Studiul de coagulare a sângelui

Metode de investigare a sistemului de coagulare a sângelui includ următoarele grupe:

1. Indicativ (general), oferind o idee despre starea întregii cascadei de coagulare ca un întreg și etapele sale individuale (înregistrare se poate face vizual sau prin dispozitive individuale - koagulografa, thromboelastography și altele.);
2. deficit de diferențiere de factori individuali - testele de coagulare de corecție, Testele de amestecare studiu de plasma de sange plasma de sânge de pacienți cu deficit de notorietate cunoscut de anumiți factori;
3. cuantificarea componentelor individuale asupra activității lor funcționale (testele de coagulare, studii și alte substraturi cromogene) și (sau) asupra markerilor imunologici;
4. identificarea activare intravasculara de coagulare a sângelui și fibrinoliza asupra caracteristicilor funcționale sau markeri moleculari, cum ar activare - pentru a identifica factori de coagulare activat circulant, Produse degranularea trombocite, despicare dintre componentele coagulării sângelui sau a metaboliților acestora, apariția de noi să îi trimită antigenice factori și complexele lor activat, metabolizare marcată componente accelerate de coagulare a sângelui (reduce perioada lor de înjumătățire în circulație).

Astfel, în evaluarea stării de coagulare a sângelui sunt utilizate în mod corespunzător Metoda de coagulare (de laborator și instrumentale), formează baza procesului de diagnosticare, și imunologică, Radionuclid și alte tipuri de cercetare. In multe cazuri, componentele pot fi definite ca o activitate funcțională, și imunologic - conținutul antigenului relevant în sânge. Utilizarea concomitentă a acestor tehnici ne permite sa se diferentieze forme de patologie, legate de lipsa de sinteză a factorului de coagulare respectiv (în acest caz la fel ca acesta este coborât activitate funcțională, și cantitatea de antigen), și forme, în care molecula este sintetizat factor, dar este anormal și defect funcțional.

Pentru referă la numărul de primele forme de factorul relevant este adăugat semnul "-" (de exemplu,, VIII-, IX- și t. d.), iar al doilea - semnul "+" (de exemplu,, VIII +, IX +).

Dur (general) Testele de coagulare

Determinarea timpului de coagulare

Determinarea timpului de coagulare (O metodă preferată de Lee-White) - Folosit mult timp bystrovypolnimy (la noptiera) test elocvent, permite identificarea tulburărilor de sângerare semnificative, asociată cu un deficit de factori de coagulare (în afară de Factor VII) sau cu efectul anticoagulantelor și fibrinolitic. Acesta este utilizat ca un ghid pentru efectuarea testelor și controlul heparină, eliminarea heparină sulfat de protamină. Testul este relativ scăzut de sensibilitate, Cifrele lui sunt rupte doar la scădere marcată în factori de coagulare cu plasma (de mai jos 4-5 %), și, prin urmare, nepotrivit pentru depistarea unor forme ușoare de hemofilie A și B, precum și tulburări de sângerare atunci când angiohemophilia, Deficit de factor XI, prekalikreină, și de înaltă kininogen greutate moleculară. Din aceste motive, testul nu poate fi utilizat pentru pacienții preoperator: în test normal de performanță (5-10 Minute) este posibil să apară sângerare post-operatorie abundentă.

Plasma timp recalcifiere

Plasma timp recalcifiere - non-standardizate de testare sensibilitate scăzută, mai puțin fiabile pentru detectarea hipocoagulabilitati, decât tot timpul de coagulare a sângelui. Ea nu poate fi recomandat pentru diagnosticul de tulburări de hemostază.

Activată timp parțial de tromboplastină, plasma

Activată timp parțial de tromboplastină, plasma (APTT, testare caolin-kefalinovыy) - Metodă foarte sensibilă, dezvăluind procesul de coagulare a sângelui când executați mecanismul intern. Selectiv sensibil la deficitul de factori de coagulare cu plasma (din cauza lipsei de trombocite și a factorilor 3 Trombocite compensate administrat extern sau Kefalonia eritrofosfatidom).

Este utilizat pentru a monitoriza terapia cu heparină, examinare preoperatorie a pacienților, etc.. d. Valorile standard depinde de probele utilizate kefalina, în cele mai multe cazuri de până la 37 - 50 (optim - 37-45).

