Badania chemiczne płynu mózgowo-rdzeniowego

Główne różnice w składzie w płynie mózgowo-rdzeniowym i osoczu krwi jest to, że, na tym, że ciecz o 300 razy mniej białka, znacznie mniej cholesterolu, Glukoza i więcej chlorki.

Chemiczny Skład płynu mózgowo-rdzeniowego To odzwierciedla duże zmiany, występujących w ośrodkowym układzie nerwowym.

Białek w płynie mózgowo-rdzeniowym

Zwykle w płynie od komór mózgu zawiera 0,12-0,2 g białka / litr, od 0,1-0,2 móżdżku mózgu tsisterny-, od przestrzeni podpajęczynówkowej rdzenia kręgowego - 0,22 0,33 g / l.

Zmniejszenie lub zwiększenie białka płynu rdzeniowego To oznacza, patologiczny proces. Średnia zawartość protein nie dają powód do zablokowania obecności organicznego uszkodzenia ośrodkowego układu nerwowego, ze względu na możliwość naruszenia proporcji frakcji białkowych w płynie mózgowo-rdzeniowym. W normalnym składzie białek różni się od braku płynu mózgowo-rdzeniowego i surowicy obecności euglobuliny dodatkowych frakcji.

Badanie pochodzenia białek płynu mózgowo-rdzeniowego znaleziono, prawie 10 % nie mają immunologicznej podobieństwo białek surowicy i są klasyfikowane jako specyficznych białek OUN.

Zwiększanie zawartości białek w płynie mózgowo-rdzeniowym Jest to spowodowane hemodynamicznych zaburzeń mózgu i zastoju krwi w naczyniach ośrodkowego układu nerwowego.

Frakcja Prealbuminovaya w płynie od komór mózgu jest 13-20%, z móżdżku zbiornika mózgu - 13/07, Płyn, pobrane poprzez nakłucia lędźwiowego,- 4-7 % Całkowita zawartość białka. Frakcja białka jest nieobecny blokady mózgowo przestrzeni płynowych, może on być maskowany Albumina jest zawsze przypisany na najwyższym poziomie białek w płynie mózgowo-rdzeniowym.

Guzów mózgu, chorób zapalnych ośrodkowego układu nerwowego w płynie mózgowo-rdzeniowym, zmniejsza się zawartość frakcji drobnych (Albumina, A'1- и a2-глобулинов) i zwiększenie zawartości gruboziarnistych (b- и c-глобулинов).

Aby zidentyfikować wysokiej zawartości płynu mózgowo-rdzeniowego może być stosowany globuliny Reakcja Pandey, w przeliczeniu na zmętnienie cieczy w wyniku koagulacji białek wpływ fenolu. Przeprowadzenie tej metody drop reakcja pozwala na znaczne oszczędności płynu testowego, często dostarczany do laboratorium z bardzo małą ilością.

Odpowiedź globulin chociaż są stosowane w diagnostyce laboratoryjnej, ale dają tylko przybliżone pojęcie o zawartości białka.

Ilość białek w płynie mózgowo-rdzeniowym, jak określono, w moczu, Metoda Brandberg-Roberts-stolnik lub metoda kolorymetryczna za pomocą kwasu sulfosalicylowego i siarczan sodowy.

Intensywność zmętnienia, tworzy się przez dodanie do płynu mózgowo-rdzeniowego kwasu sulfosalicylowego, proporcjonalne do stężenia białka.

Krwotocznych zawartość białka płynu mózgowo-rdzeniowego może być poprawiona przez białka osocza. Po otrzymaniu płynu mózgowo, Krew w kolorze, Pacjent musi krew z palca roztworem chlorku sodu i izotoniczny rury w celu uzyskania, barwione nieco bardziej intensywnie, niż ciecz. Rury z płynu mózgowo-rdzeniowego i krwi powinny być tej samej grubości i koloru szkła. Barwa poziomu cieczy w komparatorze, ostrożnie dodając do rozcieńczonej krwi izotonicznym roztworze chlorku sodu, następnie odwirowano i ilość białka w bezbarwny przezroczysty na- ciecz osadowa. Prawda białka w płynie mózgowo-rdzeniowym jest przez odjęcie ilości białka w rozcieńczonej krwi od ilości białka w ciekłej krwotocznego. Metodologia ta jest bardzo dokładne, Jest stosowany w przypadkach, Gdy staje się krwotoczną bezbarwny płyn mózgowo-rdzeniowy po wirowaniu.

