Nasledstvennaya gemoliticheskaya niedokrwistość, w związku z działalnością kinazy pirogronianowej niedobór krwinek czerwonych

Nasledstvennaya gemoliticheskaya niedokrwistość, Podobne Niedobór kinazy pirogronianowej erytrocytów - stosunkowo rzadkie forma niedokrwistości hemolitycznej, która jest dziedziczona w sposób autosomalny recesywny, To daje objawy kliniczne w homozygot, Wpływy z objawami hemolizy wewnątrzkomórkowego, makrocytemię erytrocytów, niska zawartość potasu. Istnieje ponad 200 przypadki homozygotycznych nosicieli działalności deficyt piruvatkinaznoy.

Patogeneza

Kinaza pirogronianowa jest jednym z enzymów, zawieranie glikoliza. Ten link glikoliza i ATP utworzone nikotinamiddinukleotid. Większość pacjentów z niedoborem aktywności kinazy pirogronianowej zmniejsza się zawartości czerwonych ciałek krwi tych dwóch metabolitów, W niektórych przypadkach, zawartość ATP normal, ale zakłócony stabilności ATP podczas inkubacji. Normalne poziomy ATP znaleziono na znaczne retikulocytozą. Jest to spowodowane obecnością retikulocytów i możliwości mitochondrialnego ATP nie tylko przez glikolizę, ale również ze względu na fosforylacji oksydacyjnej.

Skutkiem niedoboru kinazy pirogronianowej Jest również gromadzenie produktów glikolizy, utworzone na poprzednich etapach - fosfofenolpiruvata, 3-fosfoglicerynian, a zwłaszcza 2,3-dwufosfoglicerol. Piruvatanlaktata zawartość zmniejsza się w krwinkach czerwonych.

Brakiem ATP czerwonych krwinek niedoboru kinazy pirogronianowej Prowadzi to do zakłóceń w funkcji pompy aznogo ATP czerwonych krwinek oraz do straty jonów potasowych, przy czym stężenie jonów sodu w erytrocytach nie wzrasta. Powoduje to spadek zawartości jednowartościowych jonów w erytrocytach, odwodnienia komórki i jej kurczenie. Zjawisko to nazywa się dessikotsitoz. Zmniejszenie liczby czerwonych krwinek wody komplikuje proces uwalniania tlenu utlenowania i przez hemoglobinę. W związku z tym pewną rolę odgrywa wyrównawczy znacznego gromadzenia się w erytrocytach 2,3-kwasu difosfoglitserinovoy.

Powinowactwo hemoglobiny do tlenu jest zmniejszona w wyniku interakcji z 2,3-dwufosfoglicerol. Stąd, przy wyższych stężeniach 2,3-dwufosfoglicerol powraca tlenu do tkanek jest ułatwione.

Objawy kliniczne aktywność niedobór kinazy pirogronianowej

Kliniczne objawy niedoboru kinazy pirogronianowej zależy od stopnia hemolizy. W niektórych przypadkach zwiększona hemolizy przejawia przy urodzeniu i towarzyszy występowanie znacznego kryzysu hemolitycznej, powodując konieczność transfuzji krwi, aby utrzymać stężenie hemoglobiny na poziomie sub-normal. W innych przypadkach choroba może wystąpić prawie bezobjawowe z pierwszych objawów zwiększonego hemolizy (subikterichnost twardówki i skóra) w wieku 17-30.

Ogólnie; porównaniu z microspherocytosis, niedobór kinazy pirogronianowej ma poważniejsze.

Prawie wszyscy pacjenci z wyczuwalnym śledziony. Nieznaczny wzrost ujawnionych niektórych anomalii jego nośniki heterozygotyczni, choć mają anemię, zwykle, brakujący. Liczba pacjentów możliwe powiększenie śledziony. Znaczący wzrost wątroby rzadko. W pojedynczych pacjentów z zidentyfikowane owrzodzenia podudzi.