Plasmă timp caolin

Caolin în timpul plasma - testare, similară cu cele anterioare, dar fără adăugare de kefalina plasma (eritrofosfatida), prin care este sensibil nu numai la o deficiență de factori de coagulare cu plasma, dar, de asemenea, la lipsa de factorul plachetar 3 Trombocite. Evaluarea activității estimat al acestui factor poate fi realizată prin compararea timpului de plasmă de testat caolin cu conținut ridicat și scăzut de trombocite (normă - 57-70 cu).

Noi nu recomandăm utilizarea de componente fosfolipide, oferind în aPTT ori coagulare egal cu 55 S și ​​mai mult, deoarece aceasta reduce considerabil acuratețea și reproductibilitatea testelor, inclusiv determinarea cantitativă a factorului VIII și IX.

Plasma timp de silicon

Plasma timp de silicon - un timp recalcifiere plasma, rezultând într-o silikonirovaniya ac, microtuburi, pipetok, t. este. cu activare de contact minim. Testul este sensibil la starea de activare intravasculara hipercoagulabilitate a fazei de contact a start-up (Factorii XII și XI), Cu toate acestea, această încălcare este descoperit mai clar prin definirea în momentul de silicon de coagulare a sângelui integral (pe baza Lee-White sau tromboelastograficheskoy proces de înregistrare cuvă siliconată).

Valorile standard depind de studiul de silicon și hotărât sângele oameni sanatosi, pentru fiecare dintre ei separat probă. Atunci când alegeți silicon este cel mai bun, care se extinde la cel mai mare grad de timpul de coagulare (plasma).

Protrombină (tromboplastină) plasmă timp

Protrombină (tromboplastină) plasmă timp (Quick Time, Indicele de protrombină) caracterizează rata de coagulare a plasmei sanguine recalcified procesul de pornire a dispozitivului extern, t. este. adăugarea unui tromboplastină creier uman (sau iepure).

Tromboplastină activă standardizate pe probe mixte de normale (test) plasma. Activitatea tromboplastină mai frecvent utilizate cu 12-18 (în tehnica clasică cu Kvika- 12-13). Tromboplastina slab, cea mai mare metoda de eroare.

În plasmă normale de testare a timpului de protrombină ajută la identificarea deficitului izolat sau cumulat de complex de protrombină - VII, X, V și II, din care trei factori (VII, X și II) K-vitaminozavisimy și activitatea lor scade sub influența anticoagulantelor indirecte. În acest sens, testul de protrombină este fundamental în controlul cumarine dozare (neodikumarin, sau pelentan, sinkumar și colab.) și alte medicamente din această grupă (fenilin).

Timpului de protrombină este normal, cu un deficit de factori de mecanism intern de activare a protrombinază - factor XII, XI, IX, VIII (t. este. pentru toate tipurile de hemofilie și defect Hageman), precum deficiența prekalikreinei și înaltă kininogen greutate moleculară (VM kininogena)

În literatura diferitele denumire de rezultatele testelor de protrombină. Cel mai indicat să se precizeze timpul de protrombină de studiu si controlul de plasmă sanguină în câteva secunde (oferind informații și activitatea tromboplastina utilizate). Uneori am folosi raportul dintre aceste două valori, t. este. index (Plasma studiu PV, de la ,)/(Plasma de control MF, de la), (rata de 0,9-1,1).

O altă formă de evaluare a acestui indicator, care este cele mai utilizate în laboratoare, Indicele de protrombină este pentru a calcula procentul de întocmirea de feedback proporțiile aritmetice (normă - 90-110%), Cu toate acestea, acest calcul este greșit, deoarece între concentrația de factori de coagulare și timpul de coagulare nu are aritmetică, o dependență logaritmică. În afară de, încercare de protrombină este sensibil numai la o scădere a factorilor de coagulare mai jos 50 % dimensiunea lor normală. În virtutea acestui expedient pentru a utiliza determinarea indicelui de protrombină Procentul de curba de diluare (1:2, 1:4, 1:8 și t. d.) eșantion mixt de plasmă normală. O astfel de curbă este construit dată pentru thromboplastins activitate inițială diferite (de la 12 la 18 de la) și este determinată pe baza indicelui de protrombină la pacienții studiați. Avantajul acestei tehnici constă în aceea că, că rezultatele tuturor studiilor, inclusiv efectuat în dinamică pe diferite zile, nu corespunde diferitelor probe de plasmă sanguină normală aleatoare, și să medie aceiași parametri standard de, rezultând în metoda de eroare redus semnificativ. Indici, obținută prin proporții și diluarea curba de plasmă normală, nu corespund reciproc. Acest lucru ar trebui să fie luate în considerare atunci când monitorizează efectul anticoagulantelor indirecte, Pentru indicele de a refuza convențional 50 % aproximativ corespunde unei reduceri de diluția curba index la 25-30% • În această privință, analiza trebuie să specifice întotdeauna, Cum este raportul de protrombină, care sunt standardele de performanță pentru activitatea de tromboplastina.

