Anemia, yang dikaitkan dengan kekurangan asid folik

Apa jua sebab folik anemia kekurangan asid mempunyai ciri-ciri penampilan dalam megaloblasts sum-sum tulang, kemusnahan intramedullary erythrokaryocytes, patsitopeniey, macrocytosis dan hyperchromia sel-sel darah merah dan kadang-kadang - gangguan mental.

Folievaya (pteroilglutaminovaya) asid (vitamin B₉) Ia terdiri daripada tiga komponen:

• cincin pteridine;
• P-aminobenzoic asid (bersama-sama membentuk asid pteroievuyu);
• asid glutamik.

Berat molekul asid folik - 441. Asid folik adalah aktif dalam bentuk derivatif asid tetrahydrofolic. Kandungan asid folik dalam bentuk yang berbeza di dalam tubuh manusia adalah kira-kira 5-10 mg. Stok melanggar masuk ke dalam badan boleh berkurang dengan peralihan 4 bulan.

Keperluan harian asid folik adalah 100-200 mikrogram, Kehamilan, anemia hemolitik, ia meningkatkan banyak kali.

Jumlah asid folik dalam diet dengan kuasa penuh 500-600 mikrogram per hari. Folat - folates yang terkandung dalam jumlah yang besar di dalam hati, yis, bayam, daging. A lebih 50 % asid folik, dalam makanan, Ia boleh musnah apabila dimasak.

Asid folik diserap di dalam usus kecil atas. Keupayaan usus untuk menyerap asid folik adalah lebih tinggi daripada keperluan hariannya.

Asid folik mengambil bahagian dalam sintesis pyrimidine dan purin asas, bersama-sama dengan methylcobalamin - sintesis uridinmonofosfata timidinm nofosfata. Enzim folat Lebih terlibat dalam beberapa tindak balas. Khususnya, tetrahydrofolate mengambil bahagian dalam sintesis asid glutamik histidine.

Etiologi dan patogenesis anemia semasa kekurangan asid folik

Kekurangan asid folik, serta defisit cobalamin, Ia membawa kepada pembangunan anemia megaloblastic.

Malabsorption folat diperhatikan pada individu, resection usus kecil, terutama jejunum, dan juga dalam jangka panjang mengambil anticonvulsants seperti diphenylhydantoin (difenina) dan phenobarbital (berongga). Pengambilan asid folik rosak apabila sprue dan penyakit seliak. Kekurangan asid folik, serta defisit cobalamin, diperhatikan pada sindrom gelung buta. Digambarkan kes yang jarang berlaku gangguan keturunan pengangkutan asid folik seluruh dinding usus dan ke dalam bendalir serebrospina. Penyerapan bahan-bahan lain tanpa mengalami.

Kekurangan asid folik pada bayi baru lahir diperhatikan dalam pra-matang, melanggar penyerapan usus, susu makan kambing, yang mengandungi sejumlah kecil asid folik.

A malabsorption ketara asid folik boleh berlaku pada pesakit, penagih alkohol.

Peningkatan penggunaan asid folik semasa mengandung Ia boleh membawa kepada kekurangan asid folik, Walau bagaimanapun, di negara-negara maju hari ini ia jarang berlaku. Kekurangan asid folik di kalangan wanita hamil didapati pada kuasa yang rendah, kehadiran anemia hemolitik, menggunakan sebelum mengandung sejumlah besar minuman beralkohol.

Manifestasi klinikal kekurangan folat

Kekurangan asid folik pada kanak-kanak dan wanita muda. Pada masa yang sama, pesakit mengadu kelemahan umum, pening. Tidak seperti kekurangan cobalamin lidah sakit jarang diperhatikan. Paresthesias, dan tanda-tanda funikular myelosis hilang. Sclera sering ikterichnost.

Berbeza dengan defisit kekurangan cobalamin asid folik adalah gistaminoupornaya jarang diperhatikan Akhil, gastratrophia, walaupun pengurangan rembesan gastrik sering.

