Chẩn đoán vô sinh miễn dịch gây ra

Trong một cuộc sống lâu dài cưới nhau mà không sử dụng biện pháp tránh thai, và trong sự hiện diện của vi khu vực của các màng nhầy ở bộ phận sinh dục có thể xảy ra dần dần phát kháng nguyên tiêm tinh trùng. Việc kiểm tra sức khỏe của vợ chồng, bao gồm trong một cuộc hôn nhân cằn cỗi, không thể xác định nguyên nhân của vô sinh ở 10-15 % trường hợp. Đó là trong nhóm này của vợ chồng vô sinh khi áp dụng phương pháp đặc biệt của điều tra bí mật kênh cổ tử cung, kháng thể trong huyết tương tinh dịch và tinh trùng huyết thanh thường được phát hiện (ASAT), Sử dụng các bài kiểm tra và định lượng của nghiên cứu miễn dịch học.

Postkoytalnыy thử nghiệm (FCT)

Postkoytalnыy thử nghiệm (FCT) Nó đề cập đến chất lượng xét nghiệm miễn dịch. Một kết quả xét nghiệm âm tính cho thấy sự vắng mặt của tinh trùng trong ống cổ tử cung bí mật, nhưng bạn không thể xác định nguyên nhân của sự vắng mặt của họ.

Phương pháp. Bởi số lượng tinh trùng di chuyển được trong bí mật kênh cổ tử cung, thu được sau khi giao hợp, thiết lập mức độ của hành vi vi phạm về khả năng thâm nhập của họ với vô sinh hoặc khả năng miễn dịch cho họ nhầy của ống cổ tử cung.

FCT là cần thiết để thực hiện các điều kiện sau đây: Nghiên cứu này cần được tiến hành trong giai đoạn rụng trứng, trong đó tiết lộ colpocytologic hoặc phương pháp khác, sau khi vợ chồng kiêng khem trước trong vòng 2-3 ngày.

Phương pháp luận của. Sau khi giao hợp thông thường cho một người phụ nữ 30 phút nên nằm trên lưng, uốn đầu gối của bạn. Thụt rửa và làm sạch các cấm, chỉ cần khăn giấy vệ sinh, được loại bỏ trong quá trình chụp cho việc nghiên cứu các chất nhầy của ống cổ tử cung. Sau 2-4 giờ, cho phép và sau 6-10 giờ (thời gian, trôi qua trước khi nghiên cứu, chỉ ra trong phân tích) sau khi giao hợp cổ tử cung tiếp xúc bằng cách sử dụng một gương Cuzco và chất nhầy tuyến cổ hút hoặc bơm tiêm tuberculin (không có kim), pipet với một bóng đèn cao su, hoặc polyethylene catheter.

Khi rửa dụng cụ không nên sử dụng chất khử trùng, khi chúng ảnh hưởng khả năng vận động của tinh trùng. Một giọt nước nhầy kết quả của các kênh cổ tử cung được chuyển giao cho một slide kính ấm, thế lớp vỏ bọc, Lãnh thổ bôi trơn bằng parafin lỏng bị rò rỉ. Xây dựng ngay lập tức mikroskopiruyut (thị kính 7X, Mục tiêu 40X), xác định số lượng và tính chất của sự vận động của tinh trùng. Các thuốc có thể được phát hiện với tinh trùng hoạt động vận động của tiến bộ, chuyển động dao động (hiện tượng của swing) và cố định.

Được chấp nhận cung cấp cho năm loại kết luận FCT.

• Xuất sắc (định mức liên quan): trong năm lĩnh vực xem lên đến 15-20 với tinh trùng hoạt động vận động tiến bộ và nhiều hơn nữa. Tinh trùng có hiện tượng dao động là ít hơn 25 %.
• Thỏa mãn: trong năm lĩnh vực nhìn lên 10 tinh trùng hoạt động vận động tiến bộ và ít 25 % tinh trùng với các hiện tượng của swing.
• Nghèo: ít hơn 5 tinh trùng ở năm lĩnh vực xem.
• Trừ: trường hợp không có tinh trùng.
• Nợ nghi ngờ: trong năm lĩnh vực xem nhiều 5 tinh trùng hoạt tính di động hơn và nhiều hơn nữa 25 % hiện tượng của swing.