Plasma timp de trombină

Plasma timp de trombină, t. este. timpul de coagulare al plasmei cu citrat prin adăugarea de o activitate standard a trombinei, Este un test major pentru evaluarea stadiului final al coagulării sângelui. Contabilitate pentru acest indicator este important pentru interpretarea corectă a tuturor celorlalte teste de coagulare, pentru încălcarea în etapa finală a coagulării sângelui trebuie să conducă în mod inevitabil la o prelungire a timpului de coagulare în toate metodele de mai sus.

In cele mai multe cazuri, în timpul testului, trombina folosit această concentrație de soluție de trombină, care, atunci când este amestecat cu un volum egal de plasmă sanguină pentru coagularea dă 12- 18 de la, dar recunoașterea disfibrinogenemy concentrații mai slabe utilizate și (conducând la o reducere de 30-35 cu).

Timp de trombină - Un indicator important de diagnostic, încălcarea sa observat ca congenitale, și atunci când dobândit comun (secundar) gipoprotrombinemii, în cele mai multe disfibrinogenemy, precum sub influența heparină, Fibrinoliza produs (PDF) și alți inhibitori de auto-asamblare și antitrombotice monomeri de fibrină. În virtutea acestui timp de trombină, în primul rând și din ce în ce tulburat DIC acută și subacută, care joacă un rol important în diagnosticul rapid al acestei patologii.

Încercare Autokoagulyatsionny

Încercare Autokoagulyatsionny (Permisiune) - O foarte sensibil în două etape, Acesta descrie procesul de coagulare a sângelui, atunci când a început mecanismul intern. Ca aPTT, test nu este sensibil la un deficit de factor VII, dar în același timp mărturia sa nu depinde de conținutul de fibrinogen (factorul I) în serul de testat, ce o deosebește de toate celelalte probe indică coagulare.

Un alt avantaj al ACT constă în, care a investigat sânge diluat, care crește în mod substanțial sensibilitatea testului la o deficiență de factori de coagulare și, În afară de, punerea în aplicare a ACP nu necesită utilizarea de caolin și kefalina, deoarece standardizarea activarea de contact de fosfolipide și a realizat propria sa hemolysate celule roșii din sânge investigate.

REZUMAT ACP este, prin aceea că 2 ml de soluție hipotonă (0,222 %) Se adaugă clorură de calciu 0,1 ml de test de sange.

In acest hemolysate-calciu amestec este format și protrombinază trombină, Activitatea este determinată prin adăugarea succesivă 0,2 ml din acest amestec la 0,2 plasma de testare ml (fiecare 2 min în timpul primul 10 m, și apoi - după fiecare 10 min pentru 1 h ).

Plasma este sursa de fibrinogen investigate, care a testat activitatea rezultând un amestec de trombină. Așa cum se arată de către numeroase studii, acesta poate fi înlocuit cu plasma sanguină oameni sanatosi sau soluție de fibrinogen. În acest caz, fluxul de sange a pacientului este redusă la 0.1-0,2 ml (Poate fi luată din deget!), ce transformă încercare autokoagulyatsionny în mikrokoagulyatsionny (MKT) și-l face foarte convenabil pentru uz pediatric, inclusiv studiul de hemostazei la nou-nascuti.

Activitatea de coagulare în actul și ILC crește inițial în oameni sanatosi, de obicei, atinge un maxim de 10 de minute, incubarea amestecului de sânge-calciu (CCF), Când substratul coagulare plasmatic apare la 10 ± 1. Apoi activitate de coagulare KKS începe să scadă, Se indicând faptul că inactivarea trombinei formate în cadrul ei. Cu hemofilie, acțiunea de heparină și alte activități de coagulare de coagulare a KKS drastic reduse, și maxime se mută din minutul 10 cu privire la o dată ulterioară. Când hipercoagulabilitate observat creștere mai devreme si mai semnificativă a activității trombinei în CSC.