Zawartość białka płynu mózgowo-rdzeniowego wzrasta z naruszeniem hemodynamiki, zapalny, Po operacji na ośrodkowy układ nerwowy, jak również w nowotworach mózgu i rdzenia kręgowego. Wyraźny wzrost ilości białka obserwowano zastoju żylnego w połączeniu z naruszeniem cyrkulacji płynu mózgowo. W takich przypadkach, wysokobiałkowy cytoza normalny - dysocjacji komórek białka. W połączeniu z jej xanthosis charakterystyczne Zespół Froana, która jest obserwowana w guzach mózgu i rdzenia kręgowego. Zmniejszenie ilości białka w płynie mózgowo-rdzeniowym, są zaznaczone na jej nadmierne wydzielanie i wodogłowie.

Reakcja Nonne-Apelt dlya specyficzne globulin. Jego zasada polega na wytrącaniu globuliny, w obecności nasyconego roztworu siarczanu amonu. Reakcję uważa się za pozytywną, gdy zawartość płynu mózgowo-rdzeniowego 0,05 % globulin i więcej. Daje to wskazanie zawartości globulin w płynie mózgowo-rdzeniowym.

Ilość globulin znacznie zwiększona w przewlekłych procesach zapalnych i zwyrodnieniowych ośrodkowego układu nerwowego (zapalenie opon mózgowych, meningoэncefalit, ogólnego paraliżu, stwardnienie rozsiane). Poprzez zwiększanie poziomu albumin, globulin złamane stosunek globuliny płynu mózgowo. Zwykle waha się między 0,2-0,3. Dla bardziej dokładny obraz frakcji białek płynu mózgowo-rdzeniowego należy je zdefiniować za pomocą elektroforezy lub innych metod ilościowych.

Badanie składu białka w płynie mózgowo-rdzeniowym przez elektroforezę - Czasochłonne, od badania kompozycji surowicy krwi. W płynie mózgowo-rdzeniowym 200-400 razy mniej białka, Dlatego prekoncentratem (skoncentrowany) przez ultrafiltrację w próżni, dekstranu lub dializie gumy arabskiej, i odparowanie w próżni. Jednak zagęszczanie płynu mózgowo-rdzeniowego może być utraty frakcji białka lub identyfikacji artefaktów. W związku z tym ustalenia ma Niewątpliwą zaletą proteinogram płynu mózgowo-rdzeniowego za pomocą elektroforezy na żelu agarowym lub poliakrylamidu.

Elektroforeza w żelu agarowym w zdrowym ludzkim płynie mózgowo-rdzeniowym izolowanym γ₂– и c₃-hlobulynы.

Bardziej czuła metoda frakcjonowania białek w płynie mózgowo-rdzeniowym, nie wymaga zagęszczania, To jest эlektroforez z poliakrilamidnom Gele, pozwalające na określenie frakcji białkowych 30-40, głównie w γ-globuliny.

Metodę immunoelektroforezy wykryto w płynie mózgowo-rdzeniowym immunoglobuliny A, M, G, Zawartość jest 3-4 razy niższa, niż w surowicy: 2,65 мг / л IgG, 2,05 mg / l, a IgA 0,24 мг / л IgM.

Skład frakcyjny białka płynu mózgowo-rdzeniowego wiek przechodzi duże zmiany. Dla dziecka, charakteryzuje się niskim poziomem albuminy, choć poziom pre- frakcji albumin jest stosunkowo wysoki. Podeszłym wieku obserwuje się wzrost IgA i IgG, które odnoszą się do γ-globulin.

Badanie składu frakcyjnego białka płynu mózgowo-rdzeniowego istotną wartość diagnostyczną ma, Od wielu chorób OUN (Nowotwory, rasseânnom rozsiane) łączna kwota nie może być zmieniona. Najbardziej diagnostycznie cenna jest jednoczesne określanie frakcji białkowych, lipo- i glikoprotein.

Ustalony, że w ostrych chorób zapalnych układu nerwowego najbardziej charakteryzuje się wzrostem zawartości płynu mózgowo-α-globuliny, w przewlekłych procesach zapalnych - immunoglobuliny, i nowotwory złośliwe - β-lipoprotein.

