Mikroskopowe badanie płynu mózgowo-rdzeniowego

Cytoza Oznaczanie

W płynie mózgowo-rdzeniowym u zdrowych osobników zawierały bardzo małą liczbę komórek. Znaczenie kliniczne mają głównie leukocyty (limfocyty). Aby policzyć białych krwinek nie kolidują erytrocyty, Niszczą je przez dodanie nierozcieńczony płyn mózgowo-rdzeniowy 1/10 Części fuksyny kwasu octowego. Kolory Magenta zarodkowanego komórki na czerwono. Do malowania leukocytów przy użyciu odczynnika Samson (mieszany 30 ml lodowatego kwasu octowego, 2 ml skroplonego fenolu, 2 ml alkoholowego roztworu fuksyny 1 : 10 i dodatek 100 ml wody destylowanej). Odczynnik odporne, dobre komórki plam i w ciągu kilku godzin utrzymuje je z cytolizę.

Zastosowanie jako rozwiązanie, zawierający 5 ml 10 % kwas octowy 0,1 Pan metilvioleta. Jest to mniej stabilną, Komórki plama niebiesko.

Ze względu na właściwości cytolitycznych płynu mózgowo-rdzeniowego do zliczania liczby komórek powinna być natychmiast po pobraniu. Płyn jest dozowany do rurki lub mikropipeta proporcjonalnie spada 10 Części płynu mózgowo-rdzeniowego i 1 barwnik i część rozwiązaniem dla 10-25 minut w lewo do barwienia komórek. Do hodowli leukocytów można stosować mikser. Komórki płynu mózgowo-rdzeniowego szybko przyklejać się do ścian rurek, tak, płynne, box in vitro, przed Badanie należy dokładnie wymieszać ruchów obrotowych między palmami.

W celu obliczenia liczby komórek służy Izba Fuchs-Rosenthala. Licząc produktów w całej sieci przez 5 min po napełnieniu komory. Liczba komórek 1 L jest dana przez:

X =(* 11)/(3.2*10)

w którym X - liczba komórek 1 l; - Liczba ogniw, liczona na powierzchni ekranu; 3,2 - Objętość komory; 11/10 - Rozcieńczanie.

Dozwolone rejestracji hrabiów jako ułamek, np 14/3, gdzie 14 - Liczba komórek liczone w komorze, 3 - Objętość komory Zaokrąglanie. Z dużej liczby komórek jest wystarczająca, aby policzyć w jednej połowie siatki i liczby otrzymanych double. Z wyraźnym pleocytoza (Znaczący wzrost liczby komórek) mogą liczyć komórki 16 Małe kwadraty i pomnożyć tę liczbę przez 16.

W przypadku braku komory Fuchs-Rosenthala mogą być stosowane Komora licząc Goryaeva o znacznie mniejszej pojemności, dlatego jest liczone komórki co najmniej trzy kwadraty, wyliczyć średnią arytmetyczną i pomnożyć go na 1,2. Współczynnik 1,2 otrzymuje się ze wzoru

X =(* 11)/(0.9*10)

gdzie komora pojemność 0,9-, 11/10 - Rozcieńczanie.

Kiedy zliczanie komórek w płynie mózgowo-rdzeniowym nierozcieńczonego jednego z pierwszych kropel, wynikające z igły do ​​nakłuwania, umieszczone w Fuchsa-Rosenthala określenia liczby komórek, jak wspomniano powyżej,.

Zwykle liczba komórek (limfocyty) w 1 l płynu mózgowo-rdzeniowego z komór mózgu, móżdżku i mózgu zbiornika 0-1, i płynnych, pobrane poprzez nakłucia lędźwiowego - 2-4.

Dzieci w wieku poniżej trzech miesięcy 1 l płyn mózgowo-rdzeniowy znajduje się 20-23 komórek, do jednego roku - 14-15, do dwóch lat - 11-14, od dwóch do pięciu lat - 10-12, od pięciu do siedmiu lat, 8-10, siedem do dziesięciu lat - 6-8, więcej niż dziesięć lat - 4-5.