Atunci când se efectuează un test in vitro (definition numai 10 minute de incubare, CCR) acesta poate fi folosit pentru a monitoriza terapia cu heparină. Avantajul acestei metode pentru a testa timpul tromboplastinei parțial activată este, că nivelat impactul diferențiat pe diferite cefaline timp heparina coagulare.

Bazat ACP (MKT) a dezvoltat o metodă simplă și precisă a diagnosticului diferențial hemophilias.

Cu referințele citate în conversie indicații tabele ACT (MKT) poate fi exprimată ca procent și grafic - autokoagulogrammy.

Pentru a estima numărul de parametri generali sunt utilizate pe scară largă coagularea sângelui și metode instrumentale de investigare, în principal folosind diferite koagulografov și thromboelastography.

Thromboelastography nu numai oferă o idee a parametrilor de timp ale sângelui sau plasmei de coagulare, dar, de asemenea cu privire la structura și proprietățile mecanice cheaguri format. În ultimii ani, hardware și metodele de înregistrare a introdus standardizare și fosfolipide de contact a coagulării activarea. Coagulare, de asemenea, fiind create pentru executarea în masă de teste comune de coagulare - aPTT, protrombină, trombina și alte echipamente de înregistrare automată a rezultatelor.

Metode de diferențiere a deficitului de diferite de factori de coagulare și determinarea cantitativă

Următorul tabel prezintă date, acest studiu experimental de coagulare a sângelui cu ajutorul a trei teste de bază permite deficitului distincție grup diferite plasmatice factori de coagulare. Așa, încetinirea numai în protrombină încercare de coagulare (Am tipul нарушения) când toate celelalte indicații de caracteristică normală a deficitul ereditar de factor VII sau să reducă nivelul acestui factor în stadii incipiente de dezvoltare a icter obstructiv sau în primele 1-2 zile de tratament cu anticoagulante de acțiune indirectă, În cazul în care suprimarea sintezei factorului VII este înainte în reducerea de dezvoltare a tuturor celorlalte factori de coagulare K-vitaminozavisimyh.

Încălcarea doar mecanismul intern de coagulare, t. este. activată timp de tromboplastină parțial și ACP (tipul II), există deficit de factor XII, XI, IX, VIII, Villeʙranda (nu în toate formele), prekalikreină și kininogen VM. Dintre aceste defecte de coagulare ereditare deficit de factor XII, prekalikreină și kininogen WM este extrem de rară și nu este însoțită de nici o sângerare, întrucât factor deficitul VIII (Hemofilie A), IX (Hemofilie B) și factorul von Willebrand este foarte frecvente (este mai mare decât 96 % toate hemoragice ereditare tulburări) și este însoțită de sângerări severe. Între ele, în primul rând și de a efectua diagnosticul diferențial în continuare.

Deficit de factor XI relativ rare (despre 0,5-1,0 % Toate hemophilias), Încasări cu o sangerare foarte ușoară (mai ales după leziuni și operațiuni) și ocupă o poziție intermediară între prima subgrupa de tulburari asimptomatice și hemofilie și boala von Willebrand.

Un alt tip de tulburări caracterizate prin alungirea ca timpul de tromboplastină parțial și țările ACP, și timpul de protrombină. Este caracteristic pentru deficit de factori V, X sau II, fie pentru o deficiență complex de K-factori vitaminozavisimyh (VII, X, IX, II), care se observă în icter obstructiv și alte forme de vitamina K-deficit, și atunci când primesc anticoagulante indirecte.

În cele din urmă, cum se poate vedea din acest tabel, posibilă încălcare a mărturiei celor trei teste (tip IV), care se observă în hipo ereditare și dobândite- și disfibrinogenemiyah (Nu toate), atunci când se iau anticoagulante de acțiune directă (geparina, geparinoidov, hirudină și colab.), tratamentul activatori fibrinoliză și droguri defibriniruyuschimi (streptokinază, urokinaza și colab.), apare în sânge și substanțe patologice de antitrombotice, conexiune prevenirea (asamblare) fibrina-monomerov - paraproteinov, kryohlobulynov, complexe imune, precum și coagularea sofisticat, cauzate de DIC. Astfel, timp de trombină este adesea perturbat într-o măsură mai mare, și un pic mai devreme, decât alte teste.

Atunci când se iau în considerare durata bolii și posibilitatea de origine sau secundare legături ereditare cu alte boli și medicamente sau alte efecte, prezența sau absența sângerării și tipul său nu poate identifica în mod corect geneza acestor tulburări profunde ale coagulării sângelui.

