Diagnosis kemandulan immunologikal disebabkan

Dalam kehidupan yang panjang berkahwin tanpa menggunakan pil, dan di hadapan mikro rantau membran mukus dalam organ-organ kemaluan boleh berlaku secara beransur-ansur spot antigen imunisasi spermatozoa. Pemeriksaan fizikal pasangan suami isteri, yang terdiri dalam perkahwinan mandul, tidak boleh menentukan punca ketidaksuburan dalam 10-15 % kes-kes. Ia tergolong dalam kumpulan ini pasangan tidak subur apabila memohon kaedah khas siasatan terusan serviks rahsia, plasma air mani dan sperma serum antibodi sering dikesan (ASAT), Menggunakan ujian kualitatif dan kuantitatif penyelidikan imunologi.

Ujian Postkoytalnыy (FCT)

Ujian Postkoytalnыy (FCT) Ia merujuk kepada immunoassay kualitatif. Satu keputusan ujian negatif menunjukkan ketiadaan sperma dalam rahsia saluran serviks, tetapi anda tidak dapat mengenal pasti punca ketiadaan mereka.

Kaedah. Dengan jumlah sperma yg dpt mengubah secara rahsia saluran serviks, diperolehi selepas jimak, mewujudkan tahap pelanggaran keupayaan menembusi mereka dengan kemandulan atau kekebalan kepada mereka lendir dari saluran serviks.

FCT adalah perlu untuk menjalankan syarat-syarat berikut: Kajian ini perlu dijalankan dalam tempoh ovulasi, yang mendedahkan colpocytologic atau kaedah lain, selepas pasangan pantang sebelum dalam masa 2-3 hari.

Metodologi. Selepas jimak yang biasa bagi seorang wanita 30 minit berdusta di belakangnya, membengkokkan lutut anda. Douching dan pembersihan yang dilarang, hanya perlu tuala wanita, yang dikeluarkan semasa menangkap untuk kajian lendir saluran serviks. Selepas 2-4 jam, dibenarkan dan selepas 6-10 jam (masa, berlalu sebelum kajian, dinyatakan dalam analisis) selepas hubungan serviks terdedah menggunakan cermin Cuzco dan lendir endoservikal beraspirasi atau picagari tuberculin (tanpa jarum), pipet dengan mentol getah, atau polietilena kateter.

Apabila mencuci cara itu tidak boleh digunakan disinfektan, kerana mereka menjejaskan pergerakan sperma. Satu penurunan lendir yang terhasil daripada saluran serviks dipindahkan kepada slaid kaca dihangatkan, coverslip bersalut, Wilayah dilincirkan dengan parafin cecair bocor. Formulasi segera mikroskopiruyut (kanta mata 7X, Objektif 40X), menentukan bilangan dan jenis pergerakan sperma. Dadah ini boleh dikesan dengan motilitas sperma aktif progresif, gerakan berayun (fenomena swing) dan menetapkan.

Diterima menyediakan lima jenis kesimpulan FCT.

• Cemerlang (norma-norma): dalam lima bidang pandangan sehingga 15-20 dengan pergerakan progresif sperma aktif dan lebih. Sperma dengan fenomena ayunan adalah kurang daripada 25 %.
• Memuaskan: dalam lima bidang pandangan yang up 10 pergerakan progresif sperma aktif dan kurang 25 % sperma dengan fenomena swing.
• Miskin: kurang 5 spermatozoa dalam lima bidang pandangan.
• Minus: ketiadaan sperma.
• Ragu: dalam lima bidang lihat lagi 5 sperma aktif-mobil dan banyak lagi 25 % fenomena swing.

Apabila jenis kelima FCT sering diperhatikan ketidakserasian imun antara pasangan, oleh itu perlu untuk menentukan ACAT yang. Untuk mengenal pasti ACAT endoservikal rahsia, skrin plasma, air mani atau serum darah dan memaparkannya (aglutinasi atau bergerak) Ia memerlukan pelantikan immunoassays kuantitatif.

A PBC negatif pengajian bermula dengan definisi menembusi (penembusan) keupayaan sperma melalui ujian penembusan (Jumaat) dan kecenderungan rembesan sperma dari saluran serviks menggunakan kenalan ujian sperma dan mukus serviks (TKSTSS).

Ujian Penetracionnyj (TP)

Panjang kapilari nipis 10 Lihat ditaip semasa lendir ovulasi saluran serviks. Satu hujung terbuka kapilari menutup tanah liat, dan kedua itu diletakkan di dalam tabung uji dengan ujian mani segar (max 3 jam selepas ejakulasi). Dengan tanah liat dalam kapilari dilampirkan kepada tiub tegak. Sampel dieram dalam termostat pada suhu yang 37 ° C. 1 tidak. Kepada kualiti mani dinilai oleh kedalaman penembusan sperma dalam lendir dari saluran serviks. Terdapat tiga jenis GHG.

