Bloedarmoede, geassocieerd met verstoring van de structuur van globine ketens

Bloedarmoede, geassocieerd met verstoring van de structuur van globine ketens, hemoglobinopathies, of - een groep van ziekten, door de vervanging van één of meer aminozuren in de keten globine, de afwezigheid van de ketting of de uitbreiding.

Het klinische beeld van hemoglobinopathieën Afhankelijk van de plaats van substitutie. Hemoglobine aandoeningen kan bloedarmoede manifesteren, geen veranderingen in het bloed of bepalen toename van hemoglobine en rode bloedcellen te maken.

De eerste beschrijving van hemoglobine geherstructureerd betreft 1949 stad, toen ontdekt, dat de sikkel cel hemoglobine, bewegen elektroforese in alkalisch milieu met een snelheid, een T, dan volwassen hemoglobine.

IN 1956 g volgens de methode van peptide kaarten geïnstalleerd, hemoglobine, gedetecteerd bij sikkelcelanemie en riep hemoglobine S, Het verschilt van gezonde menselijke hemoglobine A verversing één aminozuurketen β-. Gewoonlijk in de zesde positie van β-keten N-terminaal glutaminezuur, en hemoglobinopathieën S - aminozuur valine. Het verschilt de leiding over de glutaminezuur, hemoglobine beweegt derhalve een elektrisch veld op een lagere snelheid.

De meeste hemoglobinopathies geen enkele klinische verschijnselen in de heterozygote, hetzij in de homozygote toestand. Opgemerkt wordt in die gevallen, Wanneer aminozuursubstituties niet de tertiaire en quaternaire structuur van hemoglobine en hemoglobine basisfuncties vernietigen opgeslagen. Sommige hemoglobinopathies biedt klinische manifestaties in de homozygote staat of in combinatie met thalassemie. Soms is de klinische symptomen van de ziekte worden gevonden bij heterozygote dragers van het afwijkende gen in de aanwezigheid van een groep abnormale hemoglobines instabiele. In deze betrekking ruil hemoglobinopathies meest functioneel belangrijke aminozuren. Deze aminozuren nemen aan fixatie van heem voor globine, aan elkaar hechten van de globine ketens.

Serpovidnokletochnaya bloedarmoede, гемоглобинопатии S, C worden op grote schaal verspreid in diverse landen in Afrika. Enkele van de voorkomende vormen van hemoglobinopathieën zijn hemoglobinopathieën ook E, D_Panjab.Vervanging van aminozuren in de β-keten veel vaker, dan α-keten.

Om abnormale hemoglobine te identificeren is het eerst nodig om haar aanwezigheid in de patiënt vast te stellen. Hemoglobine S en stabiel hemoglobine gedetecteerd door elektroforese op celluloseacetaatfilm, papier. Echter, elektroforetische studie biedt een kans om een ​​te identificeren 1/3 Deel van abnormale hemoglobines. Wanneer bloedarmoede, geassocieerd met verstoring van de structuur van globine ketens, diagnose van hemoglobinopathieën enkel geplaatst als het tekenen van instabiliteit hemoglobine detecteert, vaak in de afwezigheid van veranderingen in elektroforetische mobiliteit.

Na het tekenen van abnormale hemoglobine moet scheiden een of andere manier (elektroforese, thermische denaturatie, Chromatografie) van normale hemoglobine A, de keten te verduidelijken, waar een substitutie (werkwijzen voor het hydrolyseren ketens, elektroforetische of chromatografische scheiding van).

De volgende stap is het tryptische hydrolyse van abnormale ketens, De resulterende peptide kaarten om peptide verduidelijken, waarin er een anomalie, pathologisch onderzoek van de aminozuursamenstelling van het peptide, eventueel de volgorde van aminozuren in het peptide te bestuderen.

Wanneer wordt verwezen naar hemoglobine, behalve zijn naam is een keten, waar een substitutie, geeft het aantal aminozuren in de keten (Sinds het einde van de stikstof), titel aminozuur, die op dit moment, en de naam van het aminozuur, die moest in deze regio. Bijvoorbeeld, Hb Eα₂b₂^{26Glu → as} middelen, we praten over hemoglobinopathies E, waar de substitutie plaatsvindt 26 aminozuur β-keten - glutaminezuur naar valine.