Khi loại thứ năm của FCT thường quan sát không tương thích miễn dịch giữa vợ chồng, Do đó cần phải xác định ACAT. Để xác định ACAT tuyến cổ bí mật, plasma, tinh dịch hoặc huyết thanh và hiển thị chúng (ngưng kết hoặc cố định) Nó đòi hỏi việc bổ nhiệm các xét nghiệm miễn dịch định lượng.

Một PBC tiêu cực nghiên cứu bắt đầu với một định nghĩa về thâm nhập (thâm nhập) khả năng của tinh trùng qua thử nghiệm thâm nhập (Thứ Sáu) và nhạy cảm với tiết tinh trùng của ống cổ tử cung bằng cách sử dụng một số liên lạc kiểm tra tinh dịch và nhầy cổ tử cung (TKSTSS).

Penetracionnyj thử nghiệm (TP)

Chiều dài mao mạch mỏng 10 Xem đánh máy trong thời gian rụng trứng nhầy của ống cổ tử cung. Một kết thúc mở của các mao mạch đóng đất sét, và lần thứ hai được đặt trong một ống nghiệm với một xét nghiệm tinh dịch tươi (không 3 giờ sau khi xuất tinh). Với đất sét trong các mao mạch được gắn vào ống thẳng đứng. Các mẫu được ủ trong một nhiệt ở nhiệt độ 37 ° C. 1 không. Vào chất lượng của xuất tinh được đánh giá bởi độ sâu của sự thâm nhập của tinh trùng trong dịch nhầy của ống cổ tử cung. Có ba loại khí nhà kính.

• Quả quyết - Độ sâu của sự thâm nhập (khoảng cách lớn nhất trong cm, đi du lịch ở tinh trùng duy nhất nhất) ở trên 5 cm; số lượng tinh trùng ở các điểm thâm nhập tối đa hơn 5 trong tầm nhìn, và số lượng tinh trùng di chuyển được ở một phần ba phía trên của mao quản lớn hơn 50 %.
• Nợ nghi ngờ - Một chiều sâu của sự thâm nhập lên đến 5 Xem ít hơn số lượng tinh trùng 5, di động của họ trong ba trên của mao mạch đạt 50%.
• Trừ - Độ sâu của sự thâm nhập của tinh trùng đạt 1 cm.

Khả năng của tinh trùng xâm nhập Nó phụ thuộc vào giai đoạn của chu kỳ kinh nguyệt. Cô bắt đầu nổi lên từ ngày thứ 9 của chu kỳ kinh nguyệt,, từng bước kích hoạt, đạt tối đa của nó biểu hiện trong giai đoạn rụng trứng, tổ chức ở cấp này trong hai ngày, và sau đó giảm dần.

Tinh dịch thử nghiệm tiếp xúc và nhầy cổ tử cung (TKSTSS)

Trên slide được đặt một giọt nhỏ chất nhầy từ ống tử cung, lấy từ người phụ nữ khi rụng trứng, và một số giống thả kích thước của xuất tinh. Cả hai giọt được bao phủ bằng một kính che, mà hơi ép xuống cho, gia nhập vào một giọt. Thuốc được đặt trong môi trường ẩm (Petri món ăn với ẩm bông tăm bông) và ủ trong một nhiệt ở nhiệt độ 37 ° C. 1 không.

Dưới những điều kiện này, tinh trùng bình thường xâm nhập bí mật của ống cổ tử cung bình thường, như có thể được nhìn thấy dưới kính hiển vi phóng đại 200X tại một. Để giải thích cho phản ứng gần ranh giới giữa hai phương tiện truyền thông đếm số thâm nhập bí mật của tinh trùng ống cổ tử cung ở hai lĩnh vực lân cận của điểm.

