Examinarea microscopică a lichidului cefalorahidian

Citoza definiţie

In lichidul cefalorahidian de oameni sănătoşi, contine o cantitate foarte mică de celule. Semnificaţia clinică au, în general, leucocitele (limfocite). Pentru a număra de leucocite nu a împiedicat eritrocite, distruge nu dizolvat prin adăugarea de lichidul cefalorahidian 1/10 o parte din acidul acetic cu fuksinom. Fucsină pata âdrosoderžaŝie celule în roşu. Pentru colorarea leucocitelor folosind reactiv Samson (amestecat 30 ml glacial acetic acid, 2 ml lichide fenol, 2 ml alcool soluţie fucsină 1 : 10 şi se adaugă 100 ml apă distilată). Reactiv este stabil, bun culorile celulele şi în câteva ore îi ţine la citoliză.

Soluție aplicată, cuprinzând 5 ml 10 % acetic acid şi 0,1 g metilvioleta. Este mai puţin rezistent, celule de culoare albastru.

Ca urmare a proprietăţilor cytolytic lichidului cefalorahidian, numărul de celule imediat după preluarea acesteia de. Măsură de lichid în tub picături sau micropipetă în proporţie 10 părţi de lichid cefalorahidian şi 1 parte a colorat soluţie şi se lasă timp de 10-25 m pentru celula de pictura. Pentru reproducere, puteti folosi mixerul pentru leucocite. Lichid cefalorahidian celule foarte repede lipi de peretii tuburilor, Prin urmare, lichid, Situat în vitro, înainte de examinarea este necesar să se amestecă bine mişcările de rotație între palme.

Pentru a calcula citoza utilizate camera Fuchs-Rosenthal. Calcul a produselor pe parcursul grila prin 5 minute după umplere camerelor. Numărul de celule în 1 l este determinată prin formula

X =((A) * 11)/(3.2*10)

unde X este numărul de celule în 1 L; A este numărul de celule, privit pe suprafaţa ochiului de plasă; 3,2 este volumul camerei; 11/10 -gradul de diluare.

Prepararea contează a permis ca o fracţiune, de exemplu, 14/3, unde 14 este numărul de celule numărate în camera, 3 este o rotunjite dau volumul camerelor. Când un număr mare de celule este suficient să le privească în acelaşi jumătate din grila şi dublează numărul. Cu brusc exprimate pleocitoze (o creştere substanţială a numărului de celule) Este permisă pentru a număra celulele 16 pătrate mici şi multiplica numărul de rezultate pe 16.

În absența unui aparat de fotografiat-aveţi posibilitatea să utilizaţi Rosenthal Fuchs Contabilitate camera Gorâeva cu o capacitate semnificativ mai mici, astfel se numără celulele în cel puţin trei patrate, se calculează media aritmetică şi inmulteste la 1,2. Multiplicator 1,2 se obtine din formula

X =((A) * 11)/(0.9*10)

unde este camera capacitate 0,9, 11/10 -gradul de diluare.

Când celulele din lichidul cefalorahidian de numărare dizolvă una dintre primele picaturi, care decurg din AC, plasate în aparatul de fotografiat- şi defini numerele de mobil Rosenthal Fuchs, așa cum este menționat mai sus.

În mod normal, a numărului de celule (limfocite) în 1 MCL lichidului cefalorahidian la ventricule ale creierului şi a creierului mozžečkovo rezervor este 0-1, şi în lichid, obţinute de la o puncţie lombară-2-4.

Copiii sub vârsta de trei luni în 1 MCL cefalorahidian este găsit până la 20-23 celule, până la un an este de 14-15, până la doi ani, 11-14, două la cinci ani, 10-12, cinci-şapte ani-8-10, şapte-zece ani — 6-8, peste zece ani-4-5.

Atunci când meningita, abscesse şi creier tumori numărul de celule din lichidul cefalorahidian creşte.

În studiul hemoragic lichidul cefalorahidian cerebrală în unele cazuri este necesar să se stabilească ei adevărat citoz. Pentru acest scop utilizarea Friedman metoda: hemoragice câştig lichid cu reactiv Sampson pentru a determina citoza şi izotoniceski soluţie de clorură de sodiu pentru a contoriza numărul de celule roşii din sânge 1 MCL lichidului cefalorahidian.

