Definirea caracteristicilor cantitative și calitative ale spermei

Determinarea motilitatea spermei

Determinarea motilitatea spermei este un parametru esenţial, de calitatea ejaculatului. Spermă, capabile de fertilizare, au mobilitate -comite mişcare rectilinie cu viteză 50 µm/s. Pot fi găsite în ejaculare spermatozoizi mobilitate-afectată-diskinospermiej sub formă de oscilant, dresaj si alte tipuri de trafic, că în mod normal nu.

Motilitatea spermei în produs nativ de ejaculare cu un câmp de vizibilitate limitată (Utilizaţi fereastra Fonio), folosind ocular şi lentile 7 x x 40, Atunci când poluopuŝennom cu condensator. De numărare 100 celulă, Notaţi numărul de printre ei de bunuri mobile, sperma sedentare si stationare. OK se deplasează activ sperma alcătuiesc 80-90 %, sedentar este de 10-12, încă — 6 — 10 %. Doar ia în considerare acele sperma se deplasează activ şi sedentar, Cine comite translaţionale mişcare.

Puteţi utiliza mai detaliate punct de rating scară evaluare:

• «4» este o mobilitate excelentă (toate spermatozoa au o mobilitate drept înainte cu viteza semnificative);
• «3» este o bună mobilitate (mai multe redus);
• "2" este o mobilitate Mijlociu (încă o mulţime de spermă, dar cu cozi vibratoare);
• "1"-rea mobilitate (lipsa de impuls, mobilitatea spermei cozi numai);
• "0" este o mişcare de sperma este lipsă.

Fertilitate a ejaculat depinde de durata motilitatea spermei, Este deci necesar să se determine motilitatea spermei în dinamica (dinamic kinezisgramma).

Meniurile ejaculare pune pe un portobiect, Flip-l şi pune pe un tobogan cu lunočkoj pentru agăţat picături aşa, Această scădere a fost în centrul de o aprofundare. Marginea capac sticla uns cu Parafină lichidă şi sub microscop determina procentul de se deplasează activ, spermatozoa sedentare si stationare, prin 1, 3, 6, 12 și 24 ore după ejaculare. Cercetarea este efectuată la temperatura camerei. În mod normal, numarul de spermatozoizi motili activ scade fiecare 2-3 h 20 % ,

• Notă. Examinarea microscopică a ejaculat ar trebui să fie efectuate într-un laborator de o singură persoană, Cine a avut o experienţă suficientă în domeniul de diagnosticare laborator, ca rezultat al motilitatea spermei de diferite cercetatorii variază de la ± 40 % şi în mare măsură depinde de experienta cu èâkulâtom.

Pe "revitalizare" proba de sperma

Pe "revitalizare" proba de sperma bazat pe recuperarea mobilităţii încă, dar sperma direct folosind soluţii de stimulare:

1) soluţie Becker (glucoza- 3 g, Pe₂HPO₄ - 0,6 g, NaCl- 0,2 g, KH₂DUPĂ₄ -0.01 g, apă distilată pentru a 100 ml; PH- 7,8);

2) 0,1 % soluţie de cafeină (nu numai în sigilate!) - 10 % volumului de ejaculare;

3) 0,1 Soluție de M de arginina.

Metodă. Măsurarea capacităţii pipete 1 ml nasasyvaût 0,1 ml de ejaculare (bun amestecat) şi acest acelaşi pipeta câştigă 0,9 ml de soluție de catalizator. Conţinutul de pipeta sfat împinge oră de sticlă, bun mix de fluide în mod repetat de suflare si aspirare la hour glass, şi apoi bucătar medicamente agăţat picături. Prin 5- 10 minele încă, dar spermatozoizi vii începe să se mişte.

Procentul de sperma motile definesc imediat la restabilirea mobilităţii şi mai târziu 3, 6, 12 și 24 h . Pentru rezultate mai precise, efectuează un proces paralel cu doua solutii de stimulare. Numai când incapacitatea de a "resuscita" sperma imobil poate vorbi despre nekrospermii.

