Diagnosticul de infertilitate cauzate imunologic

În timpul o viață lungă căsătorit fără utilizarea contraceptivelor, și în prezența de micro-in membranele mucoase ale genital poate apărea treptat la fața locului antigene de imunizare de spermatozoizi. Examinarea fizică a soților, constând într-o căsătorie stearpă, nu se poate determina cauza de infertilitate în 10-15 % cazuri. Este în acest grup de soții infertile la aplicarea metodelor speciale de investigare secrete canal cervical, anticorpi plasmatice a materialului seminal și de sperma ser sunt adesea detectate (ASAT), Folosește teste calitative și cantitative de cercetare imunologice.

Încercare Postkoytalnыy (FCT)

Încercare Postkoytalnыy (FCT) Aceasta se referă la teste imunologice calitativă. Un rezultat negativ indică absența spermei în secret canal cervical, dar nu se poate identifica cauza absenței lor.

Metodă. După numărul de spermatozoizi motile în secret canal cervical, obținut după coitul, stabili gradul de încălcări ale capacității lor de penetrare cu infertilitate sau imunitate pentru a le mucus din canalul cervical.

FCT este necesar să se efectueze următoarele condiții: Studiul ar trebui să se desfășoare în perioada ovulației, care a relevat colpocytologic sau alte metode, după soții abstinenta anterioare în 2-3 zile.

Metodologia. Dupa contactul sexual obișnuit pentru o femeie 30 minute ar trebui să revină pe spate, îndoire genunchi. Dusurile și curățarea interzise, Trebuie doar șervețel sanitare, care este îndepărtată în timpul capturării pentru studiul de mucus din canalul cervical. După 2-4 ore, admis și după 6-10 ore (timp, scurs inainte de studiu, indicat în analiza) dupa actul sexual cervix expus folosind o oglindă Cuzco și mucus endocervical aspirat sau seringa tuberculina (fără ac), o pipetă cu un bec de cauciuc, sau cateter de polietilenă.

Atunci când spălarea instrumentul nu trebuie folosit dezinfectante, deoarece acestea afectează motilitatea spermatozoizilor. O picătură a mucusului care rezultă din canalul cervical este transferat într-o lamelă de sticlă încălzită, lamelă de acoperire acoperit, Teritoriu lubrifiat cu parafină lichidă la scurgeri. Formularea mikroskopiruyut imediat (ocular 7X, Obiectiv 40X), determinarea numărului și natura motilitatea spermatozoizilor. De droguri poate fi detectat cu sperma activ motilitate progresivă, Propunerea de oscilație (fenomenul de swing) și fixe.

Acceptat oferă cinci tipuri de concluzii FCT.

• Excelent (normele relevante): în cinci domenii de vedere până la 15-20, cu sperma activa mobilitate progresivă și mai. Spermatozoizii cu fenomenul de oscilație este mai mică de 25 %.
• Satisfăcător: în cinci domenii de vedere până 10 sperma activ mobilitatea progresiva si mai putin 25 % sperma cu fenomenul de swing.
• Sărac: Mai puțin 5 spermatozoizi în cinci domenii de vedere.
• Minus: lipsa de sperma.
• Îndoielnic: în cinci domenii de vedere mai multe 5 sperma activ-motile și mai 25 % fenomenul de swing.

Când cincilea tip de FCT de multe ori observat incompatibilitate imunitar între soți, Prin urmare, este necesar pentru a determina ACAT. Pentru a identifica ACAT endocervical secrete, plasma, sperma sau serul sanguin și a le afișa (aglutinare sau imobilizat) Este nevoie de numirea imunologice cantitative.

Un PBC negativ studii începe cu o definiție a penetrant (pătrundere) capacitatea spermatozoizilor prin testare penetrative (Vineri) și susceptibilitatea la secreția spermei din canalul cervical, folosind un contact de testare a spermei și mucusului cervical (TKSTSS).

Încercare Penetracionnyj (TP)

Lungimea subțire capilar 10 A se vedea tastat timpul ovulației mucus din canalul cervical. Un capăt deschis al capilarului se închide lut, iar a doua este plasată într-o eprubetă cu un ejaculat proaspăt de testare (nu mai 3 ore după ejaculare). Cu argilă în capilar este atașat la tubul vertical. Proba este incubată într-un termostat la o temperatură 37 ° C. 1 h . De calitatea ejaculatului este judecat de adâncimea de penetrare a spermei în mucus a canalului cervical. Există trei tipuri de GES.