De Exemplu, numărul de celule în 1 MCL este 20, numărul de celule roşii din sânge- 3600. Numărul de eritrocite si leucocite în sânge al pacientului vor învăţa din analiza generală, efectuate înainte de Puncţie lombară. De Exemplu, în 1 l sânge 4 200 000 eritrocite, 7000 leucocite. De aici trebuie să 4200000/7000 leucocite = 600 hematii.

Pentru a obține valori adevărat citoza alcătuiesc ecuaţia:

pe 600 Globulele rosii- 1 Leucocite;

pe 3600 de eritrocite, leucocite-X, Prin urmare,

X = 3600/600 = 6 leikocitov.

Citoz adevărat de lichid cefalorahidian 20-6 = 14 celulele din 1 L.

Aplicarea acestei metode este limitată, deoarece lichidul cefalorahidian cu adaos de sânge este potrivit pentru un astfel de studiu.

Determinarea numărului de celule roşii din sânge în lichidul cefalorahidian este setat pentru a stabili gravitatea stării pacientului cu krovoislianiah intracraniene.

În prezența 1 2000-5000 μl eritrocite cefalorahidian colorate în roz, 900-1000 de eritrocite este doar uşor opalesciruet. În lichide incolore pot fi detectate de un conținut mai mic de eritrocite. Semnificaţia clinică a hematiilor nivelurile de creştere în dinamică.

Diferenţierea celulelor lichidului cefalorahidian are loc în incinta numărare în formă nativ și colorat.

La mare mărire (ocular 10 x sau 15 x, obiectiv 40 x) Camera numărabile să acorde o atenţie la cantitatea de celule, formă, amplasarea şi dimensiunea de nucleele, prezenţa incluziunilor în citoplasmă. Cu uşurinţă diferenţierea limfocitelor, granulocitelor neutrofile, macrofage. OK în lichidul cefalorahidian cuprinse numai limfocitele.

Pentru specificaţiile complete compoziţiei celulare a lichidului cefalorahidian este investigat preparate colorate. Fluid celule pictat mai rău, decât celule sanguine. Există mai multe modalităţi de colorat: de magdalena, Voznoj, Papanicolaou, Alexeev, Mai-Grunwald, Pappengejmu.

Definirea pleocitoza metode de microscopie luminescente

Să răsfoiesc diapozitiv pune o TAMPONARE a lichidului cefalorahidian si amestecati-o cu colorant flûorohromov (amestec de sare de apă soluţii akridinovogo Orange şi rodamină în reproducere 1:20000). Fierte droguri examinate sub microscop fluorescente ML-2 în razele albastru-violet din spectrul vizibil, folosind o combinaţie de excitaţie filtre: FS 1-4, SSE 14-4, B 8-2 si blocare filtru JS-1 cu obiectiv immersionnym. Ca neflûoresciruûŝego uleiuri de imersiune pentru cercetare utilizate dimetil ftalat (ester de acid dimetil ortoftalevoj).

Pe un fundal întunecat câmp de vedere polinukleary si Limfocitele sunt uşor de identificat de strălucire verde de citoplasmă. Numărul de rând 100 celulă, având în vedere numărul de limfocite şi granulocite neutrofile.

Limfocitele Granulocite neutrofile sunt diferite de kernel-ului în natură (structura glybčatoj cu accente portocalii) şi fluorescență verde luminos.

Granulocitelor neutrofile au o structură clară, cromatinei miezuri lor luminat difuz, uniforma luminoase- Verde. Citoplasma galben- Verde, împrăştiate granule de caramida-rosu.

În caz de uşoară citoza nativ spinnomozgovu lichid şi nămol centrifugă.

Luminescenţa-microscopic examinarea lichidului cefalorahidian este uşor de a face o concluzie despre nejtrofil′nom, Pleocitoza limfocitară sau polymorphically celular natura.

Caracteristici morfologice ale celulelor lichidului cefalorahidian

Limfocitele

În lichidul cefalorahidian de oameni sănătoşi găsite limfocite mici şi mijlocii (1-2 în 1 L) dimensiune 4-6 µm. Aceasta este o celule în formă rotundă cu un nucleu de mare glybčatym şi o foarte înguste citoplasmă.

La limfoidnom pleocitoze (meningita tuberculoasa, cisticercoza) împreună cu întreprinderile mici şi mijlocii apar limfocite mari (8-9 M), Uneori puteţi găsi limfocitelor cu nuclee despărţitoare directe.

