Niedokrwistość, związane z niedoborem kwasu foliowego

Niezależnie od przyczyny, anemia niedobór kwasu foliowego charakteryzuje się występowaniem w megaloblasts szpiku kostnego, śródszpikowy zniszczenia erythrokaryocytes, patsitopeniey, makrocytemię i hyperchromia krwinki czerwone, a czasami - zaburzenia psychiczne.

Foliowy (pteroilglutaminovaya) kwas (aneuryna₉) Składa się ona z trzech części:

• Pierścień pterydynę;
• Kwas p-aminobenzoesowy (razem tworzą kwas pteroievuyu);
• Kwas glutaminowy.

Ciężar cząsteczkowy kwasu foliowego - 441. Kwas foliowy jest aktywny w postaci pochodnych kwasu tetrahydrofoliowych. Zawartość kwasu foliowego w różnych formach w organizmie człowieka wynosi około 5-10 mg. Zapasy z naruszeniem swoich dochodów w organizmie może być bardzo niski na 4 miesiąca.

Dzienne zapotrzebowanie na kwas foliowy wynosi 100-200 mikrogramów, Ciąża, anemia hemolityczna, wzrasta wielokrotnie.

Całkowita ilość kwasu foliowego w diecie przy pełnej mocy 500-600 mikrogramów na dobę. Kwas foliowy - foliany zawarte w znacznych ilościach w wątrobie, drożdże, spinel, mięso. Więcej 50 % kwas foliowy, w żywności, To może załamać po ugotowaniu.

Kwas foliowy jest absorbowany w górnej części jelita cienkiego. Zdolność do absorpcji w jelitach kwas foliowy jest znacznie większa niż dziennego zapotrzebowania.

Kwas foliowy bierze udział w syntezie zasad pirymidynowych i purynowych,, wraz z methylcobalamin - syntezy timidinm nofosfata uridinmonofosfata. Kwasu foliowego koenzymy Bardziej zaangażowane w licznych reakcjach. W szczególności, tetrahydrofolian bierze udział w syntezie kwasów glutaminowego histydyny.

Etiologia i patogeneza niedokrwistości w czasie niedoboru kwasu foliowego

Niedobór kwasu foliowego, a także deficytu kobalaminy, Prowadzi to do rozwoju niedokrwistość megaloblastyczna.

Zaburzenia wchłaniania kwasu foliowego zaobserwowano u osób, resekcja jelita cienkiego, zwłaszcza jelita czczego, a także w długim okresie czasu przy leki przeciwdrgawkowe, takie jak difenylohydantoiny (difenina) i fenobarbital (prześwitu). Wchłanianie kwasu foliowego jest uszkodzony, gdy choroba wlewowego i trzewnej. Niedobór kwasu foliowego, a także deficytu kobalaminy, obserwowano Zespół pętli niewidomych. Opisano rzadkie przypadki chorób dziedzicznych transportu kwasu foliowego przez ścianę jelita i do płynu mózgowo-rdzeniowego. Wchłanianie innych substancji bez cierpienia.

Niedobór kwasu foliowego u noworodków obserwowano wcześniaków, naruszenie wchłaniania jelitowego, kozie mleko Fed, zawierający niewielką ilość kwasu foliowego.

Znaczące wchłanianie kwasu foliowego mogą wystąpić u pacjentów, alkoholików.

Zwiększone zużycie kwasu foliowego w okresie ciąży może prowadzić do niedoboru kwasu foliowego, Jednak w krajach rozwiniętych, dziś jest rzadkością. Niedobór kwasu foliowego u kobiet w ciąży występują, gdy złe odżywianie, Obecność niedokrwistości hemolitycznej, używać dużej ilości alkoholu przed ciążą.

Kliniczne objawy niedoboru kwasu foliowego

Niedobór kwasu foliowego u dzieci i młodych kobiet. Jednocześnie pacjenci skarżą się na ogólne osłabienie, zawroty głowy. W przeciwieństwie do niedoboru kobalaminy Rzadko obserwowano ból języka. Parestezje i inne oznaki linową myelosis brakujące. Często ikterichnost twardówki.