Untuk kekurangan folat, serta kekurangan cobalamin, dicirikan oleh kemunculan dalam macrocytosis darah periferal, megalocitov dan megaloblasts, kehadiran anemia hyperchromic, mengurangkan bilangan reticulocytes, platelet dan leukopenia dengan peralihan neutrophilic di sebelah kiri dan kanan. Dalam sum-sum tulang - megaloblasts.

Perubahan dalam sistem saraf adalah berbeza daripada manifestasi di B₁₂-anemia kekurangan.

Membuktikan, bahawa orang dengan epilepsi, Kekurangan asid folik membawa kepada serangan yang kerap, ke tahap mereka lebih besar. Ini adalah penting kerana, bahawa mengambil anticonvulsants boleh menyebabkan malabsorption folat. Menurut kesusasteraan, pada individu dengan skizofrenia kekurangan asid folik membawa kepada semakin teruk penyakit, gejala yang lebih teruk dan rawatan kurang berkesan.

Diagnosis pembezaan kekurangan cobalamin dan asid folik

Untuk diagnosis pembezaan kekurangan cobalamin dan asid folik digunakan kaedah radioimunocerakinan untuk penentuan asid folik dalam serum dan terutamanya dalam eritrosit. Kandungan cobalamin ditentukan dengan kaedah mikrobiologi. Sebagai organisma ujian digunakan sebagai Streptococcus faecalis dan Lactobacillis casei. Biasanya, kandungan asid folik dalam julat serum darah, Menurut pengarang, menggunakan kaedah penyelidikan yang berbeza, daripada 3 kepada 25 ng / ml, dan eritrosit - dari 100 kepada 425 ng / ml.

Dalam kekurangan asid folik berkurangan apabila tahap serum, dan dalam eritrosit. Kandungan asid folik pada kekurangan kolabaminov dalam serum darah sering meningkat, dan eritrosit kadang-kadang boleh dikurangkan, walaupun penurunan, sebagai peraturan, yang kecil.

Untuk diagnosis kekurangan asid folik juga digunakan Kaedah beban histidine (15 g), kemudian menentukan kandungan asid dalam formiminglutaminovoy air kencing. Biasanya, sebahagian besar daripada bentuk asid glutamik histidine. Dengan pengeluaran air kencing 1-18 mg asid formiminglutaminovoy. Pada kekurangan asid folik untuk 8 jam selepas diperkenalkan ke dalam badan dikeluarkan dari air kencing 20 kepada 1500 mg asid formiminglutaminovoy. Sebilangan besar daripada asid formiminglutaminovoy dikumuhkan dalam air kencing selepas pentadbiran histidine dalam orang, dirawat dengan methotrexate. Pada kekurangan cobalamin, sirosis hati perkumuhan kencing asid meningkatkan formiminglutaminovoy, sedikit sebanyak, berbanding dengan defisit sebanyak asid folik. Tahap normal kencing methylmalonic meningkatkan kandungan asid formiminglutaminovoy asid histidine selepas menerima bukti kekurangan asid folik, bukannya cobalamin.

Ia membantu untuk membezakan kedua-dua negeri dan kajian radionuklid. Pada kekurangan cobalamin, yang berkaitan dengan pelanggaran rembesan faktor intrinsik, penyerapan terjejas cyanocobalamin dilabel, kekurangan asid folik, ia diserap dengan betul.

Pada kekurangan asid folik, diperkenalkan ke dalam badan yang membawa kepada kandungan yang lebih tinggi reticulocytes, manakala suntikan cyanocobalamin (derivatif) tidak berkesan. Folik Kekurangan asid methylcobalamin meningkatkan tahap reticulocytes.

Mendefinisikan neutrofil segmentasi indeks

Kira bilangan neutrofil, dengan 4 segmen dan lebih (dalam semua 200 sel). Tentukan peratus sel, dengan 5 segmen dan lebih berbanding dengan jumlah sel, dengan 4 segmen. Indeks ini ditentukan oleh formula:

IS =(KS (5 dan banyak lagi))/KS(4);

di mana IC - segmentasi indeks;

KS (5 dan banyak lagi) - Jumlah neutrofil bersegmen (daripada 200 sel), di mana bilangan segmen adalah sama dengan 5 atau lebih;

KS (4) - Jumlah neutrofil bersegmen, di mana bilangan segmen adalah sama dengan 4.