Gdy zapalenie opon mózgowych, guzy ropień mózgu i liczby komórek w płyn mózgowo-rdzeniowy zwiększa.

W badaniu płynu mózgowo-krwotocznego, w niektórych przypadkach jest to niezbędne do ustalenia jego prawdziwej cytoza. W tym celu Metoda Friedmana: krwotoczny płynu reagent Samson wzmocnienia w celu określenia liczby komórek i izotoniczny roztwór chlorku sodu, do zliczania liczby czerwonych 1 l płynu mózgowo-rdzeniowego.

Na Przykład, Liczba komórek w 1 l - 20, liczba czerwonych krwinek - 3600. Liczba czerwonych krwinek i białych krwinek rozpoznać pacjenta z ogólnej analizy, wykonywane przed punkcji lędźwiowej. Na Przykład, w 1 ml krwi 4 200 000 erytrocyt, 7000 leukocyty. Dlatego trzeba się leukocytów i erytrocytów 4200000/7000 = 600.

Aby uzyskać prawdziwą wartość utożsamia cytozy:

na 600 Czerwone krwinki - 1 leukocyt;

na 3600 erytrocyty - X leukocyty, Więc,

X = 3600/600 = 6 леикоцитов.

Prawda płyn mózgowo-rdzeniowy cytoza 20-6 = 14 komórki 1 l.

Zastosowanie tego sposobu jest ograniczona, od płynu mózgowo-rdzeniowego z znaczną domieszką krwi nie nadaje się do takiego badania.

Określanie liczby erytrocytów w płynie mózgowo-rdzeniowym Jest on ustawiony na ustalenie nasilenia krwotoki wewnątrzczaszkowe pacjenta.

W obecności 1 l 2000-5000 erytrocytów staje się różowy płyn mózgowo-rdzeniowy, 900-1000 Erytrocyty - tylko lekko opalizujący. Bezbarwna ciecz może być wykryta przez dolne czerwonych krwinek. Znaczenie kliniczne zwiększenie dynamiki poziomu krwinek czerwonych.

Różnicowanie komórek płynu mózgowo-rdzeniowego odbywają się w komorze do liczenia, w postaci natywnego i barwiono.

Przy dużym powiększeniu (okular 10X lub 15X, Obiektyw 40x) w komorze do liczenia zwracając uwagę na ilość limfocytów, formularz, Położenie i rozmiar jąder, Obecność wtrąceń w cytoplazmie. To jest łatwe do odróżnienia limfocyty, granulocytów, makrofagi. Normalnie, w płynie mózgowo-rdzeniowym zawierającym tylko limfocyty.

Dla pełnego charakteryzowania składu komórek w płynie mózgowo-rdzeniowym badane preparaty zabarwione. Komórki barwiono płynu gorzej, od krwinek. Istnieje kilka sposobów barwienia: przez Rosina, Broić, Papanicolaou, Aleksiejew, Może Gryunvalydu, Pappengeymw.

Określania charakteru metody mikroskopii fluorescencyjnej pleocytoza

Odtłuszczone powlekanego szkiełku kroplę płynu mózgowo-rdzeniowego, wymieszać z fluorochromem barwnika (Mieszaninę roztworów wodnych soli oranżem akrydyny i rodamina w hodowli 1:20000). Mieszane leku w badaniu pod mikroskopem fluorescencyjnym ML-2 w świetle niebiesko-fioletowego w widmie widzialnym, używając kombinacji filtrów wzbudzenia: FS 1-4, FBS 14-4, BS 8-2 i filtry blokujące LS-1 zanurzenia obiektywu. Jak neflyuorestsiruyuschego oleju zanurzenie wykorzystywane do badań dimetylu (ester dimetylowy kwasu ortoftalowego).

Na ciemnym tle pola widzenia i limfocytów polynuclears łatwo rozpoznać po zielonym blaskiem cytoplazmie. Liczba wierszy 100 komórka, podano liczbę limfocytów i neutrofilów.

