Metody wykrywania Leishmania w skrobania dotkniętych tkanek przez izolację czystej kultury

Po wysianiu skrobanie zaatakowaną tkankę pacjenta, konkretnego odżywczego średniej Leishmania mnożenie i mogą zostać wykryte za pomocą mikroskopu.

Odczynnik

Среда W.W.W. do uprawy Leishmania (14 g agar, 6 g chlorku sodu, o 150 ml krwi królika defibrinated, pobierane bezpośrednio z serca przed przygotowaniem podłoża, 900 ml wody destylowanej). W wodzie destylowanej dodano chlorek sodu i agar. Kolbę zawierającą Mieszaninę ogrzewano aż do całkowitego stopienia agar i 20-30 min sterylizuje w sterylizatorze parowym w 147,1 kPa (15 w).

Chłodzi się do 56 ° C agar dodany sterylny defibrinated krew królika, miesza się obracając butelkę i napełniono sterylnej pipety 4 ml probówki. Agar krwi kolby podczas dozowania jest łaźni wodnej w temperaturze 58 ° C. Rury z końcówkami średnich.

Po zastygnięciu agaru, są one umieszczane w inkubatorze na dzień na 37 ° C do kontroli sterylności i odbierania ciekłego kondensatu. Jeśli jest ona produkowana nie jest wystarczająco, przed siewem w sterylnych fiolkach, można dodać temat 1 Jeden ml następujących roztworów: 0,85 % chlorek sodu, 1 % Rozwiązanie pepton, Roztwór Hanksa, hydrolizat laktoalbuminy lub inny nośnik składników odżywczych w izotonicznych stężeniach.

Metody wykrywania leiszmania w skrawków tkanek zaatakowanych przez izolacji czystej kultury

Po wybraniu kultury starannie przestrzegać zasad sterylności. Obszar badania skóry jest przetrzeć wacikiem, nawilżone 70 % alkohol.

Po odparowaniu alkoholu, ostry koniec sterylnego ocznego skalpela nacięcia o długości 2-3 mm guzka. Od dołu cięte sterylną pipetę Pasteura ma zgarniania tkanki. Otrzymany kropla płynu surowiczego, krwawą przeniesiono do probówki z otoczeniem. Manipulacji dokonuje się kilkakrotnie, materiałowi każdym siewu nowe rury. Zatyczki do uszu osadzone w parafinie lub umieścić je gumowych nakładek i umieszczone w inkubatorze w temperaturze 22-24 ° C.

Ocena wyników

Uprawy są badane pod mikroskopem codziennie w celu zidentyfikowania czynnika sprawczego. Przeglądaj rodzimych leków, wytworzono sposobem rozdrobnionych kropli, Obiektyw 40×40. Wyniki są uważane za ujemne siewu, jeśli w 40 dni patogen nie został znaleziony. Kultury są wydłużone leiszmania (10-12 Mikronów z okablowaniem).

Zastosowanie metody hodowli jest najbardziej przydatna, gdy tuberculoid forma Leiszmanioza, diagnostyka, że ​​inne metody mogą być mniej skuteczne.