Bloedarmoede, geconditioneerd vervoer hemoglobine, veranderen de structuur in hypoxie

De meest voorkomende afwijking van de structuur van hemoglobine hemoglobinopathieën Sα₂b₂^{6Glu → as}. Bij homozygote dragers bespreken sikkelcelanemie, heterozygote - op sikkel-cel afwijkingen.

Drepanocytemia spread in Afrika (Angola, Mozambique, Congo, Liberia, Algerije, Tunesië en anderen.). Vaak is er een ziekte in India, Ceylon, in Turkije, Iran, Irak, Cuba.

Het fenomeen van camber Het is een gevolg van lage oplosbaarheid van hemoglobine, die zuurstof gaf, vergeleken met hemoglobine A. Hemoglobine A, deoxygenated, oplosbaar half, dan hemoglobine, zuurstofrijk. De oplosbaarheid van hemoglobine S zuurstof vermindert het rendement 100 tijd. Dit leidt tot de vorming van gel. Als microscopie onthult kristallen waarde 1,5 m, lijkt op een sikkel erytrocyten. Kristallen, groeit in een richting, riep taktoidami. Ze verdwijnen als bijlage aan hemoglobine zuurstof. Het kan worden aangenomen, dat vervanging van glutaminezuur op de zesde positie valine leidt tot meer communicatie met één molecule van hemoglobine in andere gevallen, wanneer hemoglobinemolecule niet bevestigd zuurstof. Dit geeft een lage oplosbaarheid van het molecule. De aanwezigheid van hemoglobine in rode bloedcellen C, D_Panjab, O_Arabisch verhoogt de camber fenomeen, dat de aanwezigheid van hemoglobine F in een grote hoeveelheid de mate van sikkelcel vermindert.

Гомозиготная форма гемоглобинопатии S (drepanocytemia)

Klinisch wordt gekenmerkt door een gematigde normochromic bloedarmoede, trombose, een eigenaardig soort patiënten. De eerste symptomen van de ziekte pas enkele maanden na de geboorte, omdat foetale hemoglobine, dat is de belangrijkste geboorte, Het bevat geen pathologische β-keten en gebroken. Behalve, hoge foetale hemoglobine bij jonge kinderen na het begin van pathologische circuit vermindert het verschijnsel camber door de verhoogde affiniteit voor zuurstof.

De meest voorkomende symptoom van sikkelcelziekte in de vroege kindertijd is de nederlaag van de botten en gewrichten.

In verband met pulmonale vasculaire trombose wordt vaak waargenomen bij kinderen longinfarct. Het ontwikkelen van deze werkwijze kan gepaard gaan met een verhoging van de lichaamstemperatuur hoge aantallen, toename van het aantal witte bloedcellen. Misschien is de ontwikkeling van renale infarct.

Soms tijdens verergering van het proces in de gewrichten of in de longen bij kinderen ontwikkelen ernstige hemolytische crisis met symptomen van intravasculaire hemolyse met zwarte urine, met een scherpe daling van het hemoglobinegehalte, hoge koorts. Op oudere leeftijd, zijn deze verschijnselen vaak vergezeld door een scherpe pijn in de buik, trombotische complicaties geassocieerd met de ziekte.

Glasvochtbloeding en netvliesloslating blindheid veroorzaken vaak.

De nederlaag van het zenuwstelsel kan ook het gevolg zijn van trombose, leveren verschillende hersengebieden.

In de vroege kinderjaren de milt is vergroot, verder wordt verkleind, en daarna 5 jaar splenomegalie is zeldzaam. Dit komt door de kenmerkende symptoom van sikkelcelanemie - autosplenektomiey, als gevolg van fibrose van de milt als gevolg van hartaanvallen vaak optreden. De lever is vaak vergroot.

Bij volwassenen,, lijden aan sikkelcelanemie, soms waargenomen priapisme, verwant, hoogstwaarschijnlijk, de stagnatie van sikkelcelziekte in de holle lichamen, wat, op zijn beurt, hypoxie en verhoogt de vorming van sikkelcel.