Oznaczenie białka Reakcja koloidalne

Reakcja Lange Opiera się ona na, patologicznie zmienione, że kontakt z płynem mózgowo-rdzeniowym drobno koloidalnego roztworu chlorku złota w obecności elektrolitów napierających koagulacji i kolor roztworu zmienił.

Zwykle, płyn mózgowo-rdzeniowy nie zmienia barwę roztworu koloidalnego złota, On pozostaje czerwona. Zmień kolor rozwiązania przyjętego w patologii ocenić dane:

• Czerwony - 0;
• czerwony i fioletowy - 1;
• Fioletowy - 2;
• czerwony i niebieski lub czerwony i opalizujący z małym depozycji cząstek - 3;
• niebieskawo - 4;
• lekko różowy kolor z odcieniem niebieskawym i osadów - 5;
• bezbarwny z osadów - 6.

Rozróżniać cztery typy reakcji Lange:

• normalny, przy czym zmiana koloru nie występuje w ogóle, lub trzy - pięć rurek kolor jest nieznacznie różnić od kolorów w probówce kontrolnej (czerwona z lekkim odcieniem fioletowym);
• zwyrodnieniową, charakteryzujący się zmianą koloru w lewej połowie liczby rurek (z fioletowego na wybielanie) i pojawienie się osadu; obserwowano syfilis mózgu, rasseânnom rozsiane, guzy mózgu i rdzenia kręgowego, rozmiękanie mózgu i innych.;
• zapalny, które mają tendencję do zmiany barwy na prawym boku lub w środku rzędu rur; Zapalenie opon mózgowych obserwowane w różnych etnologii;
• mieszany, w którym następuje zmiana barwy w lewo, a po prawej stronie w rzędzie rur; Mieszane zmiany obserwowane w błonach mózgu i tkanek.

Reakcja Takata-Ara uzupełnia i potwierdza Lange reakcji. Oparte na białkach krzepnięcia płynu mózgowo-rdzeniowego pod wpływem chlorku rtęciowego oraz roztwór zmienia kolor w obecności roztworu mieszaniny fuksyny.

Tam są Cztery typy reakcji:

• negatywny (normalny) - Purpurowy kolor mieszaniny zmienia, ciecz jasne;
• zwyrodnieniową - Utrata niebiesko-fioletowego osadu, na którym jest przezroczystą cieczą;
• zapalny - Mieszanka różowego koloru bez osadu, Czas odbarwia;
• mieszany - Przezroczysta ciecz nad osadem różowy.

Reakcja Takata-Ara jest bardziej wrażliwa, niż reakcja Lange.

Dla rozpoznania degeneracyjnych i zapalnych procesów w OUN stosowane lany reakcji.

Tryptofan reakcji i Levinson reakcji są stosowane do diagnozowania gruźlicy.

Reakcja Friedman używany do wczesnego rozpoznania zapalenia opon mózgowych. Zasada jest, że pod wpływem nadmanganianu potasu występują redoks procesów i zmian zabarwienia płynu mózgowo-rdzeniowego, i pod wpływem kwasu trichlorooctowego wytrącone białko zawarte w nim. Do urazów, Nowotwory, syfilis mózgu, MS kolor cieczy nie zmienia.

Płyn mózgowo wykrywa 20 do 25 wolne aminokwasy. W celu zbadania składu aminokwasów mózgowo chromatografii cieczowej przy zastosowaniu nowoczesnych metod, wymiana jonowa fluorometrię.

Zawartość wolnych aminokwasów amino azotu w płynie mózgowo-rdzeniowym, uśrednione 0.6- 1,4 mmol / l, poniżej, niż w osoczu - 1.9-2.8 mmol / l.

Istotną rolę w diagnostyce chorób układu nerwowego, w badaniach zawartość płynu mózgowo-rdzeniowego glukozy, Enzymy, xloridov, bilirubina, cholesterolu i zalegającym azocie.

Glukozy w płynie mózgowo-rdzeniowym

Normalnie, w płynie mózgowo-rdzeniowym zawierał 2,5 3,33 mmol / L glukozy. Aby określić ich ilość w płynie mózgowo-rdzeniowym, przy użyciu dowolnej z metod, wykorzystywane do określania poziomu glukozy we krwi. Ciecz jest natychmiast badano po wykonaniu, ponieważ pochodzi szybko glikolizy. W ostrym i podostrym zapaleniem opon mózgowo-rdzeniowych stężenia glukozy w cieczy maleje mózgowo-rdzeniowego, czasami (co jest bardzo rzadkie) całkowicie znika. Najczęściej w glukozę płynu mózgowo-rdzeniowego jest nieobecny paciorkowcami i meningokokowe zapalenie opon mózgowych.