W przeciwieństwie do deficytu niedoboru kobalaminy kwasu foliowego jest rzadko obserwowana gistaminoupornaya Akhil, gastratrophia, chociaż zmniejszenie wydzielania soku żołądkowego jest często.

Niedobór kwasu foliowego, oraz niedobór kobalaminy, charakteryzują się występowaniem w makrocytemię krwi obwodowej, megalocytes i megaloblasts, Obecność niedokrwistości hyperchromic, zmniejszenie liczby retikulocytów, płytki i leukopenia z neutrofilowego przesuwa się w lewo i prawo. Szpiku kostnego - megaloblasts.

Zmiany w układzie nerwowym są różne od manifestacji w B₁₂-Niedokrwistość z niedoboru.

Udowodnione, że osoby z padaczką, Niedobór kwasu foliowego prowadzi do częstych ataków, do ich większego nasilenia. Jest to szczególnie istotne, ze względu na fakt, że biorąc leki przeciwdrgawkowe może powodować zaburzenia wchłaniania kwasu foliowego. Zgodnie z literaturą, u osób z niedobór kwasu foliowego powoduje zaostrzenia schizofrenii, bardziej nasilone objawy i mniej skuteczne leczenie.

Differential rozpoznanie niedoboru kobalaminy i kwasu foliowego

W diagnostyce różnicowej niedoboru kobalaminy i kwasu foliowego jest stosowany Sposób radioimmunologicznym do oznaczania kwasu foliowego w osoczu, a zwłaszcza w erytrocytach. Zawartość kobalaminy jest określona metodą mikrobiologiczną. Jako organizm testowy stosowanych jako Streptococcus faecalis i Lactobacillis casei. Zazwyczaj zawartość kwasu foliowego w zakresach surowicy, Według autorów, przy użyciu różnych metod badawczych, z 3 do 25 ng / ml, i erytrocytów - od 100 do 425 ng / ml.

Niedobór kwasu foliowego zmniejsza się do poziomu w surowicy, i erytrocytów. Zawartość kwasu foliowego na niedobór kolabaminov w surowicy krwi często wzrasta, i erytrocytów może być czasem zmniejszona, mimo spadku, zwykle, mały.

Dla diagnostyki niedoboru kwasu foliowego jest również stosowany Metoda obciążenia histydyna (15 g), następnie określić zawartość kwasu w formiminglutaminovoy moczu. Zazwyczaj większość form histydyny kwasu glutaminowego. Z wyjściem 1-18 mg kwasu moczu formiminglutaminovoy. Na niedobór kwasu foliowego do 8 godziny po jej wprowadzeniu do ciała jest uwalniany z moczem 20 do 1500 mg kwasu formiminglutaminovoy. Znaczna liczba kwasu formiminglutaminovoy wydalane z moczem po podaniu histydyny w osób, leczonych metotreksatem. Na niedobór kobalaminy, marskość wątroby wydalanie kwasu zwiększa formiminglutaminovoy, w mniejszym stopniu, niż z deficytem kwasu foliowego. Normalny poziom zawartości kwasu moczowego metylomalonowego histydyny zwiększa formiminglutaminovoy po otrzymaniu dowodów kwasu z niedoboru kwasu foliowego, Zamiast kobalaminy.

To pomaga odróżnić te dwa stany i badanie izotopów promieniotwórczych. Na niedobór kobalaminy, Polega ona na naruszenie wydzielania czynnika wewnętrznego, zaburzenia wchłaniania znakowanej cyjanokobalaminy, Niedobór kwasu foliowego, jest prawidłowo wchłaniane.

Na niedobór kwasu foliowego, jego wprowadzeniem do ciała prowadzi do wyższej zawartości retikulocytów, podczas iniekcji cyjanokobalamina (pochodne) nieskuteczny. Foliowego niedobór kwasu metylokobalamina zwiększa poziom retikulocytów.

Definiowanie neutrofile Indeks segmentacji

Policz liczbę neutrofilów, z 4 Segment więcej (Całkowity 200 komórka). Określić procent komórek, z 5 segmentów i więcej w stosunku do ilości komórek, z 4 segment. Indeks jest określana według wzoru:

IS =(KS (5 i więcej))/KS(4);

gdzie IC - Indeks segmentacji;

KS (5 i więcej) - Liczba granulocytów podzielonych (na 200 komórka), w którym liczba odcinków jest równa 5 albo więcej;

KS (4) - Liczba granulocytów podzielonych, w którym liczba odcinków jest równa 4.