Wanneer een bloedonderzoek openbaarde mild uitgedrukt normohromnaya bloedarmoede: hemoglobine 3,72-4,96 mmol / l (60- 80 g / l). De gekleurde uitstrijkjes kan soms worden geïdentificeerd sikkel erytrocyten, maar gekenmerkt door een basofiele erytrocyten punktatsii, mišenevidnosti. Camber kan worden gedetecteerd door testen met natriummetabisulfiet, of door een tourniquet aan de basis van de vinger.

Het gehalte aan reticulocyten, erythrokaryocytes aantal beenmerg en verhoogde het niveau van indirecte bilirubine, ESR is meestal in het normale bereik, als de sikkel erytrocyten vestigen langzaam, dan normaal.

Er kunnen crises beslaglegging, waarbij een aanzienlijk deel van de rode bloedcellen verdwijnen in de inwendige organen. Dit kan leiden tot bezwijken, voor de terugtrekking van dat vereist een snelle bloedtransfusie.

Beschreven aplastische crises, waaronder ontwikkelde ernstige anemie, leukopenie, reticulocyten verdwijnen. Meestal komen ze na ernstige virale infecties.

De meeste patiënten met sikkelcelanemie overlijden in de vroege jeugd. Een zeer hoge sterfte onder zwangere vrouwen, lijden aan sikkelcelanemie. Volgens sommige rapporten, Moedersterfte in sikkelcelziekte aplasie is 6 %.

Гетерозиготная форма гемоглобинопатии S (sikkelcelanemie abnormaliteit)

In deze vorm van hemoglobine aandoeningen, patiënten soms bewust van hun ziekte, hemoglobine hebben een normale, goede staat. Het enige symptoom van de ziekte bij sommige patiënten is hematuria, geassocieerd met kleine renale vasculaire infarcten. De inhoud van het abnormale hemoglobine in rode bloedcellen van patiënten met heterozygote vorm van hemoglobine aandoeningen gering, De klinische manifestaties van de ziekte alleen waargenomen tijdens hypoxie, bij ernstige longontsteking, tijdens anesthesie, Wanneer u vliegen op een vliegtuig drukloos.

Trombotische manifestaties kan optreden in elk orgaan, schade bij sikkelcelanemie optreedt. Het fenomeen van camber aangetroffen bij patiënten die monsters metabisulfatnoy. Hemoglobine elektroforese onthulde twee grote fracties - hemoglobine en hemoglobine S.

De combinatie van heterozygote hemoglobinopathieën vormen S (sikkelcelziekte) с b-талассемией.

Veelvuldig, Het is aanzienlijk zachter, dan homozygote β-thalassemie en hemoglobinopathieën homozygote S.

Gekenmerkt door een aanzienlijke toename van de milt, uitgedrukt hypochromia erytrocyten, een hoge mishenevidnosti. Trombotische complicaties zijn veel zeldzamer, dan bij sikkelcelziekte. Misschien valt JavaScript gewrichtspijn, maag. Er is een achterstand in lichamelijke ontwikkeling. Gekenmerkt door een aanzienlijke toename in het niveau van foetaalhemoglobine. Indien geen hemoglobine elektroforese A, en hemoglobine S kan bijna de enige hemoglobine. При β-талассемии кроме Hb S, EEN₂ en foetale hemoglobine A afgeplakte.

Bij een hoog gehalte aan hemoglobine F fenomeen camber uitgedrukt mild.

Bloedarmoede, geconditioneerd vervoer stabiele abnormale hemoglobins

De meest voorkomende vormen van bloedarmoede zijn hemoglobine aandoeningen zoals C, D_Panjab en E.

Al deze vormen van hemoglobinopathieën heterozygote en combinaties met elkaar of met thalassemie klinische verschijnselen niet geven. In homozygote hemoglobine aandoeningen met detecteerbare uitgedrukt milde hemolytische anemie met uitbreiding van de milt en dyspepsie. Het uitstrijkje van de rode bloedcellen worden gedetecteerd mishenevidnye. При гемоглобинопатии D_Panjab zich in de homozygote toestand is uiterst zeldzaam, hemoglobinopathieën en E zijn gevonden in de homozygote toestand uitgedrukt milde hemolytische anemie, Een geringe vergroting van de milt. De combinatie van alle drie soorten hemoglobine aandoeningen thalassemie leidt tot een veel ernstiger ziektebeeld en een duidelijke toename in de milt.

