Metody wykrywania Leishmania w rozmazie szpiku kostnego
Odczynniki do wykrywania Leishmania
- Alkohol metylowy, lub absolutny alkohol etylowy, lub mieszanina Nikiforov (Mieszanina równych ilości eteru i absolutnego etanolu).
- PH 6,9-7,1 Фосфатный буфер, do wytwarzania których są mieszane 40 ml KH2RO4 (9,078 g suchej masy KH2RO4 w 1 litra roztworu) i 60 ml Na2PHO4 (11,876 g suchej masy 1 litra roztworu).
- Azureozin Romanovsky.
Metody wykrywania Leishmania w rozmazie szpiku kostnego
Od punkcikowe szpiku kostnego bezpośrednio po opiekę, nie zniszczyć lub zdeformować komórki,przygotowanie cienkie smugi. Jeśli gęstej punktowego, zrobić odcisk. Po znaczącym krew w punkcikowe odizolowane od niego na szybie trochę białawe grudki tłuszczu, Jeśli są rozróżnialne, i przygotować im plamy.
Przygotowany rozmaz suszy się powietrzem, następnie utrwalane, rozmazie krwi jako. Suche wymazy stałe mogą być przechowywane przez kilka dni.
W rozmazie przelewa rozcieńczyć w buforze barwienia Romanovsky (około 3-5 ml) i pozostawiono na 30 50 m. Po barwieniu płukane wodą destylowaną, suszone i badane pod mikroskopem z systemu zanurzeniową.
Ocena wyników detekcji Leishmania w rozmazach szpiku kostnego
W środku choroby Leishmania zwykle w punkcikowate szpiku kostnego w znacznej ilości, a tym samym są one łatwe do znalezienia. Jednakże, we wczesnym stadium choroby, u pacjentów leczonych, w celu zidentyfikowania czynnika sprawczego, To wymaga długiego widok wszystkich rozmazem (nie mniej 40 m).
Leiszmania znaleźć w makrofagach lub zewnątrzkomórkowo zaokrągleniu lub risovidnyh komórek o średnicy 3-5 mikronów. Cytoplazma jest w kolorze szaro-niebieski kolor, i rdzenia - w czerwono-fioletowy. W cytoplazmie, znajdujące kinetoplasts - w kształcie pręta lub zaokrąglone wykształcenie, intensywnie kolorowe rdzeń.
Dla Leishmania nieraz płytek lub "odłamki" komórek (Komocki citoplazmy, zawierające materiał jądrowy), znaleźć w rozmazie szpiku kości, obce mikroorganizmy (np, jednokomórkowe glony), uwięziony w rozmazie podczas malowania. Rozmaz są trudniejsze, niż Leishmania (ciemnoniebieski cytoplazmie i jądrze jasnym szkarłatem), kinetoplasts brakujące.