Numarul de limfocite (împreună cu alte celule) creşte în lichidul cefalorahidian în tumorile cerebrale, cronică curs de meningită. În boli neurochirurgicale creşterea numărului de limfocite în perioada îngrijirilor apare în urma creşterii numărului de granulocite neutrofile şi indică un rezultat favorabil.

Celulele plasmatice

Celulele plasmatice în lichidul cefalorahidian poate fi detectat doar atunci când procesele inflamatorii în curs de desfăşurare pe termen lung în ţesutul cerebral şi creier carcase. Plasmatice de celule morfologie este aceeaşi, ca şi în sânge sau punctate de măduvă osoasă.

Acest celule rotunjite cu èkscentričeski situat nucleul şi intens colorate, Citoplasma basophilic. În unele cazuri, numarul lor poate atinge 26%. Celulele plasmatice se găsesc, de asemenea, în perioada postoperatorie şi atunci când curentul lent proceselor reparatorii de leziuni cerebrale.

Gistiocitы

Normale de lichid cefalorahidian sunt uneori Detectat ca singur copii.

În preparate colorate histiocytes au o mare nucleu si citoplasma relativ înguste. Cantitatea de celule din 7 la 10 m, forma rotunde sau neregulate. Nucleu bobovidnoj sau formă neregulată lobi, normohromnoe. Nucleolus vizibile în produse naturale cu microscopie fazovokontrastnoj.

Când meningita tuberculozei în lichidul cefalorahidian detectat un număr mare de histiocytes, Situat separat şi acumularea, citoplasma lor Basophilic, pictat mai intens.

Conform datelor disponibile, unele tipuri de celule poate deveni nejroglii histiocytes. Un număr mare de histiocytes în lichidul cefalorahidian detectate la pacienţii, curs de chirurgie pe creier sau măduva spinării (care indică o reacţie activ ţesut şi vindecarea rănilor normale), și la persoanele, suferă de meningită şi cisticerkozom la languros în timpul procesului inflamator. Când tumorile cerebrale cu germinarea in spatiul podpautinnoe sau ventriculare de perete în histiocytes pot să apară în lichidul cefalorahidian în legătură cu macrofage şi celule modificate, Ceea ce este caracteristic pentru apariţia din jurul tumorii reactivă zone.

Macrofage

Macrofagele sunt formate din unul- şi celulele endoteliului multi-core arahnoida mater şi monocite. Elemente ale endoteliului mater arahnoida este separată de sincitiâ şi devin celule rotunjite, nucleare amebovidnym mişcare şi penetrarea in lichidul cefalorahidian.

Macrofage activ absorbi si digera celulele şi alte elemente, care se încadrează în lichidul cefalorahidian în procesele patologice, contribuie la purificarea acestuia. Includerea în citoplasma macrofage uşor diferenţiate celule şi în preparate colorate.

Macrofage phagocytize eritrocite, granulocite neutrofile distruse sau nemodificat, picaturi de grasime, cristale gematoidina, etc. Adesea cytoplasm de macrofage sunt vacuole de diferite dimensiuni sau unul mare vacuole o, care ocupa aproape intreaga citoplasma, Acest nucleu este deplasată la periferie. În astfel de cazuri, celula are un fel de inel-cricoid macrofage.

În mod normal, macrofage în lichidul cefalorahidian sunt absente. Citoze normală la apariţia mărturiseşte hemoragie sau procesului inflamator în sistemul nervos central. Un număr mare de macrofage in lichidul cefalorahidian în perioada postoperatorie indică un activ de salvare (previziuni pozitive). Un număr mic de macrofage sau lipsa acestora atunci când şi-a exprimat pleocitoze-semn de prognostic nefavorabil.

Bile de granulare – celule ksantomnye

Bile de granulare (celule ksantomnye) Macrofagele sunt mari, cu mai multe incluziuni de picăturile de grăsime în citoplasmă.

Acest lucru este cel mai frecvent rotunjite celule, fuksinom vopsite in maro inchis. Când bilele de Sudan III şi mijlocii lichid cefalorahidian de prelucrare sunt vopsite în culoare roşu-portocaliu.

Detectat în lichidul cefalorahidian în caz de contact cu ei lichidul din chist de diferită etiologie, degradarea ţesutului cerebral (împreună cu picăturile de grăsime), uneori în perioada postoperatorie, în unele tumori cerebrale (kraniofaringiome, èpendimome, etc.). În cazul în care tumora este situat lângă ventricule ale creierului, bilele granulară cel mai adesea sunt detectate în lichidul cefalorahidian din ventriculi. Sursa de bilele granular sunt mikrogliocity, precum şi oligodendrocite, celulele de carcase exterioare din vase si arahnoida.

