Thiếu máu gemoliticheskaya Nasledstvennaya, do hoạt động của thiếu pyruvate kinase của các tế bào máu đỏ

Thiếu máu gemoliticheskaya Nasledstvennaya, Liên quan đến sự thiếu hụt hồng cầu pyruvate kinase - một hình thức tương đối hiếm gặp của thiếu máu tán huyết, được thừa kế một cách lặn NST thường, Nó cung cấp cho Biểu hiện lâm sàng ở đồng hợp tử, tiền có dấu hiệu tan huyết nội bào, macrocytosis của hồng cầu, nội dung kali thấp. Có hơn 200 trường hợp của các hãng đồng hợp tử của các hoạt động thâm hụt piruvatkinaznoy.

Bệnh sinh

Pyruvate kinase là một trong những enzyme, kết glycolysis. Đây glycolysis link và hình thành ATP nikotinamiddinukleotid. Phần lớn các bệnh nhân thiếu hụt hoạt động kinase pyruvate được giảm trong các nội dung của các tế bào máu đỏ của hai chất chuyển hóa các, Trong một số trường hợp, các nội dung của ATP là bình thường, nhưng bị xáo trộn sự ổn định của ATP trong quá trình ủ bệnh. Mức bình thường của ATP tìm thấy tại reticulocytosis đáng kể. Điều này là do sự hiện diện của hồng cầu lưới và khả năng của ti thể ATP không chỉ thông qua quá trình đường phân, mà còn do sự phosphoryl hóa oxy hóa.

Hậu quả của thiếu pyruvate kinase Đó cũng là sự tích tụ của các sản phẩm của glycolysis, hình thành ở giai đoạn trước - fosfofenolpiruvata, 3-phosphoglycerate, và đặc biệt là 2,3-diphosphoglycerate. Nội dung piruvatanlaktata giảm trong các tế bào máu đỏ.

Việc thiếu ATP trong hồng cầu thiếu pyruvate kinase Nó dẫn đến sự rối loạn về chức năng của máy bơm ATP-aznogo các tế bào máu đỏ và để sự mất mát của các ion kali, trong đó nồng độ ion natri trong hồng cầu của không tăng. Điều này gây ra sự sụt giảm về nội dung của các ion hóa trị một trong hồng cầu, mất nước của tế bào và co rút của nó. Hiện tượng này được gọi là dessikotsitoz. Sự sụt giảm trong các tế bào máu đỏ của nước làm phức tạp quá trình oxy hóa và oxy phát hành bởi hemoglobin. Về vấn đề này, một số vai trò bù chơi bởi một sự tích lũy đáng kể trong hồng cầu của 2,3-axit difosfoglitserinovoy.

Ái lực của hemoglobin cho oxy được giảm bởi sự tương tác của nó với 2,3-diphosphoglycerate. Do đó, ở nồng độ cao hơn cho 2,3-diphosphoglycerate trả oxy đến các mô được tạo điều kiện.

Biểu hiện lâm sàng của các hoạt động của thiếu pyruvate kinase

Biểu hiện lâm sàng của hoạt động kinase pyruvate thiếu hụt phụ thuộc vào mức độ tan máu. Trong một số trường hợp, tăng tán huyết là biểu hiện lúc mới sinh và được đi kèm với sự xuất hiện của khủng hoảng tan máu nặng, gây ra sự cần thiết phải truyền máu để duy trì hemoglobin trong cấp tiểu bình thường. Trong các trường hợp khác, bệnh có thể xảy ra hầu như không có triệu chứng với các dấu hiệu đầu tiên của việc gia tăng tiêu huyết (màng cứng subikterichnost và da) tuổi từ 17-30.

Nói chung; so với microspherocytosis, thiếu pyruvate kinase có một nghiêm trọng hơn.

Hầu như tất cả các bệnh nhân có thể sờ thấy lách. Sự gia tăng nhẹ của nó tiết lộ một số bất thường các hãng dị, mặc dù họ bị thiếu máu, thông thường, mất tích. Một số bệnh nhân có thể có lách to. Một sự gia tăng đáng kể trong gan hiếm khi tìm thấy. Ở những bệnh nhân bị cô lập với vết loét ở chân xác định.