Biasanya, julat indeks ini 2,5 kepada 25 %. Di mana, apabila ia melebihi 30 % (ayunan 120%), Anda boleh bercakap tentang neutrofil hypersegmentation. Ia diperhatikan kekurangan asid folik, metilkoʙalamina, dan uremia.

Penentuan asid methylmalonic dalam air kencing dengan Giordio dan Plaud

Reagen.

1. Pertukaran ion resin Dowex-Zx4 (bentuk klorida, 200-400 Mesh). Resin telah dibasuh dengan lima jilid air suling 3 kali, telah digantung dalam dua jilid air suling dan disimpan di dalam hidangan yang gelap pada 4 ° C.

2. Satu penyelesaian para-nitroaniline 0,075 % disediakan dengan melarutkan 37,5 reagen mg 500 ml 0,2 M larutan asid hidroklorik. Simpan di dalam periuk yang gelap, Ia kekal stabil untuk beberapa bulan pada suhu bilik.

3.Buffer asetat (pH 4,3) dilakukan dengan 1 M natrium asetat dan 1 M larutan asid asetik.

4.Diazoreaktiv: 4 ml 0,5 % larutan natrium nitrat bercampur dengan 15 ml para-nitroaniline. Campuran telah diletakkan di dalam peti sejuk pada 4 ° C dan penyelesaian sejuk ditambah 4 ml 0,2 M natrium asetat. Stabil reagen pada suhu 4 ° C untuk satu hari.

5.Normal 0,05 M larutan asid methylmalonic: 295 asid methylmalonic mg larut dalam 50 ml air.

Kaedah

Air kencing dikumpulkan ke dalam botol kaca dan dibekukan sehingga kajian. Mengkaji bahagian pertuduhan air kencing (20- 25 ml), dicairkan, tsentrifugiruyut, dan supernatan telah dikumpulkan dengan menggunakan penyelesaian yang lemah natrium hidroksida atau asid hidroklorik untuk menyesuaikan pH 6,5.

Ruangan ketinggian kromatografi 20 cm dan diameter 1 cm telah dipenuhi dengan resin Dowex-Zx4. Lapisan resin perlu berada dalam 3 melihat. Dialirkan melalui resin 5 ml air kencing, dicuci dengan air suling (2 × 50 ml pada kadar tidak lebih daripada 15 ml 1 dengan). Asid Methylmalonic boleh eluted dari resin 20 ml 0,1 M larutan asid hidroklorik. Seterusnya 2 ml eluat telah bercampur dengan 3 ml 1 M buffer asetat pH 4,3 di dalam tabung uji dengan penyumbat kaca (15×2melihat). Untuk campuran ditambah 3 diazoreaktiva sejuk ml, mana pH dinaikkan kepada 4,0. Campuran ini dipanaskan dalam mandi air pada suhu yang 94 ° C. 3 min dan 2 ml 3 M larutan natrium hidroksida. Tiub itu kemudian dikeluarkan daripada mandi air, stoppered dan kandungan dikacau. Campuran telah disejukkan pada suhu bilik 10 min dan pada fotometriruyut 620 nm dalam cuvette sel panjang yang 1 melihat.

Sebagai kawalan, campuran, yang terdiri daripada 2 ml 0,1 M larutan asid hidroklorik, 3 ml dan diazoreaktiva 3 ml asetat penampan. Methylmalonic penyelesaian standard asid terdiri daripada komponen yang sama dan 0,02 ml 0,05 M larutan asid methylmalonic. Keserapan penyelesaian ini telah diukur di bawah keadaan yang sama.

Kandungan asid methylmalonic (mg) per unit isipadu air kencing (1 l) ditakrifkan oleh formula:

(E_Sampel-E_kawalan)/(E_standard-E_kawalan)** A((1000*T)/M)

di mana E - keserapan pelbagai sampel;

A - jumlah asid methylmalonic di dalam tabung uji standard, ml;

1000 - Jumlah air kencing, diambil untuk penyelidikan, ml;

T - jumlah asid hidroklorik, diambil untuk elution, ml;

M - bilangan eluat yang, diambil untuk penyelidikan, ml.

