Дијагноза имунолошки узроковане неплодности

Током дуге брачног живота без употребе контрацепције, и у присуству микро-региону слузокоже у гениталном органа може дешавају се постепено уочити имунизације антигени сперматозоида. Физички преглед супружника, који се састоји у оскудној браку, не може утврдити узрок неплодности у 10-15 % случајеви. То је у овој групи неплодних брачних другова приликом подношења захтева посебне методе истраге тајне цервикалног канала, семен плазме и серума сперме антитела су често откривена (АСАТ), Користи квалитативне и квантитативне тестове имунолошког истраживања.

Посткоиталныи Тест (ФЦТ)

Посткоиталныи Тест (ФЦТ) То се односи на квалитативне имуноесеју. Негативан резултат теста указује на одсуство сперматозоида у цервикалног канала тајна, али не може да идентификује узрок њиховог одсуства.

Метод. По броју покретних сперматозоида у цервикалног канала тајна, добијен после коитус, утврди степен повреде њиховог продирања способности са неплодности или имунитет за њих слузи цервикалног канала.

Екипа ФЦТ је потребно извршити следеће услове: Студија би требало да буде спроведено у периоду овулације, који је открио цолпоцитологиц или други начин, након претходног апстиненцијалних супружника у року од 2-3 дана.

Методологији. Након уобичајеног коитуса за жену 30 Записник треба лежати на леђима, савијање колена. Испирање и чишћење забрањена, треба само уложак, која се уклања током заузимању за изучавање слузи цервикалног канала. После 2-4 сата, допустиво и после 6-10 сати (време, протекло пре студије, наведен у анализи) после однос грлића материце изложена помоћу огледала Цузцо и ендоцервикалне слуз усисавањем или туберкулин шприца (без игле), пипете са гуменим сијалицом, или полиетиленски катетер.

При прању инструмента не треба користити дезинфицијенаса, јер утиче на покретљивост сперматозоида. Једна кап резултујућег слузи цервикалног канала се преноси на загрејаном стаклену плочицу, Цоатед цоверслип, Регија подмазани са течног парафина да цури. Формулација одмах микроскопируиут (окулар 7Кс, 40Кс циљ), одређивање броја и покретљивости сперматозоида природу. Лек може бити детектован са активним сперматозоида прогресивном мотилитетом, осцилирајуће кретање (феномен свинг) и фиксне.

Прихваћено обезбеди пет врста закључци ФЦТ.

• Одличан (релевантне норме): у пет области видите до 15-20 са активним сперме прогресивном мобилност и више. Сперма са феноменом осцилација је мање од 25 %.
• Задовољавајући: у пет области видите до 10 активан сперма прогресивна покретљивост и мање 25 % сперма са феноменом свинг.
• Слабо: мање 5 сперматозоида у пет области поглед.
• Недостатак: Одсуство сперме.
• Неизвестан: у пет области видите више 5 активне покретан сперме и више 25 % феномен свинг.

Када је пета врста ФЦТ често посматра имуни неусклађености између супружника, неопходно за одређивање АЦАТ. Да би се идентификовали АЦАТ тајни ендоцервикалне, плазма, сперма или крвни серум и приказати их (аглутинација или имобилизоване) То захтева именовање квантитативних имуноесејима.

Негативна ПБЦ Студије почињу са дефиницијом продире (пенетрација) способност сперматозоида путем упечатљив тест (Пет) и подложност сперматозоида секреције цервикалног канала користећи тест контакт сперме и цервикалне слузи (ТКСТСС).

Пенетрационный тест (Д)

Танак Дужина капиларне 10 Сее куцао током овулације слузи цервикалног канала. Један отворени крај капиларе затвара глине, а други се ставља у епрувети са тест свежим ејакулату (максимум 3 сати након ејакулације). Са глине у капилару је везан у усправан епрувету. Узорак је инкубирана у термостат на температури 37 ° Ц. 1 не. На квалитет ејакулату је судити по дубини продирања сперме у слузи цервикалног канала. Постоје три врсте ГХГ.

