Các phương pháp phát hiện các Leishmania ở cạo của các mô bị ảnh hưởng bởi sự cô lập về văn hóa tinh khiết
Khi gieo nạo mô bị ảnh hưởng của bệnh nhân để một Leishmania môi trường dinh dưỡng cụ thể nhân và họ có thể được phát hiện bằng kính hiển vi.
Thuốc thử
Среда W.W.W. cho việc trồng Leishmania (14 agar g, 6 g natri clorua, về 150 ml máu thỏ defibrinated, lấy trực tiếp từ trung tâm trước khi chuẩn bị môi trường, 900 ml nước cất). Trong nước cất đã được bổ sung natri clorua và thạch. Các bình chứa vừa được đun nóng cho đến khi tan chảy hoàn toàn của thạch, và 20-30 phút tiệt trùng trong một tiệt trùng hơi nước ở 147,1 kPa (15 tại).
Làm lạnh đến 56 ° C agar thêm vô trùng defibrinated thỏ máu, khuấy động bằng cách xoay bình và điền vào pipet vô trùng 4 ống ml. Thạch máu Flask trong pha chế là một cốc nước ở nhiệt độ 58 ° C. Các ống với những lời khuyên trung.
Sau khi kiên cố hóa thạch, chúng được đặt trong một lồng ấp cho một ngày tại 37 ° C để kiểm soát vô sinh và nhận được ngưng tụ chất lỏng. Nếu nó được sản xuất là không đủ, trước khi gieo hạt trong lọ vô trùng, bạn có thể thêm về 1 Một ml trong những giải pháp sau đây: 0,85 % natri clorua, 1 % giải pháp peptone, Giải pháp Hanks, lactalbumin hydrolysate hoặc phương tiện truyền thông dinh dưỡng khác ở nồng độ đẳng trương.
Phương pháp phát hiện Leishmania trong scrapings của mô bị ảnh hưởng bởi sự cô lập về văn hóa tinh khiết
Khi bạn chọn một nền văn hóa theo một cách cẩn thận các quy tắc của vô sinh. Các khu vực thử nghiệm của da được lau bằng một miếng gạc cotton, ẩm 70 % rượu.
Sau khi bay hơi của rượu các đầu nhọn của một mắt dài -củ rạch dao mổ vô trùng 2-3 mm. Từ tận đáy cắt với pipette Pasteur vô trùng làm cào mô. Kết quả là giọt huyết thanh-đẫm máu đã được chuyển giao cho một ống nghiệm với môi trường. Thao tác được thực hiện nhiều lần, gieo liệu mỗi lần một ống mới. Cắm tai nhúng trong parafin hoặc đặt chúng mũ cao su và được đặt trong một lồng ấp ở 22-24 ° C.
Đánh giá kết quả
Cây trồng được kiểm tra dưới kính hiển vi trên một cơ sở hàng ngày để xác định tác nhân gây bệnh. Khám phá các loại thuốc có nguồn gốc, chuẩn bị theo phương pháp giọt nghiền, ống kính 40×40. Các kết quả được coi là gieo hạt tiêu cực, nếu trong 40 ngày mầm bệnh đã không được tìm thấy. Nền văn hóa có hình thon dài Leishmania (10-12 Micron với hệ thống dây điện).
Áp dụng các phương pháp nuôi cấy là hữu ích nhất khi tuberculoid dạng leishmaniasis, chẩn đoán rằng các phương pháp khác có thể ít hiệu quả.