Alle drie species worden gekenmerkt door substitutie in de hemoglobine β-chain. In gemoglobine C6 is een eenheid glutaminovoy kislotы lysine vervangen, gemoglobine in E-26 is een eenheid glutaminovoy kislotы - lysine, в гемоглобине D_Panjab 121-Unit is glutaminovoy kislotы - glutamine.

Mobiliteit hemoglobine D_Panjab Het correspondeert met de mobiliteit van hemoglobine S, maar in tegenstelling hemoglobinopathieën S hemoglobinopathieën D_Panjab Het is de normale test op oplosbaarheid en sikkel. Mobiliteit is dezelfde hemoglobine E, alsmede de beweeglijkheid van hemoglobine A₂, maar de hoeveelheid hemoglobine A₂ nog nooit zo, E zoals in hemoglobinopathieën.

De ziekte komt voor in West Afrika, Turkije, Iran, Indië (Punjab).

Hemoglobinopathieën E is te vinden in India, Cambodja, Birme, Indonesië.

Bloedarmoede, veroorzaakt door abnormale hemoglobine wagen onstabiel

Onder onstabiele hemoglobine begrijpen dergelijke abnormale hemoglobins, dat als gevolg van de instabiliteit van de moleculen precipiteren in erytrocyten, dat leidt tot de ontwikkeling van hemolytische anemie bij heterozygote dragers van het afwijkend gen.

Etiologie en pathogenese

IN 1952 g. Cathie beschreven een kind met congenitale hemolytische anemie, die na splenectomie in alle rode bloedcellen gedetecteerd kalf Heinz. Pas later, 18 jaren is gevonden, dat de oorzaak van deze cellen abnormaal was hemoglobinefractie. Aanvankelijk deze groep ziekten genoemd congenitale hemolytische anemie met Heinz kalveren.

Eerst onstabiele hemoglobine structuur geïnstalleerd Hb_zurich, gevonden in 1962 g. twee patiënten, na acute hemolytische crisis na het nemen van sulfa drugs.

Studie gevonden, het gedeelte van het hemoglobine bij patiënten met kalveren Heinz gemakkelijk precipiteren een lichte verwarming. IN 1969 g. werd voorgesteld een nieuwe naam voor deze groep van ziekten - hemolytische anemie, geconditioneerd vervoer onstabiele hemoglobins.

Deze vorm van bloedarmoede worden overgenomen in dominante wijze. De instabiliteit van het hemoglobine molecuul in gevallen, Wanneer aminozuursubstituties verwijzen naar communicatie met heem globine, een связи- en β-globine aaneensluiten, en wanneer er een substitutie van aminozuren, aangaan van een spiraal van hemoglobine, aminozuur proline, dat vanwege de bijzondere structuur kan niet in een spiraal.

Instabiliteit van Hb molecuul wordt aangetroffen in gevallen, wanneer het globine gedeelte van het molecuul, dat grenst aan het heem, de zogenaamde heem pocket, polaire aminozuur (glycine, valine, alanine en dergelijke.) wordt vervangen door de polaire (glutaminezuur, asparaginezuur en andere.). In dit geval is de heemzak penetreert het watermolecuul, schenden de stabiliteit van het hemoglobine molecuul.

Instabiliteit Hemoglobine Het kan ook worden veroorzaakt door een deletie van één of meer aminozuren of rek subeenheid. Dit leidt tot vervorming van het hemoglobine molecuul en verstoringen van de stabiliteit. Dientengevolge, in sommige vormen van hemoglobinopathieën in erytrocyten lijken meervoudige inclusie lichaampjes, vanwege precipitatie van onstabiele hemoglobine. In andere gevallen worden de rode bloedcellen gevonden in geïsoleerde kalf Heinz, wat neerkomt op een hemoglobine, zonder heem, of neerslag geïsoleerde globineketens.

