Nasledstvennaya gemoliticheskaya anēmija, sakarā ar darbības piruvāta kināzes deficīta sarkano asins šūnu

Nasledstvennaya gemoliticheskaya anēmija, Saistītie eritrocītu piruvāta kināzes deficīts - samērā reta hemolītisko anēmiju, kas ir mantotas autosomāli recesīvā veidā, Tas dod klīniskās izpausmes homozvgotes, ieņēmumi ar pazīmēm starpšūnu hemolysis, macrocytosis eritrocītu, zems kālija. Ir vairāk nekā 200 gadījumi homozigotas pārvadātājiem deficīts piruvatkinaznoy darbības.

Patoģenēze

Piruvāta kināze ir viens no fermentu, Noslēdzot glikolīzi. Šī saite glikolīzi un ATP veidojas nikotinamiddinukleotid. Pacientu ar deficītu piruvāta kināzes aktivitātes lielākā daļa tiek samazināta saturu sarkano asins šūnu šo divu metabolītu, Dažos gadījumos, saturs ATP ir normāli, bet traucēts stabilitāti ATP inkubācijas laikā. Normāls līmenis ATP atrodami nozīmīgu retikulocitoze. Tas ir saistīts ar to retikulocītu klātbūtni un iespēju mitohondriju ATF ne tikai caur glikolīzi, bet arī sakarā ar oksidatīvo fosforilēšanos.

Piruvāta kināzes deficīta sekas Tas ir arī uzkrāšanās produktu glikolīzi, veidojas iepriekšējos posmos - fosfofenolpiruvata, 3-phosphoglycerate, un jo īpaši 2,3-diphosphoglycerate. Saturs piruvatanlaktata samazinās eritrocītos.

ATP trūkums eritrocītu piruvāta kināzes deficītu Tas noved pie traucējumiem funkciju ATP-aznogo sūkņu sarkano asins šūnu un zaudējumu kālija jonu, kur koncentrācija nātrija jonu eritrocītu, kas nav palielinot. Tas rada samazināšanos saturu monovalentu jonu eritrocītu, dehidratācija no šūnas un tās saraušanās. Šo parādību sauc dessikotsitoz. Eritrocītos ūdens samazināšanās sarežģī procesu oksigenāciju un skābekļa atbrīvošanu ar hemoglobīna. Šajā sakarā, dažas kompensācijas loma ievērojamu uzkrāšanās eritrocītos 2,3-skābes difosfoglitserinovoy.

Hemoglobīns par skābekļa radniecība tiek samazināts par tās mijiedarbību ar 2,3-diphosphoglycerate. Tātad, pie lielākā koncentrācijā 2,3-diphosphoglycerate atgriežas skābekļa uz audiem ir atvieglota.

Klīniskās izpausmes darbības piruvāta kināzes deficīta

Klīniskās izpausmes deficīts piruvāta kināzes aktivitāte atkarīga no pakāpes hemolīzes. Dažos gadījumos, palielināts hemolīze izpaužas piedzimstot un pavada rašanos smagas hemolītisko krīzes, izraisot asins pārliešanas nepieciešamību, lai saglabātu hemoglobīna sub-normālā līmenī. Citos gadījumos, slimība var rasties gandrīz bez simptomiem ar pirmajām pazīmēm, palielinot hemolysis (subikterichnost sklēras un āda) vecumā no 17-30 gadiem.

Parasti; salīdzinot ar microspherocytosis, piruvāta kināzes deficīts ir smagāka.

Gandrīz visi pacienti ar taustāms liesa. Neliels pieaugums tās sniegušas dažos anomāliju heterozigotiem pārvadātājiem, lai gan tie ir anēmija, parasti, pazudis. Pacientu iespējams splenomegālija skaits. Ievērojams pieaugums aknās reti sastopami. Atsevišķiem pacientiem ar identificēti kāju čūlas.

Laboratorijas rādītāji darbības piruvāta kināzes deficīta

Vairums pacientu ar deficītu piruvāta kināzes aktivitāte vērojama mērena anēmija (4,34— 6,21 mmol / l, vai 70-100 g / l), Tomēr ar krīzes hemoglobīns laikā var samazināt līdz 3,1 3,72 mmol / l (50-60 G / l). Satura eritrotsitov- 2,5-3,0 T 1 l. Hemolītisko krīzi var izraisīt infekcijas. Ir menstruāciju laikā ir gadījumi, hemolīze pieaugums.