• Afirmativ - Adâncimea de penetrare (cea mai mare distanță în centimetri, călătorit cel puțin singur spermatozoid) sus 5 cm; numărul de spermatozoizi în punctul de pătrundere maximă mai 5 în vedere, și numărul de spermatozoizi mobili în treimea superioară a capilarului este mai mare decât 50 %.
• Îndoielnic - O adâncime de penetrare până la 5 Vezi mai numărului de spermatozoizi 5, mobilitatea lor în treimea superioară a ajunge capilare 50%.
• Minus - Adâncimea de penetrare a ajunge sperma 1 cm.

Capacitatea de spermă la penetrare Depinde de faza a ciclului menstrual. Ea începe să iasă din ziua a 9-a ciclului menstrual,, activarea treptat, atinge expresia sa maximă în perioada de ovulație, a avut loc la acest nivel timp de două zile, și apoi scade treptat.

Material seminal de contact de testare și mucusului cervical (TKSTSS)

Pe diapozitiv este pus o mică picătură de mucus de la canalul cervical, luate de la femei in timpul ovulatiei, și un număr de aceeași cădere dimensiune ejaculatului. Ambele picături sunt acoperite cu un pahar de acoperire, care este ușor apăsat pentru, unită cu o picătură. Medicamentul este plasat într-o cameră umedă (Petri cu tampon de bumbac umezit) și incubate într-un termostat la o temperatură 37 ° C. 1 h .

În aceste condiții, sperma normala pătrunde secretul canalului cervical normală, după cum se poate observa la microscop la o mărire 200X. Pentru a ține cont de reacția lângă granița dintre două medii contorizează numărul de penetrare secretul sperma canal cervical în două domenii adiacente de vedere.

Cu TKSTSS excelent în două domenii de vedere relevă mai multe 25 sperma motile activ în fenomenul de swing mai puțin 25 %. Dacă TKSTSS satisfăcător în două domenii de vedere a relevat mai multe 15 sperma activ mobili, TKSTSS in low - mai putin de 15. Un negativ TKSTSS penetrare absent, dacă discutabil - un fenomen de oscilație mai mare 25 %.

In acest test, la fel ca în PCT, fenomenul de swing, depășind 25 %, probabil, Aceasta indică prezența ACAT și necesită numirea imunologice cantitative.

Folosind material seminal și secrețiile cervicale bărbați infertili canal și fertile din diverse sume de utilizarea TKSTSS identifica soțul infertile.

• Exemplu 1. Luate un canal secret al colului uterin la femei cuplurile infertile și de control ejaculare oameni sanatosi. Excelent TKSTSS indică o capacitate de penetrare slabă a spermei soțului ei, și susceptibilitatea de secreție normală a canalului cervical.
• Exemplu 2. Luate secrete completă a canalului cervical femeii sănătoase și soțul ei ejaculat de cuplurile infertile. Bad TKSTSS indică o penetrare slabă a spermei.
• Exemplu 3. Femei endocervicale cuplurile infertile secrete luate și de control ejaculare oameni sanatosi. Bad TKSTSS indică inferioritate secrete canal cervical, care, evident, nu pătrunde spermatozoizi normale.

Teste imunologice cantitative

Mikroagglyutinatsionny încercare Friberg

Mikroagglyutinatsionny încercare Friberg (TF) suficient de sensibile și este disponibil pentru laboratoarele de diagnostic clinic. Utilizarea TF poate determina prezența ACAT și aglutinare titru în diverse materiale (ejaculat plasma, extracte de mucus din canalul cervical și în serul ambilor soți).

Reactivi:

1. Tampon fosfat salin (FSB) 0,01 М pH 7,2-7,4.

2. Ulei Vazelinovoe.

Echipament: microscop, seringă tuberculina, mikroagglyutinatsionnye pipete 1 ml, Capacitate micropipetă 0,1 ml.