Tot Testele de diferențiere se bazează pe principiul de corecție, t. este. pentru determinarea, măsura în care a relevat o tulburare de sângerare sau eliminate, invers, Nu probe eliminate de plasmă sanguină sau produse din sânge obținute deficit artificial în mod clar cunoscute de factor de coagulare.

În acest scop, laboratoare specializate pentru a crea o colecție de faktorodefitsitnyh plasma de sânge, obtinerea-le de la pacienti cu un set cunoscut profundă (Mai puțin 1 %) deficit de fiecare factor și a le stoca în pachete mici (de 0,5 ml) Temperatura - 30 ° C. Dacă este necesar, aceste probe sunt dezghețate și utilizate în teste de diagnostic.

Plasma, fost dezghet sau rămân neutilizate accidental, re-congelare nu face obiectul. Testele de corecție nu ar trebui să fie utilizat cu inhibitor plasma imunitar al unui factor. Kituri de diagnostic de o serie de firme conține probe liofilizate de plasmă sanguină factori de coagulare deficitar identificate (plasma substrat). Cu toate acestea, multe tulburari de coagulare rar întâlnită în practica clinică, privind utilizarea componentelor sanguine preparate în mod artificial deficit normală a anumitor factori de coagulare, și plasma eterogene (pui, rață și altele.).

Următorul tabel furnizează informații cu privire la conținutul de factori de coagulare in componentelor sanguine, folosit pentru corectarea testelor de coagulare, în funcție de condițiile de depozitare a acestora. Folosind acest tabel, ușor de descifrat dovada oricare dintre cele trei teste de coagulare majore. Tehnicile de corectare de acest fel utilizate teste, standardizate de contact si activarea fosfolipide, t. este. caolin-kefalinovыe sau gemolizata primeneniem (în ACT).

Testele de amestecare plasma din sânge a pacienților cu plasma, a cunoscut cu siguranță deficit de factor

Se determină timpul de tromboplastină parțial activată în plasmă de test, Plasma normală (control) și plasma factor clar cunoscut deficit VIII (dintre pacienții cu hemofilie A), IX (de hemofilie B), XI și XII. Apoi, un amestec de probe de plasmă citrat investigate (7/10 volumul) și succesiv cu fiecare dintre plasme deficiente (3/10 volumul), deoarece deficit de factor VIII și IX (cele mai frecvente forme de patologie!).

La amestec s-a adăugat caolin și cefalina, și de 2 min supus unei recalcificare (la 37 ° C). La amestec, în cazul în care timpul de tromboplastină parțial activată nu este normalizat, Ea are același defect în coagularea.

Așa, dacă pacientul la examen timpul tromboplastinei parțial activată este normalizată prin adăugarea în plasma sanguină a pacienților cu deficit cunoscut cunoscut de factor VIII, dar corectate plasma sanguină a pacienților cu deficit de factor IX, are Hemofilie A.

In mod similar,, dar pe baza testului diferenția de protrombină complex de protrombină deficit (X, V, VII и II).

Testare generație de tromboplastină

Pentru diferențierea încălcări ale mecanismul intern de coagulare a sângelui este cel mai des folosit clasic testare generație de tromboplastină înlocuirea componentei plachetare, Prepararea care necesită investiții considerabile de timp și de sânge, Kefalonia dezavantajează generație de testare de tromboplastină sunt grosime de, necesitatea de a pregăti un număr mare de reactivi, timp semnificativ asupra punerii sale în aplicare.

Încercare de corecție, bazat pe baza autokoagulyatsionnogo testare.

Diagnostic rapid de probleme este destul de raspunsuri diferite de testare de corecție, pe baza a doua corectarea, aceleași componente ale normală pe bază de sânge de testare autokoagulyatsionnogo.

Acest test este foarte fiabil, viteza si usurinta de punere în aplicare și necesită puțin (nu mai 0,5 ml) cantitate de test de sange, acesta poate fi utilizat la copii și adolescenți.

Ea, ca în testul de generare a tromboplastinei, folosit pentru corectarea plasma adsorbit și serul vechi, care re-centrifugate inainte de studiu. În trei flacoane turnat 2 ml 0,222 % și doi dintre ei s-au adăugat soluție de clorură de calciu 0,1 ml adsorbite de plasmă normală (1-Am Flacon) și 0,1 ser normal vechi ml (2-Am Flacon). Celelalte trei tuburi de pipete 0,2 ml de plasmă citrată normale. Apoi în toate eprubetele cu soluție de clorură de calciu s-a adăugat 0,1 ml de sânge citrat testului.