Phòng thí nghiệm các chỉ số hoạt động của thiếu pyruvate kinase

Phần lớn các bệnh nhân thiếu hụt hoạt động kinase pyruvate quan sát thiếu máu vừa phải (4,34- 6,21 mmol / l, hoặc 70-100 g / l), Tuy nhiên, trong các cuộc khủng hoảng hemoglobin có thể được giảm đến 3,1 3,72 mmol / l (50-60 G / l). Nội dung eritrotsitov- 2,5-3,0 T 1 l. Khủng hoảng tán huyết có thể được gây ra bởi nhiễm trùng. Có những trường hợp tăng tan máu trong kỳ kinh nguyệt.

Các tế bào hồng cầu của bệnh nhân bị thiếu pyruvate kinase đặc trưng bởi macrocytosis với normohromiey, anisocytosis nhẹ và poikilocytosis. Có một polychromatophilia công bằng. Đôi khi thấy các tế bào máu đỏ mishenevidnye và các tế bào máu đỏ với các cạnh vỏ sò hoặc ở dạng của cây dâu tằm, thường được xác định basophilic hồng cầu punktatsiya, Jolly corpuscles. Một số bệnh nhân trong máu ngoại vi cho thấy một số lượng đáng kể của erythrokaryocytes, trong cuộc khủng hoảng, nó có thể được tăng lên đến 60-70 %. ESR, số lượng tế bào máu trắng, leukogram, số lượng tiểu cầu trong phạm vi bình thường. Cũng như với các hình thức khác của bệnh thiếu máu huyết tán, trong tủy xương cho thấy một sự kích thích mạnh mầm đỏ tạo máu.

Mức độ bilirubin, thông thường, tăng do gián tiếp.

Các hemoglobin plasma miễn phí bình thường, nhưng nó có thể được giảm mức haptoglobin. Hemosiderin trong nước tiểu là vắng mặt. Nội dung của hemoglobin bào thai và hemoglobin A₂ trong phạm vi bình thường.

Kháng thẩm thấu của thiếu hồng cầu pyruvate kinase trong hầu hết các trường hợp bình thường, đôi khi giảm sau ngày ủ. Autogemoliz, thông thường, nâng cấp lên mức độ khác nhau. Có trường hợp thiếu pyruvate kinase với autogemolizom bình thường. Trong lần đầu tiên báo cáo trường hợp thiếu pyruvate kinase đã được đăng ký loại II autogemoliza, sửa chữa thêm ATP, và không chỉnh sửa hoặc hơi thêm glucose. Sau đó, nhiều trường hợp đã được mô tả với kiểu thiếu hụt enzyme tôi autogemoliza hay không. Vì vậy, nó không được khuyến khích áp dụng các phương pháp autogemoliza cho chẩn đoán phân biệt thiếu máu tán huyết. Tuổi thọ của các tế bào máu đỏ thiếu hụt hoạt động pyruvate kinase luôn rút ngắn.

Loại kế thừa hoạt động pyruvate kinase tính trạng lặn. Dị hợp thực tế lành mạnh, Theo các nhà nghiên cứu khác nhau, mức độ nghiêm trọng của sự thâm hụt đã dao động từ 50 đến 70 % định mức.

Hoạt động chẩn đoán thiếu pyruvate kinase

Việc chẩn đoán thiếu pyruvate kinase của các tế bào máu đỏ có thể được dự kiến ​​sẽ cung cấp trong các trường hợp thiếu máu tán huyết, chảy trong những năm qua với sự gia tăng trong lá lách, thiếu máu ngoại vi smears dấu hiệu microspherocytosis, elliptotsitoza và stomatotsitoza.

Kiểm tra định tính để xác định các hoạt động của pyruvate kinase. Với mục đích này, phương pháp này được sử dụng rộng rãi vết huỳnh quang, dựa trên, mà trong quá trình phản ứng, kataliziruemoy piruvatkinazoy, nikotinamiddinukleotid oxy hóa và sự phát huỳnh quang biến mất.

