Metode pentru detectarea Leishmania în frotiu de măduvă osoasă

Reactivii pentru detectarea Leishmania

• Alcool metilic, sau alcool etilic absolut, sau un amestec de Nikiforov (amestec de cantități egale de etanol și eter absolut).
• Фосфатный буфер pH 6,9-7,1, pentru prepararea cărora sunt amestecate 40 ml KH₂RO₄ (9,078 g substanță uscată KH₂RO₄ în 1 litru de soluție) și 60 ml Na₂PHO₄ (11,876 g substanță uscată 1 litru de soluție).
• Azureozin Romanovsky.

Metode de detectare a Leishmania în frotiu de măduvă osoasă

Din os punctiformă măduvă imediat după grija, nu pentru a zdrobi sau deforma celule,pregătirea frotiuri subtiri. Dacă punctiformă dens, face imprint. Când sânge semnificativă punctiformă de ea izolate pe sticla un pic bulgări albicioase de grăsime, în cazul în care sunt distinse, și a le pregăti frotiuri.

Frotiul preparat este uscat cu aer, apoi fixate, ca frotiurilor de sânge. Frotiuri fixe uscate pot fi stocate timp de câteva zile.

În frotiu turnat diluat în tampon de colorat Romanovsky (aproximativ 3-5 ml) și a plecat pentru 30 50 m. După colorare clătit cu apă distilată, uscate și examinate la microscop cu sistem de imersie.

Evaluarea rezultatelor de detectare a Leishmania in oase frotiu de măduvă

În mijlocul bolii Leishmania gasit de obicei in punctiformă maduva osoasa într-o cantitate semnificativă și, prin urmare, ele sunt ușor de găsit. Cu toate acestea, în stadiul incipient al bolii și la pacienții tratați pentru, pentru a identifica agentul cauzal, Este nevoie de o vedere lung de tot frotiu (nu mai puțin 40 m).

Leishmania găsit în macrofage sau extracelular ca celule rotunjite sau risovidnyh 3-5 microni în diametru. Citoplasma este de culoare gri-albastru, și nucleul - într-un roșu-purpuriu. In citoplasma, kinetoplasts situate - tijă în formă sau rotunjite educație, core intens colorate.

Pentru Leishmania uneori ia trombocite sau "cioburi" de celule (Komocki citoplazmy, conțin material nuclear), găsite în frotiuri de măduvă osoasă, microorganisme străine (de exemplu,, alge unicelulare), prins într-un frotiu timpul pictura. Frotiul colorat sunt mai greu, decât Leishmania (citoplasma albastru închis și nucleu de purpuriu strălucitor), kinetoplasts lipsă.