Exact 4 min de incubare, amestecul de activitatea de coagulare a fost testat pe plasma normală.

Scăderea puternică în activitatea de coagulare numai în prima eprubeta (BaSO normală₄-plasma) Acesta indică un deficit de factor IX de pacient (Hemofilie B), Numai în al doilea tub (Serum de la vechi) - Deficitul de factor VIII (Hemofilie A); Dacă corecție are loc în ambele tuburi (la fel de puternic), atunci, evident, există o deficiență de factor XI sau XII (cm. Tabel. 14).

Acest test este foarte sensibil, ca studiul se desfasoara intr-un divorțat 20 în momentul în care compensarea factorului de sânge 3 Trombocite Hemolysate. Singura reactant folosită - soluția hipotonă de clorură de calciu, face proba publice.

La fel de simplu este metoda de probe de corecție, efectuate pe baza unui test de deficit de protrombină factor de diferențiere II, V и VII +, X (Tabel).

În scopul de a separa deficitului de factor VII și X, testele de coagulare suplimentare efectuate cu adăugarea a studiat plasma de sânge veninul de sarpe vipera soluție - medicamente lebetoks (ales astfel o concentrație de otravă, kefalina care în prezență de clorură de calciu provoacă coagulare de 20-25 cu; Toate ingredientele sunt luate într-o cantitate 0,1 ml și se amestecă) (Tabelul de mai jos).

Cu același scop preparatul este utilizat veninul de vipera Russell, locuință în India (pregătire stipven).

Diagnosticul diferential este completat, dacă este necesar, prin cuantificarea factorilor limitate sau inhibitori imune specifice, De ce sunt metode foarte sensibile, standardizate speciale. Aceste tehnici de construcție utilizate curbele de diluție de probe mixte de plasma normală de sânge cu deficit de factori de corecție, în plus față de testul. Aceste curbe definesc activitatea factorului de testare în plasma pacienților.

În special determinarea cantitativă importantă a VIII factorului de concentrare și IX, și prezența inhibitorilor la pacienții cu hemofilie A și B (mai ales inainte si in timpul interventiei chirurgicale de inlocuire si intensiva terapie), precum și amânată hemoragie postpartum abundentă, atunci când este necesar să se diferențieze DIC și o patologie rară - apariția factorului inhibitor imun VIII (mai mult mai puțin - Factor V).

Cu deficit de factor XIII profundă (o patologie ereditară foarte rare) toate testele de coagulare sunt normale, dar dizolva cheagurile de 5M și 7M uree.

El ajută să se diferențieze deficit diferite de factori de coagulare cont, de asemenea, în măsura și, în special, Termeni de teste lecturi normalizarea pacienților după administrarea intravenoasă de produse din sânge, t. este. Ajustat Trăi prin Metoda A. 3. Barkagan.

Aceasta tehnica este deosebit de eficient atunci când o diferență mare în speranța de viață factor diferențiabilă în circulație. Așa, jumătate complex de protrombină durata de viata variaza de la cateva ore (factorul VII) la câteva zile (factorul II). O poziție intermediară între ele ia X Factor (2-2.5 Zile) și V (12-18).

Prin urmare, după transfuzii masive de plasma jet index de protrombină crește cu deficit de factor VII este foarte scurt, deficit de factor V - ceva mai mult (de aproximativ 4-6 ori), un deficit de factor X și, în special, II pentru o perioadă mai lungă (în 1-2 zile). Este semnificativ în acest sens și efectul asupra indicelui de protrombină de droguri PPSB (concentrat de factor VII, IX, X și II). De asemenea, el normalizeaza scurt timp de protrombină, deficit VII factor, și mai durabil (multe ori!) deficit de factor X și II. Deoarece acest medicament nu este factorul V, Această deficiență nu este corectată le.

O diferență similară este descoperită în transfuzie și de substituție terapie de coagulare factorilor mecanism intern (XII, XI, IX și VIII), care a înregistrat un test de tromboplastină parțial activată.