Limfocyty różni się od charakteru neutrofili jądra (glybchatoy struktura z pomarańczowymi wtrąceń) i jasna zieleń fluorescencyjna.

Granulocytów obojętnochłonnych mają jasną strukturę, ich świeci rozproszony chromatyny jądra, jednolite jasne- zielony. Cytoplazmy żółty- zielony, go rozproszone ceglasty granulki.

W przypadku drobnych rodzimych płyn mózgowo-rdzeniowy cytozy odwirowuje i badania osad.

Fluorescencyjne badanie mikroskopowe płynu mózgowo-rdzeniowego można łatwo stwierdzić, że neutrofili, lub charakter limfocytowa komórek wielojądrzastych pleocytoza.

Cechy morfologiczne komórek płynu mózgowo

Limfocyty

W płynie mózgowo-rdzeniowym u zdrowych osób uznało małych i średnich limfocyty (1-2 1 l) wielkość 4-6 mikronów. Te okrągłe komórki z dużą jądra i cytoplazmy glybchatym bardzo wąski.

Gdy limfatycznego pleocytoza (gruźlicze zapalenie opon mózgowych, wągrzyca) wraz z pojawiać małe i średnie duże limfocyty (8-9 M), Od czasu do czasu możliwe jest wykrycie komórek bezpośrednie rozszczepienie.

Liczba limfocytów (w połączeniu z innymi komórkami) wzrost w płynie mózgowo-rdzeniowym w guzach mózgu, Podczas przewlekłego zapalenia opon mózgowych. Gdy choroby neurochirurgiczne wzrost liczby limfocytów w okresie pooperacyjnym występuje po zwiększeniu liczby neutrofili i wskazuje korzystny wynik.

Komórki plazmatyczne

Komórki plazmatyczne można wykryć w płynie mózgowo-rdzeniowym, tylko wtedy, gdy obecny długo, zapalenie mózgu i opon mózgowych. Morfologia komórki plazmatyczne, takie jak, w krwi lub szpiku kostnego punktowego.

Te okrągłe komórki z ekscentrycznie znajduje jądra i intensywnie kolorowe, zasadochłonne cytoplazmy. W niektórych przypadkach może osiągnąć ich ilość 26%. Są to komórki plazmatyczne w okresie pooperacyjnym i słaby kurs procesy naprawcze w uszkodzeniu mózgu.

Gistiocitы

W normalnym płynu mózgowo-rdzeniowego są czasami w formie pojedynczych kopii.

Zabarwione preparaty histiocyty mają duży rdzeń i stosunkowo wąski cytoplazmy. Ilość komórek 7 do 10 m, nieregularny kształt okrągły lub. Rdzeń fasoli lub niewłaściwej formie tarczy, normohromnaja. Jąderka są widoczne w rodzimych preparatów z mikroskopu z kontrastem fazowym.

Gdy gruźlicze zapalenie opon mózgowych w płynie mózgowo-rdzeniowym, ujawniło wiele histiocytów, oddalone od siebie i klastry, ich cytoplazmie zasadochłonne, malowane bardziej intensywnie.

Z dostępnych danych, niektóre rodzaje komórek glejowych może przekształcić histiocytów. Duża liczba histiocytów wykryto w płynie mózgowo-rdzeniowym u pacjentów, przeszedł operację na mózgu lub kręgosłupa (co wskazuje aktywną reakcję tkanek i gojenie ran normalne), oraz u osób, gruźliczego zapalenia opon mózgowych cierpi i mukowiscydozy w powolnym zapalenia bieżącym. Gdy nowotwory mózgu inwazja do przestrzeni podpajęczynówkowej i histiocytów w ścianie komory, mogą pojawić się w płynie mózgowo-rdzeniowym, w połączeniu ze zmienionymi komórkami i makrofagów, co jest charakterystyczne dla powstania wokół strefy reakcyjnej guza.