• Afirmatif - Kedalaman penembusan (jarak yang paling besar dalam sentimeter, mengembara di sperma kurangnya) lebih 5 melihat; bilangan sperma di sudut penembusan maksimum lebih 5 di hadapan, dan bilangan spermatozoa mobil di ketiga atas kapilari adalah lebih besar daripada 50 %.
• Ragu - A kedalaman penembusan sehingga 5 Lihat jumlah sperma kurang 5, mobiliti mereka dalam ketiga atas muara kapilari 50%.
• Minus - Kedalaman penembusan sampai sperma 1 melihat.

Keupayaan sperma untuk penembusan Ia bergantung kepada fasa kitaran haid. Dia mula muncul dari hari ke-9 kitaran haid,, secara beransur-ansur mengaktifkan, mencapai ungkapan maksimum dalam tempoh ovulasi, diadakan di peringkat ini selama dua hari, dan kemudian beransur-ansur berkurangan.

Air mani hubungan ujian dan lendir serviks (TKSTSS)

Pada slaid diletakkan penurunan kecil lendir dari saluran serviks, diambil dari wanita di waktu ovulasi, dan beberapa penurunan saiz yang sama pancut. Kedua-dua titik dilindungi dengan kaca penutup, yang sedikit ditekan ke bawah untuk, bersatu dengan penurunan. Dadah ini diletakkan di dalam kebuk lembap (Petri hidangan dengan kapas lembap swab) dan dieram dalam termostat pada suhu yang 37 ° C. 1 tidak.

Dalam keadaan ini, sperma normal menembusi rahsia terusan serviks biasa, seperti yang dapat dilihat di bawah mikroskop di 200X pembesaran. Untuk mengambil kira tindak balas berhampiran sempadan antara dua media mengira jumlah menembusi rahsia sperma saluran serviks dalam dua bidang bersebelahan pandangan.

Dengan TKSTSS cemerlang dalam dua bidang pandangan mendedahkan lebih 25 sperma aktif yg dpt mengubah fenomena swing kurang 25 %. Jika TKSTSS memuaskan dalam dua bidang pandangan mendedahkan lebih 15 sperma aktif mobil, TKSTSS dalam rendah - kurang daripada 15. A negatif TKSTSS penembusan hadir, jika dipersoalkan - satu fenomena ayunan melebihi 25 %.

Dalam ujian ini, seperti dalam PCT, fenomena swing, melebihi 25 %, mungkin, Ia menunjukkan kehadiran ACAT dan memerlukan pelantikan immunoassays kuantitatif.

Menggunakan air mani dan cecair serviks saluran lelaki subur dan subur dalam pelbagai berjumlah menggunakan TKSTSS mengenalpasti suami subur.

• Contoh 1. Diambil saluran rahsia serviks di kalangan wanita pasangan subur dan kawalan mani lelaki sihat. Cemerlang TKSTSS menunjukkan keupayaan yang lemah penembusan sperma suaminya, dan yang mudah terjejas rembesan biasa saluran serviks.
• Contoh 2. Diambil rahsia penuh terusan pangkal rahim wanita itu sihat dan mani suaminya pasangan subur. TKSTSS Bad menunjukkan penembusan yang lemah sperma.
• Contoh 3. Diambil wanita endoservikal rahsia pasangan subur dan kawalan mani lelaki sihat. TKSTSS Bad menunjukkan rasa rendah diri terusan serviks rahsia, yang jelas tidak menembusi spermatozoa normal.

Ujian imunologi Kuantitatif

Mikroagglyutinatsionny ujian Friberg

Mikroagglyutinatsionny ujian Friberg (TF) cukup sensitif dan boleh didapati untuk makmal-makmal diagnostik klinikal. Menggunakan TF boleh menentukan kehadiran ACAT dan agglutination titer dalam pelbagai bahan (plasma mani, ekstrak lendir dari saluran serviks dan dalam serum kedua-dua pasangan).

Reagen:

1. Fosfat masin buffered (FSB) 0,01 М pH 7,2-7,4.

2. Minyak Vazelinovoe.

Peralatan: mikroskop, picagari tuberculin, mikroagglyutinatsionnye pipetter 1 ml, kapasiti pipet mikro 0,1 ml.

Kaedah. Ujian darah serum dilemahkan oleh pengeraman dalam inkubator pada 56 ° C. 30 m. Pancut, diperolehi dengan melancap, dengan serta-merta cair supaya FSB, kepekatan sperma adalah 40 juta. dalam 1 ml.