Granulocitelor neutrofile

Granulocite neutrofile în lichidul cefalorahidian similar cu granulopitami de sânge nejtrofil′nymi, citoplasma lor (în camera de contabilitate şi produsele nativ) multe ori întins sau are o proeminenţă (psevdopodii). Această diversitate de celule apare în primele 10-15 minute după confiscarea de lichid cefalorahidian şi indică nejtrofil′ny de conservare- MI granulozitami posibilitatea de a muta. Caracterizate de un nucleu segmentat, numărul de compartimente în care variază de la două până la cinci; granulocite neutrofile alternante sunt destul de rare.

Atunci când stocarea schimbarea granulocite neutrofile CSF înainte, decât alte celule. Nucleului granulocitelor neutrofilica Liza sau segmente pot fi deveni rotunjite, cu contururi clare, jumper unită fin; ei au devenit un fel de granule separat. Neitrofilny granulocite, din care este doar un segment al unui nucleu rotunjite, în aparenţă seamănă cu o normoblast. Acolo umflate granulocite neutrofile cu contururi de segmente, ocupând aproape intreaga citoplasma. În preparate colorate, este posibil să se observe toate etapele de despartire de granulocite neutrofile-la umflarea până la distrugerea completă a structurilor celulare, Când contururile citoplasma nu este vizibil, şi core segmente devin pustiu, constând din grilaj blând cromatinei. Dreptul de proprietate asupra celulelor de a nejtrofil′nym granulocitam poate fi instalat numai pe reacţie la peroxidaza: prezenţa galben-verzuie sau maro pelete spulberat citoplasmă.

Uneori în lichid cefalo-rahidian se găsesc cu granulocite neutrofile piknotičnym kernel-ului ca o formă neregulată bulgări de giperhromnyh.

Granulocite neutrofile apar in lichid cefalorahidian hemoragie in spatiu podpautinnoe, boli inflamatorii ale sistemului nervos, După operaţii neurochirurgicale. Prezenţa alveolitei granulocite cu impurităţile din sânge în lichidul cefalorahidian indică inflamaţie a meningelui.

Predominanta de granulocite neutrofilica nemodificat indică un proces inflamator acut.

Brusc apariţia nejtrofil′nogo pleocitoza Când abcesul se rupe sub învelişul de creier.

La abscesse, Situat adânc în ţesutul cerebral, observat frecvent în afara focusului, pronunţat pleocitoz, cu o preponderenţă a limfocitelor.

Atunci când pierderea de putere a procesului inflamator din lichidul cefalorahidian care apar degenerirovannye forme de granulocite neutrofile.

Prezenţa de granulocite neutrofile modificate şi nemodificat este caracteristic procesului inflamator în curs de desfăşurare. Trebuie luat în considerare, că granulocite neutrofile nemodificat apar în lichidul cefalorahidian cu sânge proaspăt impuritate, în astfel de cazuri, trebuie să definiţi o citoza corective.

Granulocitelor eozinofile

Granulocite eozinofilelor în lichid cefalorahidian specimene de nativ diferenţia cu alte celule prin prezenţa de o caracteristică speckles mare strălucitoare, umple citoplasmă. Celule cu două lame de bază sunt rare, mai des decât nu există forme mononucleare. În morfologia colorate model èozinofil′nyh granulozitov este la fel, ca şi în sânge. În lichidul cefalorahidian detectează cele mai multe ori distrus granulocite eozinofile.

Conţinutul de granulocite èozinofil′nyh în lichidul cefalorahidian în cisticerkoze variază de la 1 la 46%.

Apariţia de meningita ca complicaţii cisticerkoznogo arahnoidită însoţită de apariţia nejtrofil′nogo pleocitoza şi reducerea de èozinofil′nyh granulozitov. Pentru abscedirovaniâ èhinokokkovogo cu bule în creier este caracterizată prin prezenţa în sale granulocite neutrofile conţinutul şi èozinofil′nyh, care serveşte ca un semn auxiliare în diferenţiere-l de la de. Uneori, un număr mare de èozinofil′nyh granulozitov pot fi găsite în conţinutul de chisturi tumori ale creierului şi măduvei spinării (nevrinome, kraniofaringiome, èpendimome, Metastaza cancerului la creier). Exprimat printr-o creştere a numărului de èozinofil′nyh granulocite în lichidul cefalorahidian poate fi observată după ventriculare cisternoskopii.