Makrofagi

Makrofagi są utworzone z pojedynczego- komórki śródbłonka i multi-pajęczynówka i monocyty. Elementy śródbłonka pajęczynówka jest oddzielona od syncytium i komórki stają się zaokrąglone, posiadająca ameboidalnego przepływu i penetrację płynu mózgowo.

Makrofagi pochłaniają i trawią aktywnie komórki i inne elementy, wpada do płynu mózgowo-rdzeniowego w procesach patologicznych, przyczyniając się do jej oczyszczenia. Wtrącenia w cytoplazmie makrofagów łatwo odróżnić w komorze i barwiono.

Makrofagi fagocytują erytrocyty, zniszczone lub niemodyfikowane granulocytów obojętnochłonnych, kropelki tłuszczu, gematoidina kryształy, etc.. Często w cytoplazmie makrofagów wakuoli o różnej wielkości, albo jeden duży vacuole, która zajmuje prawie całą cytoplazmy, gdy rdzeń jest przesunięte na obwodzie. W takich przypadkach, komórka ma postać pierścienia - cricoid makrofagów.

Normalnie makrofagi do rdzenia płynu nieobecny. Ich pojawienie się w prawidłowej liczby komórek wskazuje krwotoku i zapalenia ośrodkowego układu nerwowego. Wiele makrofagów w płynie mózgowo-rdzeniowym w okresie pooperacyjnym oznacza aktywną naprawę (pozytywne nastawienie). Mała liczba makrofagów lub ich brak, gdy wyraził pleocytoza - niekorzystne znak prognostycznym.

Ziarniste kulki – komórki piankowe

Ziarniste kulki (komórki piankowe) Makrofagi są duże, z wieloma wtrąceń kropelek tłuszczu w cytoplazmie.

Jest to najczęściej Zaokrąglony kształt komórki, amarantowym kolorze ciemnym brązowym kolorze. W leczeniu rdzeniowy ziarnistych kulki Sudan III malowane na pomarańczowo-czerwone.

Wykryto w płynie mózgowo-rdzeniowym w kontakcie z cieczą, w tym od cyst o różnej etiologii, zanik tkanki mózgowej (z kroplami tłuszczu), czasami w okresie pooperacyjnym, W niektórych nowotworów mózgu (kraniofaringiome, wyściółczaki i inne.). Jeśli nowotwór znajduje się w komorach, granulowane kule często wykrywany w płynie mózgowo-rdzeniowym z komór. Źródło ziarnistych kulki są mikrogleju, i oligodendrocyty, komórki zewnętrznej skorupy naczyń i pajęczynówki.

Granulocytów obojętnochłonnych

Granulocytów obojętnochłonnych w płynie mózgowo-rdzeniowym podobna do krwi neutrofilowego granulopitami, ich cytoplazmie (w komorze do liczenia i preparatów rodzimych) Często rozciągnięty, ma występ (pseudopodia). Ta różnorodność komórek obserwowanych w pierwszych 10-15 minutach po zażyciu płynu mózgowo-rdzeniowego i wskazuje zachowanie granulocyty obojętnochłonne- Zdolność granulocytów przenieść. Charakterystyczny jest jądro segmentowy, liczba segmentów, w których zmienia się od 4:58; granulocytów obojętnochłonnych kłute są rzadkie.

Podczas przechowywania płynu mózgowo-rdzeniowego, zanim zmieniło granulocytów, od innych komórkach. Jądra granulocytów obojętnochłonnych mogą być poddane lizie lub segmenty są zaokrąglone, z wyraźnymi konturami, połączone przez cienki mostek; później mieć formę pojedynczych granulek. Makrofagów, które są przechowywane tylko jeden segment rdzenia okrągły kształt, wyglądem przypomina komórkę Loevit. Tam obrzęk granulocytów obojętnochłonnych niewyraźnych konturach z segmentów, zajmujący prawie całą cytoplazmy. W preparatach barwionych mogą obserwować wszystkie etapy upadku granulocytów obojętnochłonnych - obrzęk rdzenia do całkowitego zniszczenia struktury komórkowej, gdy nie są widoczne kontury cytoplazmie, i podstawowe segmenty są bezkształtne, składający się z miękkiej siatki chromatyny. Skład tych komórek do granulocytów obojętnochłonnych można ustawić tylko w wyniku reakcji z peroksydazą: Obecność zielono-żółty lub brązowy granulek w cytoplazmie zniszczone.