Các hoạt động của pyruvate kinase ở người khỏe mạnh dao động từ 4,0 đến 7,7 mmol (min / 1010 hồng cầu) hoặc 4,0 đến 7,7 Quyền lực. Phần lớn các hoạt động của enzyme bệnh đồng hợp tử ít 1 Quyền lực. Tuy nhiên, có thể có trường hợp suy giảm nhẹ trong hoạt động của các enzyme. Chẩn đoán một dạng hiếm của bệnh thiếu máu huyết tán là rất khó khăn, và chẩn đoán có thể chỉ được thực hiện trong nghiên cứu về động học enzyme.

Chẩn đoán phân biệt bệnh thiếu máu huyết tán, kết hợp với sự thiếu hụt của pyruvate kinase

Chẩn đoán phân biệt bệnh thiếu máu huyết tán, kết hợp với sự thiếu hụt của pyruvate kinase, cần thiết để thực hiện các hình thức khác của bệnh thiếu máu huyết tán di truyền.

Vì hầu hết các bệnh nhân thiếu trong hoạt động pyruvate kinase không giống như cá nhân, khổ microspherocytosis, elliptotsitozom, stomatocitozom, thiếu máu tán huyết, vận chuyển lạnh hemoglobin không ổn định, và bệnh thalassemia là do di truyền trong một tính trạng lặn, rằng bệnh lý này chỉ được tìm thấy trong cùng thế hệ và hầu như không bao giờ nhìn thấy các bậc cha mẹ.

Khi thiếu máu di truyền, vận chuyển lạnh hemoglobin không ổn định, đặc biệt là trong bệnh nặng, đôi khi proband là các tàu sân bay đầu tiên của đột biến, và sau đó bệnh được truyền cho thế hệ sau. Do đó, chẩn đoán phân biệt phải được thực hiện với hemoglobin, vận chuyển lạnh hemoglobin không ổn định, cũng như thiếu máu huyết tán di truyền lặn, gây ra bởi hoạt động thiếu các enzyme khác.

Nó đóng một vai trò ổn định hemoglobin hỗ trợ, Yego điện. Để loại trừ fermentopathia khác điều tra các hoạt động của các enzym khác của hồng cầu, và loại trừ bệnh thiếu máu tan máu tự miễn thực Coombs, agregatgemagglyutinatsionnaya.

Phương pháp huỳnh quang để xác định các hoạt động bằng piruvatkiiazy Beutler

Hoá chất.

1. Axit Fosfoenolpirovinogradnaya (tritsiklogeksilammoniynaya muối) 0,15 M dung dịch, trung hòa độ pH 7,0-8,0 0,2 M dung dịch NaOH (0,03 ml).
2. ADF 0,03 M dung dịch, trung hòa (0,1 ml).
3. NAD-N 0,015 M dung dịch, trung hòa (0,1 ml).
4. Magnesium sulfate 0,08 M dung dịch (0,1 ml).
5. Dung dịch đệm phosphate kali 0,25 M, pH 11 7,4 (0,05 ml).
6. Nước Distillirovannaya (0,62 ml). Hỗn hợp này có thể được lưu trữ tại - 20 ° C không phải là hơn một tuần.

Phương pháp.

Để sử dụng huyết nghiên cứu, chụp với heparin hoặc sodium citrate. Nó được ly tâm, hút khí và chuẩn bị plasma 20 % hệ thống treo của các tế bào máu đỏ bằng cách thêm bốn tích dung dịch natri clorid đẳng trương.

Treo hồng cầu trong một số tiền 0,02 ml được trộn với 0,2 ml thuốc thử và ủ 30 phút ở 37 ° C. Một giọt được đặt trên giấy lọc, và duyệt fluoroscope. Huỳnh quang cơ bản đã được phát hiện ngay lập tức sau khi bổ sung hồng cầu vào hỗn hợp trước khi ủ. Thông thường sau 30 phút ủ nó biến mất, và các hoạt động cốt thiếu pyruvate kinase. Đây là, NADH mà phát huỳnh quang dưới ảnh hưởng của bức xạ UV trong khu vực, gần có thể nhìn thấy, trong khi NAD không phát huỳnh quang. Bởi vì các giải pháp nêu trên là không ổn định và dễ dàng bị suy thoái, đòi hỏi theo dõi. Bạn nên cẩn thận tách các lớp của các tế bào máu trắng, kể từ khi hoạt động của các hoạt động của enzyme hồng cầu thiếu pyruvate kinase trong bạch cầu có thể bình thường.