Với TKSTSS xuất sắc trong hai lĩnh vực nhìn thấy nhiều hơn 25 tinh trùng di chuyển được tích cực trong các hiện tượng của swing ít 25 %. Nếu TKSTSS thỏa đáng trong hai lĩnh vực xem tiết lộ nhiều hơn 15 tinh trùng di chuyển được tích cực, TKSTSS trong thấp - ít hơn 15. Một TKSTSS thâm nhập vắng mặt tiêu cực, nếu có vấn đề - một hiện tượng của dao động vượt quá 25 %.

Trong thử nghiệm này, như trong PCT, hiện tượng của swing, quá 25 %, rất có thể, Nó chỉ ra sự hiện diện của ACAT và yêu cầu cử nghiệm miễn dịch định lượng.

Sử dụng tinh dịch và dịch tiết cổ tử cung người đàn ông vô sinh và phì nhiêu kênh với số lượng khác nhau để sử dụng TKSTSS xác định chồng vô sinh.

• Thí dụ 1. Taken một kênh bí mật của cổ tử cung ở phụ nữ cặp vợ chồng vô sinh và kiểm soát xuất tinh nam giới khỏe mạnh. Tuyệt vời TKSTSS chỉ ra một khả năng xâm nhập của tinh trùng yếu của chồng mình, và sự nhạy cảm của bài tiết bình thường của ống cổ tử cung.
• Thí dụ 2. Taken bí mật đầy đủ của kênh phụ nữ khỏe mạnh cổ tử cung và xuất tinh chồng cặp vợ chồng vô sinh của. Bad TKSTSS chỉ ra một sự thâm nhập của tinh trùng yếu.
• Thí dụ 3. Taken phụ nữ bí mật của các cặp vợ chồng vô sinh tuyến cổ và kiểm soát xuất tinh nam giới khỏe mạnh. Bad TKSTSS thấy mặc cảm bí mật kênh cổ tử cung, mà rõ ràng là không thâm nhập tinh trùng bình thường.

Xét nghiệm miễn dịch định lượng

Mikroagglyutinatsionny test Friberg

Mikroagglyutinatsionny test Friberg (TF) đủ nhạy cảm và có sẵn cho các phòng thí nghiệm chẩn đoán lâm sàng. Sử dụng TF có thể xác định sự hiện diện của ACAT và ngưng kết hiệu giá vật liệu khác nhau (xuất tinh plasma, chiết xuất chất nhầy của con kênh cổ tử cung và trong huyết thanh của cả hai vợ chồng).

Hoá chất:

1. Phosphate đệm mặn (FSB) 0,01 М pH 7,2-7,4.

2. Petrolatum.

Trang thiết bị: kính hiển vi, ống tiêm tuberculin, mikroagglyutinatsionnye pipetter 1 ml, công suất micropipette 0,1 ml.

Phương pháp. Huyết thanh xét nghiệm máu được bất hoạt bằng cách ủ trong lồng ấp tại 56 ° C. 30 m. Xuất tinh, thu được bằng cách thủ dâm, ngay lập tức pha loãng để các FSB, nồng độ của tinh trùng là 40 triệu. trong 1 ml.

Do vật liệu (xuất tinh plasma, trích xuất các bí mật của ống cổ tử cung hoặc huyết thanh) đang chuẩn bị một loạt các độ pha loãng 1:4 đến 1:128 sử dụng như một chất lỏng pha loãng FSB. Trong giếng với mikroagglyutinatsionnyh dầu paraffin planchettes ống tiêm tuberculin với một cây kim được giới thiệu (trong dầu vazelinovoe) Giọt nhỏ của mỗi độ pha loãng của các vật liệu kiểm tra. Sau mỗi mẫu được rửa bốn lần ống tiêm. Trong mỗi pha loãng sẽ được thêm vào 5 thả nhỏ hơn lần xuất tinh, và bởi 4 h ở nhiệt độ phòng phát hiện agglutinates. Chăn nuôi cuối, theo đó dưới kính hiển vi ở độ phóng đại 100X phát hiện 3 dính nhau được xem xét và nhiều hơn nữa, ngưng kết hiệu giá tương ứng ACAT.