Czasami w płynie mózgowo-rdzeniowym, znaleziono granulocytów obojętnochłonnych z pyknotic jądra w postaci brył o nieregularnych kształtach hyperchromatic.

Granulocytów obojętnochłonnych pojawiają się w płynie mózgowo-rdzeniowym z krwotokami w przestrzeni podpajęczynówkowej, chorób zapalnych układu nerwowego, po operacjach neurochirurgicznych. Obecność granulocytów obojętnochłonnych w krwi, w płynie mózgowo-rdzeniowym jest wskaźnikiem zapalenia opon mózgowo-rdzeniowych.

Przewaga neutrofili niezmienionych Dowody ostrego zapalenia.

Nagły Pojawienie się neutrofilów pleocytoza widać na łamanie ropień pod mózgowych.

Gdy ropień, Znajduje się głęboko w tkance mózgowej, Zazwyczaj obserwuje się wyrażone łagodny pleocytoza z przewagą limfocytów.

Gdy tłumienie stanu zapalnego w płynie mózgowo-rdzeniowym, pojawiają zdegenerowane postaci granulocytów obojętnochłonnych.

Obecność zmiany i niezmienione neutrofili charakterystyczne ciągłego procesu zapalnego. Należy wziąć pod uwagę,, że niemodyfikowane neutrofilowych granulocytów pojawiają się w płynie mózgowo-rdzeniowym w mieszaninie świeżej krwi, W takich przypadkach, określenie korekcyjne cytoza.

Eozynofilowe granulocyty

Granulocyty kwasochłonne w natywnych próbki płynu mózgowo-rdzeniowego, różnicowanie z innymi komórkami w obecności charakterystycznego dużą ziarnistość błyszczące, napełnianie cytoplazmy. Komórki z dwóch łopatkach jądra rzadkie, Formularz jednojądrzastych często obserwuje. Morfologia granulocytów kwasochłonnych w samych barwionego, krwią. Często mózgowo granulocyty kwasochłonne znalezionych płyn zniszczone.

Granulocytów kwasochłonnych zawartość do płynu mózgowo-rdzeniowego w zakresach od mukowiscydozy 1 do 46%.

Występowanie zapalenia opon jako powikłanie pajęczynówki tsistitserkoznogo towarzyszy neutrofilów pleocytoza oraz zmniejszenie liczby granulocytów kwasochłonnych. Dla abstsedirovaniya bańki Echinococcus mózgu charakteryzującym się obecnością w ich zawartości granulocytów obojętnochłonnych i granulocytów kwasochłonnych, który służy jako cecha pomocniczego w różnicowaniu go z ropniem. Czasem duża liczba granulocytów kwasochłonnych można znaleźć w treści torbieli nowotworów mózgu i rdzenia kręgowego (nerwiak, kraniofaringiome, wyściółczak, przerzuty nowotworowe w mózgu). Znaczący wzrost liczby granulocytów kwasochłonnych w płynie mózgowo-rdzeniowym może być obserwowany po tsisternoskopii komorowej.

Po usunięciu guzów mózgu z aktywnym rany chirurgiczne rany zwiększa liczbę granulocytów kwasochłonnych, które mogą być traktowane jako miejscowej reakcji alergicznej na uraz opon mózgowych i wchłaniania produktów rozpadu tkanki.