Oleh kerana bahan (plasma mani, mengeluarkan rahsia saluran serviks atau serum) sedang bersedia siri pencairan 1:4 kepada 1:128 menggunakan sebagai cecair untuk pencairan FSB. Dalam telaga dengan mikroagglyutinatsionnyh minyak kuat planchettes picagari tuberculin dengan jarum diperkenalkan (di bawah minyak vazelinovoe) Titik kecil setiap pencairan bahan ujian. Selepas setiap sampel dibasuh empat kali picagari. Dalam setiap pencairan ditambah kepada 5 drop kali lebih kecil daripada mani, dan oleh 4 jam pada suhu bilik dikesan agglutinates. Pembiakan lalu, di mana di bawah mikroskop di 100X pembesaran dikesan 3 agglutinate ditinjau dan lebih, agglutination titer sepadan ACAT.

Ujian Spermoimmobilizuyuschy Izodzhima (SIT).

Titer ACAT immobilizing serum, plasma atau air mani ekstrak terusan serviks rahsia ditetapkan dengan jumlah sperma yg dpt mengubah dengan kehadiran antigen (sperma).

Komponen.

1. Pancut, yang dihasilkan dan disediakan sama, untuk TF menggunakan FSB; motilitas melebihi 70 %.

2. Komplementsoderzhaschaya serum babi guinea.

3. Serum manusia Imun (ICHS), memberi di hadapan pelengkap melalui 1 h pengeraman boleh bergerak 90 % sperma.

4. Serum manusia biasa (NCHS), dilemahkan oleh pemanasan pada suhu yang 56 ° C. 30 m.

5. Ujian serum tidak aktif, plasma dan air mani mengekstrak terusan serviks rahsia.

Kaedah. Untuk menilai aktiviti pelengkap immobilizing tiub 1 diperkenalkan 0,5 ml isotonik larutan natrium klorida, untuk menentukan perubahan dalam pergerakan sperma tanpa ASAT tabung uji ke-2 - 0,5 ml NHS, kawalan boleh bergerak tiub ketiga - 0,5 ml ICHS dan untuk menentukan ACAT immobilizing tiub 4 - 0,5 ml serum, atau plasma mani, cabutan atau rembesan endoservikal.

Kemudian, setiap tiub diperkenalkan oleh 0,1 ml pelengkap. Perkara terakhir kepada semua tiub ditambah 0,05 penggantungan sperma ml dalam kepekatan yang 40 juta. dalam 1 ml. Tiub tripod telah diletakkan di dalam inkubator pada suhu yang 37 ° C 1 tidak. Tiub dikeluarkan dari ketuhar dan berhati-hati digoncang untuk mencerminkan sperma gumpalan diselesaikan.

Untuk menilai keputusan di bawah mikroskop pembesaran yang tinggi (400X) dikira peratusan sperma yg dpt mengubah dalam setitik tabung uji, disimpan di atas slaid kaca dan ditutup dengan penutup. Begitu juga, ia menetapkan peratusan sperma yg dpt mengubah dalam titisan tiub ujian dengan NHS dan ICHS. Hasil tindak balas kira oleh formula

SIT = K / A

di mana K - bilangan sperma yg dpt mengubah dalam kawalan dengan ICHS dan NHS;

Tentang - bilangan sperma mobil di dalam tabung uji (ujian serum, atau plasma mani, atau rahsia saluran serviks).

Dengan SIT purata<2 ujian adalah negatif (Bilangan sel-sel sperma yg dpt mengubah dalam kawalan dan dalam tiub ujian kira-kira yang sama), Jika indeks CTI>2 - Ujian ini adalah positif, t. ia adalah. dalam bahan (serum, plasma atau air mani mengekstrak terusan serviks rahsia) tidak boleh bergerak ACAT.

• Contoh 1. Kawalan tanah untuk ICHS - 10 % sperma yg dpt mengubah. Kawalan kedua dengan NHS - 80% sperma yg dpt mengubah. Kedua-dua kawalan bersama-sama - 90 % sperma yg dpt mengubah. Dalam tiub ujian - 80 % sperma yg dpt mengubah.

SIT = R / D = 90/80 = 1.1

Ujian ini adalah negatif, bergerak ACAT hadir.

• Contoh 2. Dalam tiub ujian - 40 % sperma yg dpt mengubah, Walau bagaimanapun, dalam kawalan, dalam Contoh 1.

KN = 90/40 = 2.2

Ujian positif. Terdapat antibodi bergerak (ASAT), di mana sperma motilitas dikurangkan dengan ketara.