După îndepărtarea de tumori cerebrale cu rana vindecare activ creşte numărul de èozinofil′nyh granulozitov, Ce poate fi privită ca o reacţie alergică locală la trauma si meningele degradare de inducţie de ţesut produse.

Celule modificate şi umbra celule

Datorită proprietăţilor citolitičeskim celulelor lichidului cefalorahidian, în ea o lungă perioadă de timp, Păstraţi numai contururile citoplasmă şi resturi de nuclee. Determinarea lor morfologice accesoriu nu este posibil. Cele mai multe ori, astfel de modificări sunt supuse granulocite neutrofile, Uneori este celulele din tumorile maligne. Cu uşurinţă supus zitolizu celulele si arahnoida èpendimy ventricule ale creierului.

Ţesut bazofile se găsesc în lichid cefalo-rahidian după intervenţii neurochirurgicale.

Celulelor de arahnoida mater în lichidul cefalorahidian

Celulelor de arahnoida mater (arahnoèndoteliâ) este un singur strat de celule epiteliale, ei pot diferenţia atât la calcularea citoza în aparat de fotografiat, și în colorate, realizate din nămolul de lichid cefalorahidian. Aceasta este o destul de mare de celule în formă neregulată sau rotunjite, cu relativ mici rotunde sau ovale nucleul, o situat central.

Nucleii sunt pictate gipohromno, citoplasma este palid- sau de culoare gri-albastru, Acesta are zigzaguri marginile si contine adesea incluziuni phagocytized particule (picăturile de grăsime, elementelor celulare, vacuole). Citoplasma celulelor de arahnoida mater este deseori distrusă, în astfel de cazuri, detectat caracteristice resturi de nucleu şi citoplasmă. Cromatinei de nucleele este melkopetlistuû sau granulată structura, uneori vizibil un nucleu albastru. Cantitatea de nuclee din 5 la 19 m.

Prezenţa celulelor singur în lichidul cefalorahidian încă arahnoida este un indiciu de patologie, deoarece aceste celule linie spaţiu podpautinnoe şi, sluŝivaâs′, intra in lichidul cefalorahidian. Creşterea numărului de celulelor de arahnoida este observat la arahnoidite, cisticerkoze creierului. În conţinutul arahnoidal′noj chisturi detectate separat situat celulelor de arahnoida şi simplasty lor sub formă de grupuri de nuclee de mărimi diferite şi intensitatea de colorat, Înconjurat de citoplasmă pal fără limite clare între celulele.

Celule plexului coroid

Plexului coroid ventriculare în lichidul cefalorahidian poate introduce poligonal, rotunjit, uneori mari cilindrice (15— 19 µm) celulă. Mic (4-5 m) Situat în centrul oraşului core sau èkscentričeski, hipercromatici, Eosinophilic citoplasmă, intens colorate. În citoplasma celulelor plexului coroid are o dimensiune de cereale, uneori în formă de glybok şi incluziuni, dimensiune 1-3 microni, rotunjite sau neregulate în formă, culoare verzui sau albastrui. Unele celule pot fi detectat vacuole sau capturat de eritrocite.

Celule plexului coroid, cel mai adesea găsit în lichidul din ventricule ale creierului.

Celulele Èpendimy de ventricule ale creierului în lichidul cefalorahidian

Celulele Èpendimy de ventricule ale creierului în lichidul cefalorahidian, obținut prin puncție lombară, uşor distruse în timpul de gătit şi pregătirea de pictura. Într-un frotiu colorat au fel de entităţile, constând dintr-o formă ovală miezuri cu structură moale. În citoplasma unor celule conservate înconjoară nucleul ca un franjuri înguste.

În lichidul din ventricule ale creierului sunt cele mai abundente èpendimy de celule cu structura conservate, morfologic se aseamănă cu celulelor de arahnoida mater, dar nucleul lor pop vopsit şi au o mai blând, distribuție omogenă a cromatinei. Oval celule adesea èpendimy polonezi a subliniat, citoplasma are o nuanta gri. Îndeplinească separat situat cuşti şi mari concentrări de, care nu poate fi determinată de limitele de celule individuale.