Identificarea de spermatozoa vii printre fixe

Principiul metodei se bazează pe, Ce enzime din ficat spermatozoa Blanch eozina. Ca reactivii utilizați 5 % eozina soluție apoasă de potasiu şi 10 % soluție apoasă nigrozina.

Metodă. Diapozitiv pune o TAMPONARE mici de ejaculare, apoi pune de două ori scăderea 5 % potasiu soluţie eozina- and -drop 10 % soluţie nigrozina, care este, de asemenea, de două ori eozina picături de potasiu. Prima ejaculare este amestecat cu potasiu eozina, aşteptaţi câteva secunde, şi apoi amestecat cu paie nigrozina, din nou, aşteptaţi câteva secunde şi face subţire frotiuri periat semnificative de sticlă.

Folosind sistemul de microscop immersionnuû, frotiuri conta nu mai puţin 200 spermă, alocarea de viaţă (Incolor) şi de moarte (pictat cu eozina în roşu). Numărul de spermatozoa viu şi mort, exprimat în procente. În absența unor nigrozina o picătură de spermă amestecat cu paie 5 % eozina soluţie potasiu şi pregătirea frotiurilor subţire pentru microscopie. Nigrozin colorizes fundal numai de droguri, în cazul în care sperma sunt alocate mai multe contrastul. Normale de viaţă sperma alcătuiesc 80-90 % din numărul total de.

Spermei conta 1 ML şi pe tot parcursul volumului de ejaculare

Numărul de spermatozoa în 1 ML si de-a lungul ejaculare este calculată în contabilitate camera Gorâeva.

Numărul de sperma din ejaculat toate se determină prin înmulţirea cu numărul de spermatozoa în 1 numar de ml de ejaculare (în mililitri).

• Notă. Numărabile camera poate determina, de asemenea, numărul de spermatozoizi motili, Ce ejacula ar trebui să se diluează soluția caldă izotoniceski de sodiu hloridz şi numărul de spermatozoizi imobil, şi apoi le scade din numărul total de.

În mod normal, în 1 ml de ejaculare contine 60-120 de milioane. spermă, Când giperspermii este mai mult 120 milioane de euro., Atunci când oligospermia — de 30 la 60 milioane de euro., ce, obișnuit, face imposibila fertilizarea. Cu toate acestea, cazurile, Cand fertilizarea are loc şi în 1 ml ejaculat la 5 la 30 milion. spermă.

În orice caz, Atunci când identificarea Oligospermie necesită control 2-3 de numărare a numărului de spermatozoizi în intervale de timp de 3-4 saptamani pentru a stabili lor numărul maxim de. Acelaşi sex masculin spermei conta este supus fluctuaţiei fiziologice semnificative.

OK, de-a lungul ejaculat conţine mai multe 150 milion. spermă.

Spermatogrammy de numărare

Spermatogramma este procentajul de diferite forme morfologice de spermatozoa şi celule al spermatogenezei.

În biopsie, colorate cu hematoxilină sau Pappengejmu, contează cel puțin 200 spermă, numărul formelor normale şi patologice ale, precum şi celule al spermatogenezei este exprimat ca procent. Numărarea se face folosind sisteme de microscop imersiune şi maşini de numărare a leukogram cu cheie de schimbat numele.

Într-un ejaculat normal forme normale de sperma alcătuiesc 80-85 %, uneori 100 %, Acestea includ variante fiziologice, caracterizat prin sau neobişnuit provocarea, sau redus, cresterea capului sau.

Young, sau imature, forma de sperma sunt în jurul capului şi gâtului de restul de citoplasmă ("guler"), Exista relatii sexuale frecvente si nu sunt în măsură pentru a fertiliza.

Formularele vechi de sperma (giperhromiâ, ahromiâ, vakuolizaciâ cap) apar in ejaculat dupa abstinenta prelungita si nu este potrivit pentru fertilizare.

Forme patologice includ sperma cu deformari ale capului: megalospermatozoidy (gigantospermatozoidy), macro-, mikrospermatozoidy, Conic, cu două capete sperma cu un gât şi o coadă, gât cu una sau mai multe cozi, fără o coada, cu o coadă fără cap etc.