De un interes deosebit este Nivelul difuzorului factor de corecție VIII și aPTT citiri atunci când terapia transfuzie de hemofilie A și boala von Willebrand. Prima dintre aceste condiții este detectată sângerare maximă imediat după transfuzie de îmbunătățire (spray, rapid!) Plasma Antihemophilic sau administrare crioprecipitat, urmată de o destul de rapidă (pentru 10-18 h) un declin constant în ei, întrucât FvW este observată o anumită activitate creștere de coagulare în câteva ore după transfuzie, și apoi declinul - mult mai lent, decât. În acest sens, în tratamentul bolii von Willebrand este rar folosit mai multe transfuzii de substituție, decât hemofilie A.

Un studiu al activității funcționale a factorilor de coagulare și componente ale kalikreină-kininei și sisteme de fibrinolitic utilizând o metodă denumită cromatografie

Metodele se bazează pe studiul activității enzimelor proteolitice și inhibitori acestora, implicat în coagularea sângelui, fibrinolizei și kinin formarea, în intensitate și rata de clivaj specific sensibile la aceste peptide enzime, care este eliberat în timpul degradării agent colorant (b-нитроанилин).

Gradul de colorare a amestecului reacția determinat prin spectrofotometrie de, iar intensitatea lor este evaluată pe activitatea enzimelor corespunzătoare (factor de coagulare, kallikreina, plasminei și altele.), și să împiedice procesul - activitatea de inhibitori ai enzimei.

Așa, de exemplu,, efect de heparină și antitrombina III pot fi evaluate prin scindarea substraturilor cromogenice slăbire factorul Xa sau trombină, și activitatea α₂-antiplasmină - pentru reducerea substratului corespunzător plasmină cromogen. Substraturi cromogene sau au o denumire numerică (de exemplu,, s-2222), sau se face referire la un hromozinami prefix prescurtată, denotă enzima, la care substratul sensibil (de exemplu,, Chromozym PL - субстрат плазмина, Chromozym TH - субстрат тромбина, Chromozym PK - prekalikreină substrat / kalikreinei, etc.. d.).

Substraturi cromogene extind capabilitățile studiului a sistemului hemostatic, dar nu este suficient disponibil pentru multe laboratoare. Unele studii, realizate cu ajutorul lor, Ei au avantaje față de testele de coagulare obișnuite și să le dea rezultatele care se potrivesc; În alte cazuri, utilizarea lor simplifică și accelerează de studiu, Se face mai precis; în al treilea rând - aceste tehnici au o semnificație independentă și nu poate fi înlocuit testele de coagulare (de exemplu,, prekalikreină definiție).

Determinarea imunologică a componentelor sistemului hemostatic

Determinarea imunologică a componentelor sistemului hemostatic este realizată prin metode:

• Immunoprecipitacii;
• Imunoelectroforeză;
• Radioimunologic iar celălalt cu antiserurile corespunzătoare

Acest conținut estimată a antigenului în plasma sanguină a unui factor de coagulare (sau a fragmentelor sale), Nu activitate funcțională, care poate fi redus dramatic cu antigen normală în plasmă. Această situație este tipică pentru toate cazurile, Când sintetizați în organism anormală (defect funcțional) Factori, păstrarea antigenitate sa, dar lipsit de capacitatea de a participa la hemostaza.

Acest lucru vă permite să se facă distincția între încetarea completă a sintezei de factori relevanți, precum și formarea unor forme anormale.

Cu toate acestea, mai multe componente ale sistemului hemostatic poate fi determinată numai imunologic.

Acest grup include astfel de studii importante, ca definirea următoarelor componente:

• b-тромбоглобулина;
• a2-макроглобулина;
• proteinele C și S;
• antigeni factor VIII:C și VIII:R_memorie;
• Fibrinoliza produs (PDF);
• neoantigenov kompleksov trombină - antitrombină III și plasmina - antiplasmina;
• un număr de alte teste.

Prin urmare, studiul imunologic completează în mod semnificativ evaluarea funcțională a diferitelor componente ale sistemului de hemostază.

Testele de diagnostic, bazat pe utilizarea de droguri ca reactivii din veninuri de șarpe

Ea a fost mult timp stabilit, că multe veninuri de șarpe conține enzime proteolitice extrem de activi, provocând coagularea sangelui si a impactului asupra diferitelor verigi ale cascadei de coagulare. Prin urmare, veninurile sarpe si izolate din coagulazo le-a folosit pe scară largă pentru detectarea tulburărilor hemostatice, Determinarea cantitativă a factorilor de coagulare, detectarea și cuantificarea complecșilor monomer de fibrină solubilă (RFMK) și un număr de alte studii.

Probele de venin de șarpe este adesea mult mai ușor și de a face mai rapid diagnosticul de tulburări de hemostază.