Normalnie tego wskaźnika waha 2,5 do 25 %. Gdzie, gdy przekracza 30 % (wibracja 120%), Można mówić o neutrofili hypersegmentation. Stwierdzono, niedobór kwasu foliowego, metilkoʙalamina, i mocznica.

Oznaczanie kwasu metylomalonowego przez Giordio w moczu i Plaud

Odczynniki.

1. Żywicę jonowymienną Dowex-ZX4 (Formularz chlorek, 200-400 Mesh). Żywicę przemyto pięcioma objętościami wody destylowanej 3 czasy, zawieszono w dwóch objętościach wody destylowanej i przechowywano w naczyniu w ciemności 4 ° C.

2. Rozwiązanie para-nitroaniliny 0,075 % przygotowano przez rozpuszczenie 37,5 mg odczynnika 500 ml 0,2 M roztwór kwasu chlorowodorowego. Przechowywać w ciemnym naczyniu, Pozostawał stabilny przez kilka miesięcy w temperaturze pokojowej.

3.Buforu octanu (pH 4,3) zrobiony z 1 M octan sodu, 1 M roztwór kwasu octowego.

4.Diazoreaktiv: 4 ml 0,5 % Roztwór azotanu sodu miesza się z 15 ml para-nitroaniliny. Mieszaninę reakcyjną umieszcza się w lodówce w temperaturze 4 ° C i ochłodzony roztwór dodano 4 ml 0,2 M octanu sodowego. Odczynnik stabilne w temperaturze 4 ° C przez dzień.

5.Standard 0,05 M roztwór kwasu metylomalonowego: 295 mg kwasu metylomalonowego rozpuszcza się w 50 ml wody.

Metoda

Mocz zbiera się w butelce szklanej i zamrożono do czasu analizy. Do badania moczu część naładowania (20- 25 ml), rozmrożone, odwirowuje, i supernatant zebrano za pomocą słabego roztworu wodorotlenku sodu lub kwasu solnego do uzyskania pH 6,5.

Wysokość kolumny chromatograficzne 20 cm i średnicy 1 cm był wypełniony żywicą Dowex-ZX4. Warstwa żywicy powinna być w 3 cm. Przepuszcza się przez złoże 5 ml z moczem, przemyto wodą destylowaną (2 × 50 ml z szybkością nie większą niż 15 ml 1 z). Kwasu metylomalonowego mogą być wymywane z żywicą 20 ml 0,1 M roztwór kwasu chlorowodorowego. Dalej 2 ml eluatu mieszano z 3 ml 1 M buforu octanowego, pH 4,3 W probówce z korkiem szklanym (15×2cm). Do mieszaniny dodano 3 ml zimnej diazoreaktiva, przy czym pH podnosi się do 4,0. Mieszaninę ogrzewano w łaźni wodnej w temperaturze 94 ° C. 3 min i 2 ml 3 M roztworu wodorotlenku sodowego. Rurkę wyjmuje się z kąpieli wodnej, zamknięto i zawartość mieszano. Mieszaninę ochłodzono do temperatury pokojowej, 10 min i przy fotometrycznych 620 nm w kuwecie o długości drogi optycznej 1 cm.

Jako kontrolę mieszaninie, składający się z 2 ml 0,1 M roztwór kwasu chlorowodorowego, 3 ml i diazoreaktiva 3 ml buforu octanowego. Rozwiązanie metylomalonowego standardowy kwasu składa się z tych samych elementów i 0,02 ml 0,05 M roztwór kwasu metylomalonowego. Absorbancja tych roztworów mierzone w takich samych warunkach.

Zawartość kwasu metylomalonowego (mg) na jednostkę objętości moczu (1 l) oblicza się według wzoru:

(IS_Próba-IS_kontrola)/(IS_standard-IS_kontrola)**((1000*T)/M)

gdzie: E - absorbancję różnych próbkach;

- Ilość kwasu metylomalonowego w standardowej rurce testowej, ml;

1000 - Ilość moczu, podjęte na badania, ml;

T - ilość kwasu solnego, brane do wymywania, ml;

M - ilość eluatu, podjęte na badania, ml.