Kiểm tra Spermoimmobilizuyuschy Izodzhima (SIT).

Hiệu giá huyết thanh ACAT vượn cáo mới, plasma hay tinh dịch Chiết bí mật kênh cổ tử cung là do số lượng tinh trùng di chuyển được trong sự hiện diện của kháng nguyên (tinh dịch).

Linh kiện.

1. Xuất tinh, được sản xuất và chuẩn bị tương tự, cho TF sử dụng FSB; nhu động quá 70 %.

2. Komplementsoderzhaschaya huyết thanh của lợn guinea.

3. Huyết thanh miễn dịch của con người (IChS), cho sự có mặt của bổ qua 1 h ủ cố định 90 % tinh dịch.

4. Huyết thanh người bình thường (NCHS), bất hoạt bằng cách nung nóng ở nhiệt độ 56 ° C. 30 m.

5. Kiểm tra huyết thanh bất hoạt, plasma và tinh dịch trích xuất ống cổ tử cung bí mật.

Phương pháp. Để đánh giá các hoạt động bổ sung immobilizing các ống 1 là giới thiệu 0,5 ml dung dịch natri clorid đẳng trương, để xác định những thay đổi về tính di động của tinh trùng mà không ASAT ống nghiệm thứ 2 - 0,5 ml NHS, kiểm soát cố định ống thứ ba - 0,5 ml ICHS và để xác định ACAT immobilizing các ống thứ 4 - 0,5 ml huyết thanh, hoặc plasma của xuất tinh, trích lục hoặc bài tiết tuyến cổ.

Sau đó, mỗi ống được giới thiệu bởi 0,1 ml bổ sung. Điều cuối cùng để tất cả các ống được thêm 0,05 ml huyền tinh trùng ở nồng độ 40 triệu. trong 1 ml. Ống chân máy được đặt trong một lồng ấp ở nhiệt độ 37 ° C 1 không. Các ống được lấy ra khỏi lò và cẩn thận lắc để phản ánh tinh trùng agglutinated định cư.

Để đánh giá kết quả dưới kính hiển vi phóng đại cao (400X) tính toán tỷ lệ phần trăm của lực tinh trùng trong một thả trong ống nghiệm, kết tủa trên một slide kính và được phủ bằng một nắp. Tương tự như vậy, nó đặt tỷ lệ phần trăm của lực tinh trùng trong các giọt nhỏ của ống nghiệm với NHS và ICHS. Kết quả của phản ứng vào tài khoản theo công thức

SIT = K / A

Trong đó K - số lượng tinh trùng di động hơn trong việc kiểm soát với ICHS và NHS;

Về - số hoạt lực tinh trùng trong ống nghiệm (kiểm tra huyết thanh, hoặc plasma của xuất tinh, hoặc các bí mật của ống cổ tử cung).

Với SIT trung bình<2 các thử nghiệm là âm tính (số lượng tế bào hoạt lực tinh trùng trong kiểm soát và trong ống nghiệm của xấp xỉ như nhau), Nếu chỉ số CTI>2 - Các thử nghiệm là dương tính, t. nó là. trong vật liệu (huyết thanh, plasma hay tinh dịch trích xuất ống cổ tử cung bí mật) được cố định ACAT.

• Thí dụ 1. Kiểm soát mặt đất để ICHS - 10 % hoạt lực tinh trùng. Việc kiểm soát thứ hai với NHS - 80% hoạt lực tinh trùng. Hai điều khiển với nhau - 90 % hoạt lực tinh trùng. Trong ống nghiệm - 80 % hoạt lực tinh trùng.

SIT = R / D = 90/80 = 1.1

Các thử nghiệm là âm tính, cố định ACAT vắng mặt.

• Thí dụ 2. Trong ống nghiệm - 40 % hoạt lực tinh trùng, Tuy nhiên, trong sự kiểm soát, trong ví dụ 1.

KN = 90/40 = 2.2

Các xét nghiệm dương. Có kháng thể cố định (ASAT), qua đó làm giảm đáng kể khả năng vận động của tinh trùng.