Tabelul prezintă datele privind mecanismul de acțiune al otrăvuri pe coagularea sângelui, și de a folosi capacitățile de diagnostic de fiecare dintre ele.

Aceste capabilități extinde și mai mult utilizarea simultană a mai multor otrăvuri și teste simple de coagulare comun. Așa, de exemplu,, utilizarea simultană a testelor de coagulare cu venin de viperă efa, și îl face ușor de a distinge între deficit de factor VII, H-V și II (în tabelul de mai jos), și cu o corecție suplimentară a plasmei normale filtrat (factor de putere V și II) -defitsit Factor X și V.

Determinarea anticoagulante fiziologice de bază

Cel mai important este determinarea activității principale anticoagulante fiziologice - antitrombina III, o scădere care poate fi determinată genetic (Trombofilie primară) sau secundar din cauza consumului intensiv (DIC, Tromboză masivă) sau metabolism accelerat (Tratamentul cu heparină, L-asparaginaza, contraceptive sintetice) și blocarea complexelor imune, paraproteinami, fibronectină, proteine ​​de fază acută.

În orice caz, reducere a activității de antitrombina III de mai jos de 60-65 % Aceasta susține coagulare intravasculară, Acesta este de a face un efect anticoagulant mai puțin pronunțat de heparină. Cu toate acestea, foarte des între nivelul de antitrombina III și scăderea sensibilității la heparina nu-conformare cu dreptul.

Acesta este, de obicei o slăbire a acțiunii anticoagulant al heparinei substanțial predominantă față de gradul de scădere a activității de antitrombina III. S-au dovedit, că deficitele în diverse forme de antitrombină III afinitate heparina său poate varia în diferite grade. În afară de, diferite fracțiuni de heparină, raportul dintre care în medicamente foarte schimbătoare, au, de asemenea, o afinitate diferită pentru antitrombina III. De aceea, practic, este important de a investiga atât activitatea reală a antitrombina III, și capacitatea sa de a transforma sub influența cu acțiune rapidă anticoagulant heparină.

Activitatea anticoagulantă a antitrombinei III

Activitatea anticoagulantă a antitrombinei III Acesta este determinat prin capacitatea de plasmă de testat (divorțat - Metoda sau Copley Winterstein denaturare termică defibrinat la 56 ° C - metode Loligera, Abildgaarda și colab.) inactiva pentru o anumită perioadă de intrare de la trombină afara. Activitatea trombinei reziduală într-o plasmă poate fi determinată pentru activitatea sa de coagulare (de fibrinogene, sulfat de bariu plasma adsorbit) sau prin scindarea unui substrat cromogen, sensibil la trombină sau factorul Xa (ca antitrombina III inactivează acest factor).

Heparina-kofaktornaya aktivnosti

Activitatea cofactor heparina cuprinse în antitrombinei III plasma perioadă mai lungă determinat printr-un test de toleranță a plasmei la heparină, care poate fi considerat drept indicator, deoarece oferă o dispersie foarte largă de valori normale și de a reproduce suficient.

Mult mai precisa teste PLAY izvodimy, care a investigat efectul diferitelor concentrații de heparina de trombină plasma studiu timp, conținând o cantitate mică de trombocite. Comparația se efectuează cu prelungirea timpului de trombină controlului plasma normală, la care se adaugă aceeași probe heparina.

Așa, Se adaugă-trombina heparina test pentru a studia plasma sanguină la cantitatea de heparină, care prelungesc timpul de trombină cu controlul 15 la 32-35 cu (concentrație scăzută) și până la 95 la 110 (concentrație mare de heparină). Din aceste date, indicele de activitate este calculat cu antitrombotice plasma (AAP) și plasma rezervă anticoagulant (CBA).

De asemenea, este utilizat pe scară largă tehnici similare pentru a estima gradul de inactivare a trombinei în testele de coagulare, și substraturile cromogene.

Detectarea imunologică a antigenului antitrombina III

Detectarea imunologică a antigenului antitrombina III Acesta vă permite să se diferențieze între diferitele tipuri de trombofilie:

• cu sinteza inadecvată a antitrombina III (niveluri reduse ale markerului antigenic redus în mod corespunzător activitatea);
• cu sinteza conservate de anormale și defecte funcțional formele sale (nivelul de marcator antigenice este mult mai mare, Activitatea decât).

Proteinele C si S, тромбомодулин и un₂-macroglobulina prin metode imunoenzimatice determinat.