La bărbaţi sănătoşi în normale ejaculare sperma do nu de obicei, forma patologica întâlni, dar uneori pot ajunge la numărul lor în timpul normal capacitatea de fertilizare a ejaculat 20 %, dintre acestea, aproximativ 15 % este patologia de cap, 3-5 % -organismul, 2-5 % -coada.

Spermatogenezei patologice, forma secretoare de infertilitate sperma sunt identificate cu patologia capului şi gâtului. Patologia cozii de obicei, èkskretornogo de origine, are loc atunci cand sperma trece pe căi semâvynosâŝim.

În preparate colorate, de asemenea, vizibilă în mod clar separat situat germinativnye celulele la diferite etape de diferenţiere şi maturării, care este esenţială pentru diferenţierea şi scăzut spermei conta şi azoospermia azoospermia.

Spermatogonii au o rundă, Uneori o forma ovala, diametrul lor este de 5-12 µm. Nucleul durează aproximativ o treime din celulele, închis- sau svetlookrašennoe, cu 1-2-3 Nucleo- Lamy, adesea situate lângă kariolemmy (plic nuclear), structura cromatinei fin. Citoplasma este îngustă, bazofile, Omogen. Spermatogonii cota de mitotičeski mai multe ori. Găseşte celulele cu etape bine definite a mitozei.

O parte din celulele, format ca urmare a mitozei, diferenţiate în spermatotsity (I), şi apoi comanda (II). Spermatotsity comanda -celule rotunde sau poligonale, cu diametrul de 17-19 microni cu un nucleu rotund mare şi o lumină citoplasma cu granulatie fina. În preparate colorate vizibile clar zona de perinuklearnaâ.

Ordinul Spermatotsity al II-lea format ca urmare a meiozei. Acestea sunt mai puţin, decât spermatotsity comanda (diametru 15 m), dar aproape identic morfologie. Sunt frecvente la ejaculare, decât spermatotsity comanda, dar mult mai puţin, decât spermatidy.

Spermatydы -mici, celule rotunde sau alungite forma cu un diametru de 12-15 microni cu runda giperhromnymi nuclee, Situat central sau diagonalele. Este posibil sa aiba multi core spermatids. Citoplasma Pale, bazafil′naâ, de multe ori vacuolată.

Transforma spermatidy in sperma.

Celulele a spermatogenezei în mod normal spermatogramme sunt nu mai mult 2 %. Un mare număr dintre ele atunci când infertilitate naturii secretorie a.

Pentru microscopie cu contrast de fază exclama este diluată cu soluţie de clorură de sodiu izotonică cu adaos de o cantitate mică de 1 % soluţie apoasă de rivanola sau carbonici acid pentru a reduce motilitatea spermei.

În microscopie de fluorescenta diapozitivul se pune o picătură de ejaculare şi o picătură de akridinovogo portocaliu în reproducere 1:20000. Picături sunt amestecate şi sunt acoperite cu capac sticla. Pentru microscopie folosit 7 x ocular şi obiectiv 40 x. Spermatozoizi vii colorate verde, morţi — în portocaliu. Forma normală şi anormală spermei uşor de deosebit datorită caracteristicilor lor morfologice.

Normele de muncă pe contrast de fază şi fluorescenţa Microscoape sunt descrise în instrucţiunile pentru aceste dispozitive. Când folosind spermatogramma de microscopie cu contrast de fază şi fluorescenţa este calculată în conformitate cu regulile generale.

Bazată pe examinarea microscopică a ejaculat pot descoperi diferite condiţii patologice.

• Aspermia -lipsa spermatozoizilor in ejaculat si celule germinale imature.
• Azoospermia -lipsa de spermatozoa în prezenţa de celule germinale imature.
• Astenospermiâ -reducerea numărului de celule motrică şi o creştere a numărului de forme patologice cu normal numar total de spermatozoizi.
• Oligoastenspermia -reducerea numărului de spermatozoizi şi formele lor mobile şi creşterea numărului de forme patologice.
• Nekrospermiâ -rigiditate a toate sperma în produsul chiar şi după "revitalizare".
• Akinospermiâ -Starea de, care, spre deosebire de nekrospermii anterior imobil spermei după anima încep să se deplaseze activ.