Zmodyfikowane komórki i komórki cień

Właściwości Dzięki cytolityczna komórek płynu mózgowo-rdzeniowego, zawarte w nim przez dłuższy czas, zatrzymać jedynie kontury cytoplazmy i jądra pozostałości. W celu określenia ich przynależności morfologiczny nie jest możliwe. W większości przypadków takie zmiany mogą ulec granulocytów obojętnochłonnych, Czasami to komórki nowotworów złośliwych. Łatwy do poddania cytolizę komórki komór wyściółki i pajęczynówki.

Bazofili tkanki znajdują się w płynie mózgowo-rdzeniowym po neurochirurgii.

Komórki pajęczynówka w płynie mózgowo-rdzeniowym

Komórki pajęczynówka (arahnoэndoteliya) - Pojedyncza warstwa komórek nabłonka, Można je rozróżnić jako liczba komórek komorze do liczenia, i barwione, wytwarza się z osadu płynu mózgowo. Ta stosunkowo duża nieregularnym kształcie komórki lub zaokrąglony, o stosunkowo małym okrągłym lub owalnym jądrze, w centrum miasta.

Jądra komórkowe są barwione Hypochromic, i cytoplazma - blady- lub szaro-niebieski kolor, Tak jest często nierówne kontury i zawiera inkluzje cząstek fagocytowane (kropelki tłuszczu, Elementy komórkowych, wodniczka). Cytoplazma komórek pajęczynówka często niszczone, w takich przypadkach wykryto charakterystyczne jądrze i cytoplazmie fragmentów. Chromatyny ma rdzeni melkopetlistuyu lub strukturę ziarnistą, czasem znacznie jeden niebieski jąderko. Wielkość jąder 5 do 19 m.

Obecność w płynie mózgowo-rdzeniowym komórek jednostkowych pajęczynówki nie jest jednak dowodów, patologii, jak te komórki linii przestrzeni podpajęczynówkowej i, złuszczający, wpaść w płynie mózgowo-rdzeniowym. Zwiększenie liczby komórek obserwowanych w pajęczynówki pajęczynówki, wągrzyca mózgu. Zawartość torbieli pajęczynówki znajdują się w różnych miejscach pajęczynówki komórek i ich symplast jako grupy jąder o różnych rozmiarach i intensywności zabarwienia, otoczony blado cytoplazmie bez wyraźnych granic między komórkami.

Komórki splocie naczyniówki

Od splocie naczyniówkowym z komór do płynu rdzeniowego może wejść wielokątne, zaokrąglona, czasami duże cylindryczne (15-19 M) komórka. Mały (4-5 M) Położony w centrum jądra lub ekscentrycznie, hyperchromatic, eozynofilowe cytoplazmy, intensywnie kolorowe. W cytoplazmie komórek splocie naczyniówkowym ma ziarnistość, czasami w postaci wtrąceń i grudki, wielkości 1-3 mikronów, nieregularny kształt okrągły lub, zielonkawy lub niebieskawy kolor. Niektóre komórki mogą być wykrywane lub przechwycone przez czerwone krwinki wakuoli.

Komórki splotu naczyniówkowego najczęściej znajdywane w płynie od komór mózgu.

Komórki wyściółki komory płynu mózgowo-rdzeniowego w mózgu

Komórki wyściółki komory płynu mózgowo-rdzeniowego w mózgu, pobrane poprzez nakłucia lędźwiowego, Jest łatwo zniszczone w procesie gotowania i barwienia. W barwionych wymazów mają ten rodzaj edukacji, składające się z owalnych o delikatnej strukturze jądra. W niektórych komórkach zachowane cytoplazma otacza rdzeń w postaci wąskiego granicy.

Płynu z komór mózgu, są najczęstszymi komórkach wyściółki z zachowaną strukturą, morfologicznie przypominały komórki pajęczynówka, ale trzon ich malowane jaśniejsze i mają więcej ofert, jednorodny rozkład chromatyny. Bieguny owalnych komórek wyściółki często wskazywali, Cytoplazmy szarawy odcień ma. Nie są oddzielnie zlokalizowany i duże skupiska komórek, który nie może być określony przez granice poszczególnych komórkach.