Metode de detectare a Leishmania în decopertarea a tesuturilor afectate de izolarea culturii pure
La semănat răzuire țesutul afectat de pacientului la un Leishmania mediu nutritiv specific înmulți și ele pot fi detectate prin microscopie.
Reactiv
Среда W.W.W. pentru cultivarea de Leishmania (14 g agar, 6 g clorură de sodiu, despre 150 ml de sânge de iepure defibrinat, luate direct din inima înainte de pregătirea mediu, 900 ml de apă distilată). In apă distilată se adaugă clorură de sodiu și agar. Balonul care conține mediul a fost încălzit până la topirea completă a agar, și 20-30 min sterilizat într-un sterilizator cu abur la 147,1 kPa (15 la).
Răcit la 56 ° C agar adăugat steril de sange de iepure defibrinat, agitat prin rotirea flaconului si se umple in pipete sterile 4 Tuburi ml. Balonul agar sânge în timpul necesar este o baie de apă la o temperatură 58 ° C. Tuburile cu sfaturi medii.
După solidificarea agarului, acestea sunt plasate într-un incubator timp de o zi la 37 ° C pentru controlul sterilității și primirea condensul lichid. În cazul în care sunt obținute nu este de ajuns, înainte de semănat în flacoane sterile, puteți adăuga despre 1 Un ml din următoarele soluții: 0,85 % clorura de sodiu, 1 % soluție peptonă, Soluție Hanks, hidrolizat lactalbumină sau alte suporturi nutrient în concentrații izotonice.
Metode de detectare Leishmania în pilitură de țesuturi afectate de izolarea culturii pure
Când selectați o cultura urmați cu atenție regulile de sterilitate. Zona de testare a pielii este șters cu un tampon de bumbac, umezită 70 % alcool.
După evaporarea alcoolului capătul ascuțit al unui steril oftalmic bisturiu incizia lungime tubercul de 2-3 mm. Din partea de jos a tăiat cu pipetă Pasteur sterilă do răzuire țesut. Scăderea rezultată de fluid seros-sângeroase fost transferat într-o eprubetă cu mediul. Manipularea se face de mai multe ori, Material de însămânțare de fiecare dată când un nou tub. Dopuri pentru urechi încorporate în parafină sau le-a pus capace de cauciuc și plasate într-un incubator la 22-24 ° C.
Evaluarea rezultatelor
Culturile sunt examinate la microscop zilnic pentru a identifica agentul cauzal. Explorați medicamente native, preparată prin metoda de picături pisate, obiectivul 40×40. Rezultatele sunt considerate însămânțării negativă, dacă în 40 zile patogen nu a fost găsit. Culturile sunt alungite Leishmania (10-12 Microni cu cabluri).
Aplicarea metodei de cultură este cel mai util atunci când tuberculoide formă de leishmaniasis, diagnosticare care alte metode ar putea fi mai puțin eficiente.