Laboratoryjne wskaźniki aktywności niedobór kinazy pirogronianowej

Większość pacjentów z niedoborem aktywności kinazy pirogronianowej obserwowano umiarkowany niedokrwistość (4,34- 6,21 mmol / l, lub 70-100 g / l), Jednakże, w hemoglobinie kryzysów może być zmniejszona do 3,1 3,72 mmol / l (50-60 G / l). Eritrotsitov- zawartości 2,5-3,0 T 1 l. Hemolityczna kryzys może być spowodowana przez infekcję. Zdarzają się przypadki zysku hemolizy w czasie miesiączki.

Czerwone krwinki pacjentów z niedoborem kinazy pirogronianowej charakteryzuje makrocytemię z normohromiey, niewielkie anizocytoza i poikilocytoza. Nie było sprawiedliwe polychromatophilia. Czasami znaleźć mishenevidnye krwinek czerwonych i krwinek czerwonych z zapiekanka z brzegów lub w formie morwy, często utożsamiany zasadochłonne erytrocytów punktatsiya, Ciałka Jolly. Niektórzy pacjenci z krwi obwodowej wykazało znaczną liczbę erythrokaryocytes, w czasie kryzysu, może być zwiększona do 60-70 %. ESR, białe krwinek, leukogram, liczba płytek krwi w granicach normy. Podobnie jak w przypadku innych postaci niedokrwistości hemolitycznej, w szpiku kostnym wykazało ostre podrażnienie zarodek się krwinek czerwonych.

Poziom bilirubiny, zwykle, wzrosły ze względu na pośrednie.

Hemoglobiny w osoczu wolnego normalny, ale to może być zmniejszone poziomy haptoglobiny. Hemosiderin w moczu jest nieobecny. Zawartość hemoglobiny płodowej hemoglobiny A₂ w normie.

Oporności osmotycznej erytrocytów niedobór kinazy pirogronianowej w większości przypadków normalnych, czasem zmniejszona po dniach inkubacji. Autogemoliz, zwykle, zmodernizowane w różnym stopniu. Zdarzają się przypadki niedoboru kinazy pirogronianowej z normalną autogemolizom. W pierwszym zgłaszane przypadki niedoboru kinazy pirogronianowej została zarejestrowana typu II autogemoliza, koryguje dodanie ATP, nie korygując lub lekko korygowania dodanie glukozy. Następnie, w wielu przypadkach opisano z niedoborem enzymu typu I lub no autogemoliza. W związku z tym nie zaleca się stosować metody z autogemoliza w diagnostyce różnicowej niedokrwistości hemolitycznych. Żywotność czerwonych krwinek z niedoborem aktywności kinazy pirogronianowej zawsze skrócone.

Rodzaj aktywności kinazy pirogronianowej dziedziczenie autosomalny recesywny. Heterozygoty praktycznie zdrowych, Według różnych badaczy, Nasilenie deficytu wahały się od 50 do 70 % normy.

Działalność diagnostyczna niedobór kinazy pirogronianowej

Można się spodziewać, rozpoznanie niedoboru kinazy pirogronianowej czerwonych krwinkach do dostarczania w przypadku niedokrwistości hemolitycznej, przepływającym przez lata ze wzrostem śledziony, brak krwi obwodowej znaki microspherocytosis rozmazania, elliptotsitoza i stomatotsitoza.

Jakościowe badania dla oznaczania aktywności kinazy pirogronianowej. W tym celu powszechnie stosowane są metody barwienia fluorescencyjnego, oparte na, że w trakcie reakcji, kataliziruemoy piruvatkinazoy, nikotinamiddinukleotid utlenione i fluorescencja znika.

Aktywność kinazy pirogronianowej w przedziale od zdrowych osobników 4,0 do 7,7 mmol (min / 1010 erytrocytów) lub 4,0 do 7,7 Moc. Większość aktywności enzymu choroba homozygotycznej mniej 1 Moc. Jednak mogą być przypadki, niewielki spadek aktywności enzymu. Diagnoza rzadkiej postaci niedokrwistości hemolitycznej jest bardzo trudne, i diagnoza może być dokonana jedynie w badaniach kinetyki enzymów.