Dalam keadaan di atas, formula boleh dipermudahkan seperti berikut::

(E_Sampel-E_kawalan)/(E_standard-E_kawalan)*236

Di mana, apabila jumlah asid methylmalonic dalam air kencing adalah lebih besar daripada 300 mg / l, perlu dicampur semula dengan eluat buffer asetat dan diazoreaktivom, tetapi sebaliknya 2 ml eluat adalah suai manfaat untuk mengambil 4- 10 kali lebih rendah dan membawa jumlah kepada 2 ml 0,1 M larutan asid hidroklorik. Pengiraan perlu mengambil kira pencairan.

Biasanya sehari dengan pengeluaran air kencing 0,6-4,7 mg asid methylmalonic. Pada kekurangan perkumuhan harian cobalamin daripada sampai asid methylmalonic 294 mg. Biasanya, kakitangan 10 g valine tidak meningkatkan pelepasan asid methylmalonic, kekurangan cobalamin meningkatkan penyingkiran asid methylmalonic.

Penentuan asid methylmalonic dalam air kencing oleh Green

Reagen.

1. Eter.
2. Etanol.
3. Penyelesaian asid hidroklorik 0,1 M.
4. Ammonium sulfat.
5. Kuat deatsidit resin asas FF (200 mesh, bentuk klorida).
6. Satu penyelesaian natrium nitrat 0,5 % (berat / isipadu).
7. Satu penyelesaian para-nitroaniline (750 mg larut dalam 1 l 0,2 M larutan asid hidroklorik).
8. Natrium asetat 0,2 M.
9. Buffer asetat 1 M, pH 4,3: bercampur-campur 1 M larutan natrium asetat dan 1 M larutan asid asetik dalam nisbah 16,35:33,9.
10. Larutan akueus natrium hidroksida 3 M.

A. Penyelesaian standard asid methylmalonic: 100 mg larut dalam 100 ml air, disimpan dalam peti sejuk.

B. Bekerja asid methylmalonic standard: penyelesaian standard dicairkan dalam 20 masa 0,1 M larutan asid hidroklorik (1 mL standard dan 19 ml asid hidroklorik). Ini jumlah asid bersamaan methylmalonic 100 asid methylmalonic mg 1 keadaan ujian l air kencing.

Untuk penyediaan diazoreaktiva bercampur-campur 4 ml 0,5 % natrium nitrat dan 15 ml para-nitroaniline. Campuran telah diletakkan di dalam mandi ais dan menambah 4 ml 0,2 M natrium asetat.

Kaedah.

Air kencing dikumpul untuk satu hari, diukur isipadunya dan 10 ml podkislyayut 1 M asid sulfurik penyelesaian kepada pH 2,0 atau sedikit di bawah. Ammonium sulfat ditambah tepu. Campuran telah diletakkan di dalam corong memisahkan dan diekstrak tiga kali dengan eter dan etanol dalam nisbah 3:1. Untuk mengelakkan pembentukan campuran emulsi extractant digunakan melebihi.

Ekstrak ini telah diluluskan melalui ruangan kromatografi kecil (1 – 1,5 cm diameter), siap 5 resin ml. Ruangan ini telah dibasuh 50 ml air suling. Asid Methylmalonic eluted 0,1 M larutan asid hidroklorik. Selepas elution dipilih 2 ml eluat, W ditambah ml buffer asetat, dan 3 ml diazoreaktiva.

Selepas pencampuran, tiub itu diletakkan dalam mandi air pada suhu yang 95 ° C 3 m. Kemudian ditambah 2 ml 3 M natrium hidroksida dan sekali tiub tertutup penyumbat untuk mengurangkan hubungan dengan udara. Selepas penyejukan, penyerapan ini diukur pada panjang gelombang 620 mereka. Untuk kosong dan bukannya menggunakan eluat yang 2 ml 0,1 M larutan asid hidroklorik, dan untuk penyelesaian standard - 2 ml standard bekerja.