Metodă. Ser test de sânge este inactivat prin incubare într-un incubator la 56 ° C. 30 m. Ejaculat, obținut prin masturbare, imediat diluate astfel încât FSB, concentrația spermei a fost 40 milion. în 1 ml.

Din cauza materialului (ejaculat plasma, extrage secretul canalul cervical sau ser) se pregătește o serie de diluții 1:4 la 1:128 folosind ca lichid de diluție FSB. Din fântâni cu mikroagglyutinatsionnyh ulei de parafină planșete seringă tuberculina este introdus cu un ac (în ulei vazelinovoe) Picături mici de fiecare diluție a materialului de testat. După fiecare probă este spălat de patru ori Seringa. In fiecare diluție se adaugă la 5 picătură ori mai mic de ejaculare, și de 4 h la temperatura camerei detectată aglutineaza. Ultima reproducție, care sub un microscop la 100X mărire detectată 3 aglutinează în curs de revizuire și mai, aglutinare titru corespunde ACAT.

Încercare Spermoimmobilizuyuschy Izodzhima (SIT).

Titru seric ACAT imobilizare, plasmă sau material seminal extract canal cervical secretă este stabilit de numărul de spermatozoizi motile în prezența antigenelor (spermă).

Componente.

1. Ejaculat, care este produs și preparat în mod similar, pentru TF folosind FSB; motilitatea depăși 70 %.

2. Komplementsoderzhaschaya ser de cobai.

3. Ser uman imunitar (IChS), dând în prezența complementului prin 1 h de incubare imobilizare 90 % spermă.

4. Ser uman normal (NCHS), inactivată prin încălzire la o temperatură 56 ° C. 30 m.

5. Test de ser inactivat, plasmă și material seminal extrage canal cervical secrete.

Metodă. Pentru a evalua activitatea complementului imobilizarea primul tub este introdus 0,5 ml soluție izotonică de clorură de sodiu, pentru a determina schimbări în motilitatea spermatozoizilor fără ASAT eprubetei două - 0,5 ml NHS, Controlul imobilizare treilea tub - 0,5 ml de ICHS și pentru a determina ACAT imobilizarea patra tubul - 0,5 ml de ser, sau plasmă a ejaculatului, extract sau secreția endocervical.

Apoi, fiecare tub este introdus prin 0,1 ml complement. Se adaugă ultimul lucru la toate tuburile 0,05 ml suspensie sperma la o concentrație 40 milion. în 1 ml. Tuburi trepied au fost plasate într-un incubator la o temperatură 37 ° C 1 h . Tuburile sunt scoase din cuptor și cu grijă a agitat pentru a reflecta sperma constante aglutinante.

Pentru a evalua rezultatele sub microscop de mare mărire (400X) calculat procentul de spermatozoizi mobili într-o picătură de eprubetei, depus pe o lamelă de sticlă și acoperită cu un capac. De asemenea, se stabilește procentul de spermatozoizi motile în picăturile de tuburile de testare cu NHS si ICHS. Rezultatul reacției în considerare prin formula

SIT = K / A

unde K - numărul de spermatozoizi mobili la controlul cu ICHS și NHS;

Despre - numărul de spermatozoizi mobili într-o eprubetă (test de ser, sau plasmă a ejaculatului, sau secretul canalul cervical).

Cu SIT medie<2 testul este negativ (numărului de spermatozoizi mobili la controlul și în tuburile de testare de aproximativ aceeași), Dacă indicele CTI>2 - Testul este pozitiv, t. este. în materialul (ser, plasmă sau material seminal extrage canal cervical secrete) sunt imobilizate ACAT.

• Exemplu 1. Control de la sol să ICHS - 10 % sperma motile. Al doilea control cu ​​NHS - 80% sperma motile. Cele două comenzi împreună - 90 % sperma motile. In eprubeta - 80 % sperma motile.

SIT = R / D = 90/80 = 1.1

Testul este negativ, imobilizat absent ACAT.

• Exemplu 2. In eprubeta - 40 % sperma motile, Cu toate acestea, în controlul, în exemplul 1.

KN = 90/40 = 2.2

Testul pozitiv. Există anticorp imobilizat (ASAT), prin care motilității spermatozoizilor redus semnificativ.