Các nghiên cứu hóa học của dịch não tủy
Sự khác biệt chính trong thành phần của dịch não tủy và huyết tương là rằng, trong chất lỏng xung quanh 300 lần ít protein, ít hơn đáng kể cholesterol, glucose và nhiều hơn nữa clorua.
Hóa học dịch não tủy thành phần Nó phản ánh những thay đổi lớn, xảy ra trong hệ thống thần kinh trung ương.
Các protein trong dịch não tủy
Thông thường, trong các chất lỏng từ tâm thất của não bộ chứa 0,12-0,2 g protein / l, của não tiểu não tsisterny- 0,1-0,2, từ không gian dưới nhện của tủy sống - 0.22 0,33 g / l.
Giảm hoặc tăng mức độ protein dịch não tủy Nó cho thấy một quá trình bệnh lý. hàm lượng protein trung bình vẫn không phủ nhận sự hiện diện của một cơ sở hữu của hệ thống thần kinh trung ương, vì rối loạn khả năng tỷ lệ CSF phân protein. Theo thành phần protein dịch não tủy bình thường khác với sự vắng mặt euglobulin huyết thanh và sự hiện diện của phe phái thêm.
Nghiên cứu về nguồn gốc của protein cho thấy dịch não tủy, rằng hầu hết 10 % họ không có điểm tương đồng miễn dịch với protein huyết thanh và thuộc loại protein CNS-cụ thể.
Tăng hàm lượng protein trong dịch não tủy Đó là do sự rối loạn huyết động học của não và máu trì trệ trong các mạch thần kinh trung ương.
Prealbuminovaya phần một chất lỏng từ thất não là 13-20%, bể não tiểu não - 7-13, một chất lỏng, thu được từ một đâm thủng thắt lưng,- 4-7 % tổng lượng protein. phần protein Đây là không gian rượu ẩn phong tỏa, nó có thể được che đậy bởi albumin và không phải lúc nào phân biệt với một mức độ cao của protein trong dịch não tủy.
Trong các khối u não, và các bệnh viêm của hệ thống thần kinh trung ương giảm trong nội dung dịch não tủy của các phần phân đoạn tốt (Albumin, a1- và α2-globulin) và làm tăng nội dung của các thô (b- и c-глобулинов).
Để phát hiện tăng globulin nội dung trong dịch não tủy có thể được sử dụng phản ứng Pandey, dựa trên độ đục của chất lỏng do đông máu của protein dưới ảnh hưởng của phenol. Thực hiện phản ứng này theo phương pháp thả làm cho nó có thể tiết kiệm đáng kể chất lỏng thử nghiệm, thường giao cho các phòng thí nghiệm trong một số lượng rất nhỏ.
phản ứng Globulinovыe mặc dù chúng được sử dụng trong chẩn đoán phòng thí nghiệm, nhưng cung cấp duy nhất một ý tưởng gần đúng của hàm lượng protein.
Lượng protein trong dịch não tủy xác định trong cùng một, trong nước tiểu, phương pháp BRANDBERG-Roberts-STOLNIKA hoặc phương pháp so màu sử dụng axit sulfosalicylic và natri sunfat.
Cường độ của độ đục, hình thành khi bổ sung vào axít sulfosalicylic dịch não tủy, tỷ lệ thuận với nồng độ protein.
Hàm lượng protein xuất huyết CSF có thể tăng lên tại các chi phí của protein huyết tương. Khi nhận được dịch não tủy, nhuộm với máu, bệnh nhân phải lấy máu từ ngón tay vào ống và thông qua một dung dịch natri clorid đẳng trương để có được một giải pháp của, màu hơi mãnh liệt hơn, hơn chất lỏng. Ống với dịch não tủy và máu nên độ dày và màu sắc tương tự thủy tinh. màu mực chất lỏng trong so sánh, thận trọng thêm vào máu pha loãng giải pháp clorua natri đẳng trương, sau đó nó được ly tâm và lượng protein một cách minh bạch không màu trên- lỏng trầm tích. Đúng protein trong dịch não tủy thu được bằng cách trừ đi lượng protein trong máu pha loãng từ số lượng protein trong xuất huyết lỏng. Kỹ thuật này không phải là rất chính xác, Nó được sử dụng trong các trường hợp, khi dịch não tủy xuất huyết trở nên không màu sau khi ly tâm.
