небольшого количества 1 % водного раствора риванола или карболовой кислоты для снижения подвижности сперматозоидов.

При люминесцентной микроскопии на предметное стекло наносится одна капля эякулята и одна капля акридинового оранжевого в разведении 1:20000. Капли смешиваются и накрываются покровным стеклом. Для микроскопии используются окуляр 7Х и объектив 40Х. Живые сперматозоиды окрашиваются в зеленый цвет, погибшие — в оранжевый. Нормальные и патологические формы сперматозоидов легко различить вследствие их морфологических особенностей.

Правила работы на фазово-контрастном и люминесцентном микроскопах описаны в инструкциях к этим приборам. При использовании фазово-контрастной и люминесцентной микроскопии сперматограмма подсчитывается по общим правилам.

На основании микроскопического исследования эякулята можно выявить различные патологические состояния.

• Аспермия — отсутствие в эякуляте сперматозоидов и клеток сперматогенеза.
• Азооспермия — отсутствие сперматозоидов при наличии клеток сперматогенеза.
• Астеноспермия — уменьшение числа подвижных клеток и увеличение числа патологических форм при нормальном общем количестве сперматозоидов.
• Олигоастеноспермия — уменьшение числа сперматозоидов и их подвижных форм и увеличение количества патологических форм.
• Некроспермия — неподвижность всех сперматозоидов в препарате даже после «оживления».
• Акиноспермия — состояние, при котором в отличие от некроспермии ранее неподвижные сперматозоиды после «оживления» начинают активно двигаться.