• Потврдан - Дубина пенетрације (највећа дистанца у центиметрима, Путовао барем једном спермом) преко 5 видети; број сперме у тачке максималне пенетрације више 5 на видику, а број покретних сперматозоида у горњој трећини капиларе већа од 50 %.
• Неизвестан - Дубина продирања горе да 5 Погледајте мање сперматозоида 5, њихова мобилност у горњој трећини од капиларних достигне 50%.
• Недостатак - Дубина пенетрације сперматозоида достигне 1 видети.

Способност сперматозоида на пробијање То зависи од фазе менструалног циклуса. Она почиње да излази из 9. дана менструалног циклуса,, постепено активирање, достиже максималну израз у периоду овулације, одржана на овом нивоу за два дана, а онда постепено смањује.

Тест Контакт сперма и грлића материце слуз (ТКСТСС)

На слајду се стави мали пад слузи из цервикалног канала, узети од жена током овулације, и један број исте величине пада ејакулата. Оба капи су прекривене стаклом поклопца, која је благо притисне за, придружио се пада. Лек је постављен у влажну комору (Петри шоља са влажном комадићем вате) и инкубирана у термостат на температури 37 ° Ц. 1 не.

Под овим условима, нормални сперма продиру у тајну нормалне цервикалног канала, као што се може видети под микроскопом при увећању 200Кс. На рачун за реакцију у близини границе између два медија пребројава продире тајну цервикалног канала сперме у два суседна поља погледом.

Са одличним ТКСТСС у две области поглед открива више 25 активно покретан сперматозоид у феномену свинг мање 25 %. Ако задовољавајући ТКСТСС у две области поглед открива више 15 активно покретан сперма, ТКСТСС при слабом - мање од 15. Негативан одсутна пенетрација ТКСТСС, ако под знаком питања - феномен осцилација прелази 25 %.

У овом тесту, као у ПЦТ, феномен свинг, до 25 %, вероватно, То указује на присуство АЦАТ и захтева именовање квантитативних имуноесејима.

Користећи сјемена и грлића материце секрета канала неплодна и плодно мушкараца у различитим количинама да користе ТКСТСС идентификује неплодних мужа.

• Пример 1. Такен тајни канал грлића материце код жена неплодних парова и контрола ејакулације здравих мушкараца. Одлично ТКСТСС указује на слабу пенетрације способност сперме њеног мужа, и осетљивост нормалног лучења цервикалног канала.
• Пример 2. Такен пуна тајна цервикалног канала здраве жене и њен супруг ејакулат неплодних парова. Лоше ТКСТСС указује на слабу пенетрацију сперме.
• Пример 3. Такен тајне ендоцервикалне жене неплодне парове и контрола ејакулације здрави мушкарци. Лоше ТКСТСС указује инфериорности тајни канал грлића материце, који очигледно не продиру нормалан сперматозоиде.

Квантитативни имунолошки тестови

Микроагглиутинатсионни Тест Фриберг

Микроагглиутинатсионни Тест Фриберг (ТФ) довољно осетљив и доступан је за клиничке дијагностичке лабораторије. Користећи ТФ може одредити присуство АЦАТ и аглутинације титра у различитим материјалима (плазма ејакулат, екстракти слузи цервикалног канала и у серуму оба брачна друга).

Реагенси:

1. Фосфатни пуфер (ФСБ) 0,01 М пХ вредност 7,2-7,4.

2. Вазелиновое уље.

Опрема: микроскоп, туберкулинска шприц, микроагглиутинатсионние пипеттер 1 Јр, микропипета капацитет 0,1 Јр.

Метод. Тест крви серум се инактивира инкубацијом у инкубатору на 56 ° Ц. 30 м. Ејакулату, добијени мастурбације, одмах раствара, тако да је ФСБ, концентрација сперматозоида био 40 милион. у 1 Јр.