Hàm lượng protein trong dịch não tủy tăng với rối loạn huyết động học, viêm, sau khi hoạt động trên hệ thống thần kinh trung ương, cũng như khối u của não và tủy sống. gia tăng đáng kể lượng protein được quan sát ứ khi tĩnh mạch kết hợp với lưu thông suy giảm của dịch não tủy. Trong trường hợp này, hàm lượng cao của tế bào protein đếm bình thường - phân ly protein tế bào. Cùng với xanthosis nó là đặc trưng hội chứng Froana, được quan sát thấy trong khối u của não và tủy sống. Giảm lượng protein trong dịch não tủy được đánh dấu tại hypersecretion và não úng thủy của nó.
Phản ứng Nonne-Apelt globulin dlya cụ thể. nguyên tắc của nó bao gồm trong kết tủa globulin trong sự hiện diện của giải pháp ammonium sulfate bão hòa. Phản ứng được coi là tích cực khi các nội dung trong dịch não tủy 0,05 % globulin và nhiều hơn nữa. Nó cung cấp cho một dấu hiệu của nội dung của globulin trong dịch não tủy.
Số globulin tăng đáng kể trong quá trình viêm và thoái hóa mãn tính trong hệ thống thần kinh trung ương (viêm màng não, meningoэncefalit, tê liệt chung, đa xơ cứng). Bằng cách tăng mức độ globulin vỡ albumin-globulin chất lỏng tỷ lệ não tủy. Thông thường, đó là trong khoảng 0,2-0,3. Đối với một bức tranh chính xác hơn về phần protein của dịch não tủy cần xác định chúng bằng điện di hoặc các phương pháp định lượng khác.
Điều tra của các thành phần protein của dịch não tủy bằng điện - Quá trình càng tốn nhiều thời gian, hơn so với nghiên cứu về thành phần của huyết thanh máu. Trong dịch não tủy của 200-400 lần ít protein, Tuy nhiên nó trước tập trung (tập trung) bởi siêu lọc trong chân không, dializom chống gummiarabika hoặc dextran, và bốc hơi trong chân không. Tuy nhiên, nếu phân protein dày CSF có thể bị mất hoặc hiện vật để lộ. Liên quan đến quyết định này có thể ngờ được lợi thế proteinogram dịch não tủy bằng điện di trên gel agar hoặc polyacrylamide.
Điện di trong gel agar trong người khỏe mạnh trong γ bí mật mà đến dịch não tủy2– и c3-globulin.
Một phương pháp nhạy cảm hơn của dịch não tủy protein phân đoạn, nó không đòi hỏi dày, Nó là polyacrylamide gel điện di, cho phép xác định các phần protein 30-40, chủ yếu trong lĩnh vực gamma-globulin.
phương pháp immunoelectrophoresis trong dịch não tủy xác định globulin miễn dịch A, m, g, đó là ít 3-4 lần so với nội dung, hơn huyết thanh: 2,65 mg / l IgG, 2,05 mg / l IgA và 0,24 mg / l IgM.
thành phần phân đoạn của protein dịch não tủy tuổi phải trải qua những thay đổi lớn. Đối với trẻ em được đặc trưng bởi mức độ thấp của albumin, mặc dù mức độ trước- albumin phần tương đối cao. Ở người cao tuổi có sự gia tăng trong nội dung của IgA và IgG, mà thuộc về γ-globulin.
Nghiên cứu Protein thành phần phân đoạn của dịch não tủy là một giá trị chẩn đoán quan trọng, Vì trong một số bệnh thần kinh trung ương (khối u, rasseânnom xơ cứng) tổng số tiền của nó không thể thay đổi. diagnostically nhất có giá trị là xác định đồng thời phân protein, lipo- và glikoproteidov.
Được thành lập, rằng đối với các bệnh viêm cấp tính của hệ thần kinh đặc trưng bởi một nội dung tăng của hầu hết các dịch não tủy α-globulin, cho viêm mãn tính - immunoglobulin, và u ác tính - β-lipoprotein.
Phản ứng keo xác định protein
phản ứng Lange Nó dựa trên, rằng tiếp xúc dịch não tủy bệnh lý thay đổi bằng dung dịch keo mịn chia của clorua vàng trong sự hiện diện của chất điện tiến đông máu và màu sắc của dung dịch thay đổi.