Klinische manifestaties

Klinische symptomen van anemie zijn gevarieerd en afhankelijk van de locatie van de aminozuursubstitutie.

Sommige patiënten met normale hemoglobine, in andere gevallen wordt verminderd tot 2,48-3,72 mmol / l (40-60 G / l). In het geval van ernstige ziekte of een gemiddelde ernst van hemolytische anemie klinische uitingen waargenomen bij kinderen. De mate van geelzucht, alsmede de mate van anemie, Het hangt af van de aard van het aminozuur substitutie en verschilt: bij sommige patiënten met huidskleur en normaal sclera, in anderen is het een constante of intermitterende ernstige geelheid. De milt is vergroot meeste patiënten, Sommige vormen van hemoglobinopathieën normaal blijft. Misschien een toename lever. Deze bloedarmoede wordt vaak bemoeilijkt door cholelithiasis. Veranderingen in het skelet kunnen dezelfde zijn, zoals in microspherocytosis, in milde vormen van bloedarmoede afwezig.

Laboratoriumbevindingen

Bij dragers van instabiele hemoglobinen geopenbaarde anemie van verschillende ernst, vaak normochromic, soms hypochrome, door het verlies van een deel van hemoglobine geprecipiteerd, vooral in die gevallen, wanneer het heem wordt afgesplitst van globine of wanneer het precipitaat bestaat uit ketens. Mishenevidnost rode bloedcellen worden gevonden, anisocytose, polihromaziya. De inhoud van de reticulocyten altijd verhoogd. Er irritatie rode groei beenmerg.

Het beeld van het bloed en de klinische manifestaties van hemoglobinopathieën Het hangt alleen af ​​van de aard van de aminozuursubstitutie. Hetzelfde patiënten met hemoglobinopathies, geen familielid - dragers van abnormale hemoglobine geeft hetzelfde klinische manifestaties. Dus, hemoglobinopathies bij Biba, Savannah, Casper, Volga waargenomen kliniek ernstige hemolytische anemie, при гемоглобинопатиях Tacoma, Belfast, Casper, Moskou hebben een minimale klinische manifestaties. Wanneer een deel van hemoglobinopathieën verandert affiniteit voor zuurstof.

Meest gemoglbinopaty met verhoogde affiniteit van hemoglobine voor zuurstof wordt gekenmerkt door aminozuursubstitutie in het contact tussen de α- en β-ketens (een₁b₂-contacten). Verhoogde affiniteit voor zuurstof kan ook het gevolg zijn substituties in aminozuren, met betrekking tot de binding van 2,3-diphosphoglycerate - stof, noodzakelijk voor een normale hemoglobine keert zuurstof naar de weefsels. Wanneer hemoglobinopathieën, geassocieerd met een verhoogde affiniteit voor zuurstof, vanwege weefselhypoxie kunnen optreden polycythemia, in plaats van bloedarmoede. Waarin, wanneer de zuurstofaffiniteit verlaagd, Bloedarmoede kan optreden, niet door toegenomen hemolyse, en hyperoxia. In deze gevallen is het niet de aard van hemolytische, en het wordt geassocieerd met verlaagde erythropoietine.

Diagnose hemoglobinopathieën

Diagnose hemoglobinopathieën, veroorzaakt door abnormale wagen onstabiel globins, Op basis van de, die bij blootstelling aan verschillende oxidatiemiddelen erytrocyten, bijvoorbeeld een heldere blauwe cresyl, Enige vorm onstabiele hemoglobine waren gedenatureerd en neergeslagen in de vorm van kleine insluitsels van multiple.

Hetzelfde insluitsels in de hemoglobinopathieën H, OOK, Moskou. Deze kleuring wordt vaak gebruikt om de reticulocyten bepalen. Voor een duidelijke identificatie van insluitsels vereiste incubatietijd meer 2 Nee.

Een aantal patiënten in de kleur van het oxiderende, en niet-oxiderende kleurstoffen (bv, Crystal violet) in erytrocyten bleek enkele grote bull Heinz, excentrisch geregeld. Hij wordt meestal gezien bij patiënten, onderging splenectomie.

