Metódy na detekciu Leishmania v škrabanie postihnutého tkaniva podľa izolácie čistej kultúry

Pri výseve škrabanie postihnutého tkaniva pacienta na konkrétne živného média Leishmania množia a môžu byť detekované pomocou mikroskopie.

Činidlo

Среда W.W.W. pre pestovanie Leishmania (14 g agaru, 6 g chloridu sodného, o 150 ml defibrinované králičie krvi, prevzatá priamo zo srdca pred prípravou média, 900 ml destilovanej vody). V destilovanej vode bol pridaný chlorid sodný a agar. Banka obsahujúca médium sa zahrieva až do úplného roztavenia agaru, a 20 až 30 min sterilizuje v parnom sterilizátore pri 147,1 kPa (15 na).

Ochladí sa na 56 ° C agar pridaný sterilný defibrinované králičie krv, mieša otáčaním banky a plní sa do sterilnej pipetou 4 ml skúmavky. Banka krvný agar počas dávkovania je vo vodnom kúpeli pri teplote 58 ° C. Skúmavky s tipy stredných.

Po stuhnutí agaru, sú umiestnené v inkubátore po dobu jedného dňa pri 37 ° C pre kontrolu sterility a príjem kvapalného kondenzátu. Ak sa vyrába nestačí, pred sejbou v sterilných fľaštičkách, môžete pridať o 1 Jeden ml týchto roztokov: 0,85 % chlorid sodný, 1 % peptón riešenie, Hanks riešenie, laktalbumínu hydrolyzát alebo iných živín média v izotonických koncentráciách.

Spôsoby detekcie Leishmania v stery z postihnutých tkanív izolácie čistej kultúry

Keď vyberiete kultúru starostlivo dodržiavať pravidlá sterility. Skúšobná plocha kože je utrieť s vatovým tampónom, navlhčený 70 % alkohol.

Po odparení alkoholu ostrý koniec sterilné očné skalpel incízie dĺžke tuberkulóznych 2-3 mm. Z dna rez sterilné Pasteurovej pipety do škrabanie tkanivo. Výsledný pokles serózna-krvavé tekutiny bola prenesená do skúmavky s prostredím. Manipulácia sa uskutočňuje niekoľkokrát, siatie na Materiál zakaždým, keď nový rúrka. Špunty do uší vložené do parafínu alebo dať ich gumové krytky a umiestnené v inkubátore pri 22-24 ° C.

Vyhodnotenie výsledkov

Plodiny sú skúmané pod mikroskopom na dennej báze na identifikáciu pôvodcu. Preskúmajte natívny lieky, pripravený podľa postupu opísaného v drvených kvapiek, šošovka 40×40. Výsledky sú považované za negatívne siatie, ak v 40 dni patogén nebol nájdený. Kultúry sú pretiahnuté Leishmania (10-12 Microns s kabelážou).

Aplikácia metódy kultúry, je najužitočnejšia, keď Tuberkuloidní formou leishmaniózy, diagnostika, že iné metódy môžu byť menej účinná.