Thông thường, dịch não tủy không làm thay đổi màu sắc của dung dịch keo vàng, nó vẫn còn đỏ. Sự đổi màu của dung dịch áp dụng trong các bệnh lý đánh giá số liệu:
- đỏ - 0;
- màu đỏ và tím - 1;
- tím - 2;
- màu đỏ và màu xanh hoặc màu đỏ và trắng đục với một sự lắng đọng của các hạt nhỏ - 3;
- sinevatыy - 4;
- một màu hồng nhạt với một ánh xanh, và trầm tích - 5;
- không màu với trầm tích - 6.
Phân biệt Bốn loại phản ứng Lange:
- bình thường, trong đó sự thay đổi màu không xảy ra ở tất cả, hoặc trong 3-5 ống màu hơi khác so với màu sắc trong ống nghiệm (màu đỏ với một ánh tím nhẹ);
- degenerativnыy, đặc trưng bởi một sự thay đổi trong màu sắc trên nửa trái của hàng loạt các ống (từ tím đến sự đổi màu) và sự xuất hiện của trầm tích; quan sát trong bệnh giang mai của não bộ, rasseânnom xơ cứng, khối u của não và tủy sống, làm mềm của não, và những người khác.;
- viêm, mà có xu hướng thay đổi màu sắc ở bên phải hoặc ở giữa một loạt các ống; Viêm màng não quan sát thấy ở dân tộc học khác nhau;
- hỗn hợp, trong đó sự thay đổi màu xảy ra ở bên trái, và trong phần bên phải của một loạt các ống; tổn thương hỗn hợp quan sát được ở màng và mô não.
Phản ứng Takata-Ara bổ sung hoặc xác nhận phản ứng Lange. Dựa trên các protein đông máu dịch não tủy dưới ảnh hưởng của thủy ngân dichloride và các giải pháp thay đổi màu sắc trong sự hiện diện của một giải pháp hỗn hợp của fuchsin.
Có Bốn loại phản ứng:
- tiêu cực (bình thường) - hỗn hợp violet màu là không thay đổi, chất lỏng trong suốt;
- degenerativnыy - mất kết tủa màu xanh-tím, trên đó có một chất lỏng trong suốt;
- viêm - một hỗn hợp của màu hồng mà không trầm tích, đổi màu theo thời gian;
- hỗn hợp - chất lỏng trong suốt hơn một kết tủa màu hồng.
Phản ứng Takata-Ara là nhạy cảm hơn, so với phản ứng Lange.
Mastic được sử dụng phản ứng cho việc chẩn đoán của các quá trình thoái hóa và viêm trong CNS.
phản ứng Triptofanovaya và phản ứng Levinson được sử dụng để chẩn đoán bệnh lao.
Phản ứng của Friedman được sử dụng để chẩn đoán sớm viêm màng não. Nguyên tắc là, rằng dưới ảnh hưởng của kali permanganat xảy ra quá trình oxi hóa khử và màu sắc thay đổi dịch não tủy, và dưới ảnh hưởng của TCA kết tủa protein chứa trong đó. Khi bị thương tích, khối u, giang mai của não bộ, nhiều màu lỏng xơ cứng không thay đổi.
Các dịch não tủy được phát hiện bởi 20 đến 25 axit amin tự do. Nghiên cứu thành phần axit amin của sắc ký dịch não tủy bằng các phương pháp hiện đại, ionoobmennoy flyuorometrii.
Nội dung của các axit amin tự do và amin nitơ trong dịch não tủy trung bình 0.6- 1,4 mmol / l, đó là dưới, hơn trong huyết tương máu - 1,9-2,8 mmol / l.
Một vai trò quan trọng trong việc chẩn đoán bệnh của hệ thần kinh là những nội dung nghiên cứu trong glucose dịch não tủy, enzyme, hlorydov, bilirubin, cholesterol và nitơ dư.