Због материјала (плазма ејакулат, екстракт тајну цервикалног канала или серуму) припрема низ разблажења 1:4 у 1:128 користећи као течност за растварање ФСБ. У бунара са парафинско уље микроагглиутинатсионних планцхеттес туберкулин шприца са се уводи игла (под вазелиновое нафте) Мали капи сваке разблаживања испитног материјала. Након сваке узорак је испране четири пута овај шприц. У сваком разблажења се додата у 5 пута мања пад ејакулата, и 4 х на собној температури детецтед агглутинатес. Последњи узгој, при чему под микроскопом у 100Кс увећању откривеног 3 аглутиниран разматра и више, аглутинације титар одговара ацат.

Спермоиммобилизуиусцхи Тест Изодзхима (СИТ).

Титар имобилисање АЦАТ серума, плазми или сперма екстракт тајну цервикалног канала одређује бројем покретних сперме у присуству антигена (сперма).

Компоненте.

1. Ејакулату, који је произведен и припремили слично, за ТФ користећи ФСБ; покретљивост прелази 70 %.

2. Комплементсодерзхасцхаиа серуму замораца.

3. Иммуне хуманог серума (ИЦхС), дајући у присуству комплемента путем 1 х инкубације имобилизација 90 % сперма.

4. Нормална хуманог серума (НЦХС), инактивиран загревањем на температури 56 ° Ц. 30 м.

5. Тест инактивисани серума, плазма и сперма екстракт тајни канал грлића материце.

Метод. За процену комплементарно активност имобилизацију 1. цев је уведена 0,5 мл изотоничног раствора натријум хлорида, да одреди промене у сперми покретљивости без АСАТ 2. епрувете - 0,5 мЛ НХС, Контрола имобилизација трећа цев - 0,5 мЛ ИЦХС и да се одреди АЦАТ имобилизацију 4. цев - 0,5 мл серума, или плазми ејакулату, екстракт или секреција ендоцервикалне.

Затим, сваки цев увео 0,1 мЛ допуна. Последња ствар у све епрувете се додаје 0,05 мл сперма суспензије у концентрацији 40 милион. у 1 Јр. Трипод цеви су постављене у инкубатор на температури 37 ° Ц 1 не. Цеви су уклоњени из рерне и пажљиво потресен да одражава стабилну агглутинатед сперму.

За процену резултата под великим увећањем микроскопом (400икс) израчунати проценат покретних сперме у капи тест епрувету, депонован на стаклену плочицу и покривени поклопцем. Исто тако, поставља проценат покретних сперме у капљица на епруветама са НХС и ИЦХС. Резултат реакције у обзир од стране формули

СИТ = К / А

где је К - број покретних сперматозоида у контроли са ИЦХС и НХС;

О - броја покретних сперматозоида у епрувети (Серум Тест, или плазми ејакулату, или тајна цервикалног канала).

Са просечном СИТ<2 тест је негативан (број покретних сперматозоида ћелија у контроли и у епрувете од приближно исти), Ако је индекс ЦТИ>2 - Тест је позитиван, Т. то је. у материјалу (серум, плазма или сперма извући тајну цервикалног канала) су имобилисани АЦАТ.

• Пример 1. Контрола земљу да ИЦХС - 10 % покретан сперма. Друга контрола са НХС - 80% покретан сперма. Два контроле заједно - 90 % покретан сперма. У тест епрувети - 80 % покретан сперма.

СИТ = Р / Д = 90/80 = 1.1

Тест је негативан, имобилисани АЦАТ одсутан.

• Пример 2. У тест епрувети - 40 % покретан сперма, Међутим, у контроли, у Примеру 1.

СИТ=90/40=2,2

Тест позитиван. Има имобилисано антитело (АСАТ), кроз које сперма покретљивост знатно смањен.