W powyższych warunkach, wzór można uprościć w następujący sposób::

(IS_Próba-IS_kontrola)/(IS_standard-IS_kontrola)*236

Gdzie, gdy ilość kwasu metylomalonowego w moczu jest większa 300 mg / l, Należy ponownie miesza się z buforem z octanu eluatu i diazoreaktivom, lecz 2 ml wycieku wskazane jest, aby 4- 10 razy niższe i doprowadzić do objętości 2 ml 0,1 M roztwór kwasu chlorowodorowego. Przy obliczaniu należy uwzględnić rozcieńczenie.

Zwykle na dzień z wydalanego moczu 0,6-4,7 mg kwasu metylomalonowego. Na niedobór kobalaminy codziennej wydalania biegu Kwas Metylomalonowy 294 mg. Normalnie, recepcja 10 g waliny nie zwiększają klirens kwasu metylomalonowego, Niedobór kobalaminy zwiększa wydalanie kwasu metylomalonowego.

Oznaczanie kwasu metylomalonowego przez Zielony w moczu

Odczynniki.

1. Eter.
2. Etanol.
3. Roztwór kwasu chlorowodorowego 0,1 M.
4. Siarczan amonu.
5. Сильноосновная смола деацидит FF (200 siatka, Formularz chlorek).
6. Roztwór azotanu sodowego 0,5 % (masa / objętość).
7. Rozwiązanie para-nitroaniliny (750 mg rozpuszcza się w 1 l 0,2 M roztwór kwasu chlorowodorowego).
8. Octan sodowy 0,2 M.
9. Buforu octanu 1 M, pH 4,3: mieszany 1 M roztworu octanu sodu i 1 M roztwór kwasu octowego w stosunku 16,35:33,9.
10. Wodnym roztworem wodorotlenku sodowego 3 M.

A. Roztwór wzorcowy kwasu metylomalonowego: 100 mg rozpuszcza się w 100 ml wody, przechowywane w lodówce.

B. Praca standardowego Kwas Metylomalonowy: Standardowe rozwiązanie rozcieńczyć w 20 czas 0,1 M roztwór kwasu chlorowodorowego (1 ml standardowe i 19 ml kwasu solnego). Ta kwota ekwiwalentu kwasu metylomalonowego 100 mg Kwas Metylomalonowy 1 Warunki badania l moczu.

W celu przygotowania mieszanej diazoreaktiva 4 ml 0,5 % Roztwór azotanu sodu i 15 ml para-nitroaniliny. Mieszaninę umieszczono w łaźni lodowej i dodać 4 ml 0,2 M octanu sodowego.

Metoda.

Mocz zbierano przez jeden dzień, i jego objętość mierzona 10 ml zakwaszonego 1 M roztworu kwasu siarkowego do pH 2,0 lub nieco poniżej. Siarczan amonu dodaje się do nasycenia. Mieszaninę umieszczono w rozdzielaczu i ekstrahowano trzy razy eterem i etanolu w stosunku 3:1. Aby zapobiec tworzeniu się mieszaniny emulsji ekstrahowany w nadmiarze.

Ekstrakt przepuszczany był przez małą chromatografii kolumnowej (1 – 1,5 cm średnicy), zakończony 5 ml żywicy. Kolumnę przemywano 50 ml wody destylowanej. Kwas Metylomalonowy wymywa 0,1 M roztwór kwasu chlorowodorowego. Po wymyciu wybrane 2 ml eluatu, W dodaje ml buforu octanowego i 3 ml diazoreaktiva.

Po zmieszaniu rurkę umieszcza się w kąpieli wodnej w temperaturze 95 ° C 3 m. Następnie dodaje się 2 ml 3 M wodorotlenku sodowego i po zamknięciu korkiem rurki w celu zminimalizowania kontaktu z powietrzem. Po ochłodzeniu, zmierzono absorbancję przy długości fali 620 im. Dla półwyrobu, zamiast stosowania eluatu 2 ml 0,1 M roztwór kwasu chlorowodorowego, i dla roztworu wzorcowego - 2 ml standardu pracy.