Glucose trong dịch não tủy
Thông thường, trong dịch não tủy chứa 2,5- 3,33 mmol / L glucose. Để xác định số tiền đó trong dịch não tủy sử dụng bất kỳ phương pháp, dùng để xác định mức độ glucose trong máu. Lỏng điều tra ngay lập tức sau khi uống, vì nó đến một cách nhanh chóng glycolysis. Trong viêm cấp tính và bán cấp của màng não glucose cấp trong giảm dịch não tủy, đôi khi (mà là rất hiếm) nó hoàn toàn biến mất. Trong hầu hết các trường hợp, glucose trong dịch não tủy không có viêm màng não do Streptococcus và viêm màng não.
Tăng mức độ glucose trong dịch não tủy được quan sát cho viêm não và động kinh. Trong não khối u glucose có thể hoặc là phát triển, hoặc rơi.
Axit lactic trong dịch não tủy
Trong dịch não tủy của người khỏe mạnh phương pháp enzyme được xác định bởi tỷ lệ trung bình 1,54 (0,89-2,8) mmol / L axit lactic.
tăng đáng kể nhất nội dung của axit lactic trong dịch não tủy theo quy trình thiếu oxy và phá hoại trong mô não, có không chỉ chẩn đoán, nhưng giá trị tiên lượng. Enzymes, tham gia vào sự trao đổi chất của hệ thống thần kinh trung ương, được tìm thấy trong dịch não tủy với số lượng nhỏ hơn nhiều, hơn trong máu, và được xác định bằng các phương pháp tương tự, máu.
Của enzyme glycolytic thường xác định aldolase và lactate dehydrogenase và enzyme của nó.
Clorua trong dịch não tủy
Các hàm lượng clorua trong dịch não tủy người lớn bình thường 197-242 mmol / l, ở trẻ em - 195-204 mmol / l. Bất kỳ kỹ thuật có thể được sử dụng để xác định mức độ của clorua trong dịch não tủy, sử dụng cho clorua máu, ứng dụng tuy nhiên lợi thế của phương pháp xác định khối lượng chất lỏng bằng cách chuẩn độ với nitrat bạc.
Giảm hàm lượng clorua quan sát thấy trong viêm màng não lao, đôi khi - với viêm não, povyshenie- trong nhiễm độc niệu.
Bilirubin trong dịch não tủy
Bilirubin trong dịch não tủy và chất lỏng từ u nang não có nguồn gốc đường máu và gây xanthosis. Để xác định tính và định lượng của cùng một mẫu bilirubin sử dụng, như đối với việc xác định bilirubin trong máu. Thông thường bilirubin trong dịch não tủy không được phát hiện.
Cholesterol trong dịch não tủy
Ở người khỏe mạnh, cholesterol trong dịch não tủy hoặc mất tích, hoặc nội dung của nó dao động từ dấu vết để 0,003-0,005 mmol / l. nồng độ cholesterol tăng quan sát trong bệnh viêm màng não và u não, đặc biệt là ác tính.
có thể được sử dụng để xác định cholesterol trong dịch não tủy phương pháp Engelhardt-Smirnov hoặc phương pháp Ilka.
Thông thường, hàm lượng nitơ dư trong dịch não tủy trung bình 8,6-14,3 mmol / l, t. nó là. trên 50 % dưới, hơn trong máu.
lượng nitơ dư trong dịch não tủy được điều tra bằng các phương pháp tương tự, và rằng nội dung của nitơ dư trong máu.
Glycoprotein và lipoprotein trong dịch não tủy
Một nghiên cứu của các glycoprotein và lipoprotein tổ chức bằng điện trên giấy trong một agar gel trước dầy hoặc polyacrylamide hoặc CSF mẹ đẻ. Những nghiên cứu này được sử dụng để chẩn đoán bệnh viêm và các khối u.
Các dịch não tủy xác định các chất hoạt tính sinh học của tính chất hóa học khác nhau:
- Guitar Picks (acetylcholine, noradrenaline, dofamin, Serotonin, axit gamma-aminobutyric);
- hormone tuyến yên, tuyến tùng và tuyến nội tiết khác;
- neuropeptides (endorphin, enkephalins);
- nucleotide cyclic (adenozintsnklofosfat, axit guanylic);
- prostaglandins;
- kinins.
Hầu hết các hợp chất hoạt tính sinh học được xác định bởi miễn dịch phóng xạ, mà ngày càng được sử dụng trong chẩn đoán phòng thí nghiệm lâm sàng.