Diagnostyka różnicowa anemii hemolitycznej, związane z niedoborem aktywności kinazy pirogronianowej

Diagnostyka różnicowa anemii hemolitycznej, związane z niedoborem aktywności kinazy pirogronianowej, niezbędne do wykonywania innych form dziedzicznej niedokrwistości hemolitycznej.

Ponieważ większość pacjentów z niedoborem aktywności kinazy pirogronianowej przeciwieństwie osób, cierpi microspherocytosis, elliptotsitozom, stomatocitozom, niedokrwistość hemolityczna, klimatyzowane karetki niestabilny hemoglobiny, i choroby talasemii jest dziedziczona w sposób autosomalny recesywny, że ta patologia występuje tylko w tej samej generacji i prawie nigdy nie widziałem wśród rodziców.

Gdy anemia dziedziczna, klimatyzowane karetki niestabilny hemoglobiny, szczególnie ciężka choroba, Czasami probant jest pierwszy nośnik mutacji, i choroba jest przekazywana do następnego pokolenia. Dlatego też, różnicowaniu musi być przeprowadzone z hemoglobinopatiami, klimatyzowane karetki niestabilny hemoglobiny, jak również recesywny odziedziczył niedokrwistość hemolityczna, spowodowana niedoborem aktywności innych enzymów.

Odgrywa rolę pomocniczą stabilność hemoglobiny, elektroforezy Yego. W celu wykluczenia innych fermentopathia badano aktywność innych enzymów erytrocytów, i wykluczyć niedokrwistość hemolityczna autoimmunologiczna prowadzone Coombs, agregatgemagglyutinatsionnaya.

Sposób fluorescencyjnego oznaczania aktywności przez piruvatkiiazy Beutler

Odczynniki.

1. Kwas Fosfoenolpirovinogradnaya (Sól tritsiklogeksilammoniynaya) 0,15 M roztworu, zobojętnia się do pH 7,0-8,0 0,2 M roztworu NaOH (0,03 ml).
2. ADF 0,03 M roztworu, zneutralizowane (0,1 ml).
3. NAD-N 0,015 M roztworu, zneutralizowane (0,1 ml).
4. Siarczan magnezu 0,08 M roztworu (0,1 ml).
5. Roztwór buforowy fosforanu potasu 0,25 M, pH 11 7,4 (0,05 ml).
6. Distillirovannaya wody (0,62 ml). Mieszaninę można przechowywać w temperaturze - 20 ° C nie dłużej niż tydzień.

Metoda.

Wykorzystania krwi do badań, zrobione z heparyną lub cytrynian sodu. Jest odwirowuje, plazmowe wolnossące i przygotować 20 % zawiesinę krwinek czerwonych przez dodanie czterech objętości roztworu chlorku sodu, izotoniczny.

Zawiesiny erytrocytów w ilości 0,02 ml miesza się z 0,2 ml odczynnika i inkubowano 30 minut w 37 ° C. Kropelek umieszczony na bibule filtracyjnej i przeglądanie fluoroscope. Fluorescencja bazowa stwierdzono natychmiast po dodaniu erytrocytów do mieszaniny przed inkubacją. Zazwyczaj po 30 minutach inkubacji znika, i aktywność pozostałości niedobór kinazy pirogronianowej. To jest, NADH, które fluoryzują pod wpływem promieniowania UV w obszarze, blisko widoczne, podczas gdy NAD nie fluoryzuje. Ponieważ powyższe rozwiązanie jest niestabilne i łatwo rozkładowi, wymaga monitorowania. Należy dokładnie oddzielić warstwę białych krwinek, od aktywności kinazy pirogronianowej niedoboru aktywności enzymu erytrocytów w leukocytach może być normalne.