Zwiększony poziom glukozy obserwuje się w zapalenie mózgu płynu mózgowo-rdzeniowego i padaczką. Gdy guzy glukozy mózg albo rosną, i upuść.

Kwasu mlekowego w płynie mózgowo-rdzeniowym

W płynie mózgowo-rdzeniowym u zdrowych ludzi metody enzymatyczne określona średnia 1,54 (0,89-2,8) mmol / L kwasu mlekowego.

Najbardziej istotnie zwiększa zawartość kwasu mlekowego w płynie mózgowo-rdzeniowym, pod procesów niedotlenienia i destrukcyjne w tkance mózgowej, nie tylko diagnostyczne, i wartości prognostycznej. Enzymy, zaangażowany w metabolizm OUN, znajdywane w płynie mózgowo-rdzeniowym w znacznie mniejszych liczbach, niż w krwi, i określa się według tych samych metod, i że w krwi.

Ze względu na enzymów glikolitycznych aldolazy często definiuje i dehydrogenazy mleczanowej i jego izoenzymów.

Chlorki w płynie mózgowo-rdzeniowym

Zawartość chlorków w płynie mózgowo-rdzeniowym normalny dorosły 197-242 mmol / l, u dzieci - 195-204 mmol / l. W celu określenia poziomu chlorków w płynie mózgowo-rdzeniowym, można stosować dowolną technikę, stosowane do badania krwi chlorki, lecz z zastosowaniem metody oznaczania objętości płynu przez miareczkowanie azotanem srebra.

Zmniejszenie ilości chlorków gruźliczego zapalenia opon mózgowych obserwowano, czasem - z zapaleniem mózgu, povyshenie- w mocznicy.

Bilirubiny w płynie mózgowo-rdzeniowym

Bilirubiny w płynie mózgowo-rdzeniowym i płynu z torbieli mózgu pochodzenia krwiopochodną i powoduje xanthosis. Do jakościowego i ilościowego oznaczania stężenia bilirubiny korzysta z tej samej próbki, i do oznaczania stężenia bilirubiny we krwi. Zwykle bilirubiny w płynie mózgowo-rdzeniowym, nie wykryto.

Cholesterol w płynie mózgowo-rdzeniowym

U zdrowych cholesterolu w płynie mózgowo-rdzeniowym, lub jest nieobecny, lub jego zawartość waha się od śladów do 0.003-0.005 mg / dl. Zwiększony poziom cholesterolu obserwowane w zapaleniu opon mózgowych i mózgu, nowotwory, szczególnie złośliwe.

W celu określenia, cholesterol w płynie mózgowo-rdzeniowym może być stosowany Metoda Engelhardt-Smirnowa lub Metoda Ilka.

Zwykle zawartość resztkowej azotu w płynie mózgowo-rdzeniowym, uśrednione 8,6-14,3 mmola / l, t. to jest. na 50 % poniżej, niż w krwi.

Poziom resztkowej azotu w płynie mózgowo-rdzeniowym jest badane tymi samymi metodami, i zawartości resztkowej azotu we krwi.

Glikoprotein i lipoprotein w płynie mózgowo-rdzeniowym

Badanie odbyło glikoprotein i lipoprotein przez elektroforezę na papierze wstępnie zagęszczonej agarem żelu poliakrylamidowym lub płynu mózgowo-rdzeniowego lub natywnego. Badania te są stosowane do diagnozowania chorób zapalnych i nowotworów.

W płynie mózgowo-rdzeniowym, wykazały substancje biologicznie czynne, o różnym charakterze chemicznym:

• Mediatorzy (acetylocholina, noradrenalina, dofamin, Serotonina, kwasu gamma-aminomasłowego);
• Hormony przysadki, szyszynka i innych gruczołów wydzielania wewnętrznego;
• neuropeptydy (endorfiny, enkefaliny);
• cykliczne nukleotydy (adenozincnklofosfat, Kwas guanylic);
• prostaglandyny;
• kininy.

Większość z tych związków biologicznie czynnych określono metodą radioimmunologiczną, które jest coraz częściej stosowany w klinicznych diagnostyki laboratoryjnej.