De onderzoeksmethode thermolabiliteit hemoglobine Hij is in het, die onder omstandigheden van verwarmen tot 55 ° С при pH 7,4 in 0,15 M fosfaatbuffer normaal door middel van 1 h precipitaten een gemiddelde van ongeveer 13 % Hemoglobine, in aanwezigheid van een onstabiele hemoglobine - more 25 %.

Snelle identificatiemethode van onstabiele hemoglobine, Het is als volgt. Geplaatst in het bloed hemolysaat 17 % isopropyl alcohol oplossing in Tris buffer en geïncubeerd bij een temperatuur 37 ° C. In aanwezigheid van een onstabiele hemoglobine precipiteert binnen 5-15 minuten, terwijl hij normaal verschijnt alleen in 30-40 minuten.

Reagentia: 17% oplossing van isopreen- Pilov alcohol in 0,1 M buffer, Tris Solyanaya Chisloth (pH 7,4). De oplossing kan worden opgeslagen voor een langere tijd in een afgesloten pot.

Methode. Gemolizat, die ongeveer 6,21 mmol / l (100 g / l) Hemoglobine, bereid uit driemaal gewassen met fysiologische zoutoplossing aangevuld met 1-1,5 erythrocyten met gedestilleerd water. Rode bloedcellen hemolytische schudden, Lipiden worden geëxtraheerd met een half volume van tetrachloorkoolstof onder schudden 2 m. Na centrifugatie 10 minuten bij 3000 omw / min voor de bovenlaag wordt gescheiden studie.

De oplossing werd in isopropylalcohol gegoten 2 ml 2 buizen, Gesloten stekkers. De buizen worden verwarmd tot een temperatuur 37 ° C waterbad. In één van de buizen wordt gegoten 0,2 ml hemolysaat, verkregen van erytrocyten patiënt, in andere - 0,2 ml hemolysaat, verkregen van donor erytrocyten. In aanwezigheid van een onstabiele hemoglobine precipiteert binnen 5-15 minuten. Er kunnen valse positieven. Als onjuist, hogere concentratie van alcohol, hogere temperatuur verwarmingsbuizen, meer zure pH normale hemoglobine kan eerder neerslaan 30 m. Bij hoge concentraties van methemoglobine sediment kan optreden als gevolg van de lagere weerstand vergeleken met methemoglobin oxyhemoglobine.

Om de stabiliteit van hemoglobine onderzoeken door deze methode mag alleen worden gebruikt verse hemolysaat. Er moet rekening worden gehouden, dat het hemoglobinegehalte dicht bij moeten zijn 100 g / l.

Momenteel wordt de detectie verwerkend onstabiele hemoglobine β-mercuribenzoate of β-chloormercuribenzoaat, gevolgd door elektroforese in zetmeelgel.

IN 1981 g. als een snelle werkwijze voorgesteld een nieuwe methode voor de bepaling van onstabiele hemoglobine, Gebaseerd op, In de aanwezigheid van lage concentraties van zinkzouten onstabiele hemoglobine wordt neergeslagen bij een temperatuur 37 ° C over 15 min tegenstelling tot normale hemoglobine. Dus in een hoeveelheid hemolysaat 0,2 ml (6,21 mmol / l, of 100 g / L hemoglobine) werd toegevoegd aan een oplossing van, bestaande uit 0,35 ml 0,003 M oplossing van zinkacetaat en 1,45 ml 0,1 M tris-buffer met een pH 7,4. Na mengen werd de buis in een oven bij 30 minuten bij 37 ° C. In aanwezigheid van een onstabiele hemoglobine verschijnt onmiddellijk precipiteren, dat vestigt zich over 30 m.

In sommige hemoglobinopathieën na preïncubatie bloed voor 1-2 dagen, en soms vers bloed methemoglobin inhoud verhoogd.

Door elektroforetische mobiliteit (in een studie op papier of celluloseacetaat) Hemoglobine A verschilt van de één-derde van bekende instabiele hemoglobinen. In sommige gevallen kunnen mutaties in de elektroforetische mobiliteit van het zetmeel gel of polakrilamidnom identificeren. Een studie van de primaire structuur van onstabiele hemoglobine nauwkeurig in te stellen van het type.