Sarkanās asins šūnas pacientiem ar piruvāta kināzes deficītu raksturīga macrocytosis ar normohromiey, Nedaudz anizocitozi un poikilocytosis. Tur bija godīgi polychromatophilia. Dažreiz atrastas mishenevidnye sarkano asins šūnu un sarkano asins šūnu ar robotu malām vai kā zīdkoks, bieži vien identificē bazofilā eritrocītu punktatsiya, Jolly asinsķermenīšiem. Dažiem pacientiem, kas perifērajās asinīs atklāja ievērojamu skaitu erythrokaryocytes, krīzes laikā, to var palielināt līdz 60-70 %. ESR, balto asins šūnu skaits, leukogram, trombocītu skaits normas robežās. Tāpat kā ar citām formām hemolītisko anēmiju, kaulu smadzenēs atklāja asu kairinājumu red dīgļu asinsradi.

Bilirubīna līmenis, parasti, palielināta sakarā ar netiešu.

Bezmaksas plazmas hemoglobīna normāls, bet tas var tikt samazināts līmenis haptoglobin. Hemosiderin urīnā ir klāt. Augļa hemoglobīna saturs un hemoglobīna₂ normas robežās.

Osmozes pretestība eritrocītu piruvāta kināzes deficīta vairumā gadījumu normālos, reizēm samazināt pēc dienu inkubācijas. Autogemoliz, parasti, modernizētas dažādās pakāpēs. Ir gadījumi, piruvāta kināzes deficīts ar normālu autogemolizom. Pirmajā ziņots par piruvāta kināzes deficīts ir reģistrēta II tipa autogemoliza, izlabo pievienot ATP, un nevis labojot vai nedaudz koriģēt pievienojot glikozes. Pēc tam, daudzi gadījumi ir aprakstīti ar enzīmu deficītu I tipa autogemoliza vai nē. Tāpēc nav ieteicams piemērot metodi autogemoliza par diferenciālo diagnozi hemolītiskiem anemias. Eritrocītu ar deficītu piruvāta kināzes aktivitātes mūžs vienmēr saīsināts.

Type mantojuma piruvāta kināzes aktivitāte autosomāli recesīvo. Heterozygotes praktiski veseli, Saskaņā ar dažādiem pētniekiem, smagums deficīta ir robežās no 50 līdz 70 % normas.

Diagnostikas aktivitāte piruvāta kināzes deficīta

Piruvāta kināzes deficīta eritrocītu diagnozi var sagaidīt piegādāt gadījumā hemolītisko anēmiju, plūst gadu gaitā ar pieaugumu liesas palielināšanos, trūkums perifēro asins uztriepes pazīmes microspherocytosis, elliptotsitoza un stomatotsitoza.

Kvalitatīvi testi, lai noteiktu darbību piruvāta kināzes. Šim nolūkam, metode tiek plaši izmantota dienasgaismas traipu, balstoties uz, ka, veicot reakcijas, kataliziruemoy piruvatkinazoy, nikotinamiddinukleotid oksidē un fluorescences pazūd.

No piruvāta kināzes veseliem indivīdiem aktivitāte bija robežās no 4,0 līdz 7,7 mmol (min / 1010 eritrocītu) vai 4,0 līdz 7,7 Jauda. Lielākā daļa no homozigotas pārvadātāju slimības aktivitātes no fermenta mazāk 1 Jauda. Tomēr var būt gadījumi, nelielu kritumu fermenta aktivitāte. Diagnoze reta hemolītisko anēmiju, ir ļoti grūti, un diagnozi var veikt tikai pētījumā enzīmu kinētikas.

Differential diagnoze hemolītisko anēmiju, saistīto deficītu piruvāta kināzes

Diferenciālis diagnozi hemolītisko anēmiju, saistīto deficītu piruvāta kināzes, nepieciešams veikt cita veida iedzimtu hemolītisko anēmiju.

Tā kā lielākā daļa pacientu netrūkst piruvāta kināzes aktivitātes atšķirībā privātpersonām, ciešanas microspherocytosis, elliptotsitozom, stomatocitozom, hemolītisko anēmiju, kondicionieri pārvadāšana nestabils hemoglobīna, un talasēmiju slimība ir iedzimta ar autosomāli recesīvā, ka šī patoloģija ir atrodama tikai vienā paaudzē, un gandrīz nekad nav redzējis vecāku.

Kad iedzimts anēmija, kondicionieri pārvadāšana nestabils hemoglobīna, īpaši smaga slimība, dažreiz proband ir pirmais nesējs mutācijas, un tad slimība tiek pārnesta uz nākamo paaudzi. Tāpēc, diferenciāldiagnozes jāveic ar hemoglobinopathies, kondicionieri pārvadāšana nestabils hemoglobīna, kā arī recesīvo iedzimta hemolītisko anēmiju, ko izraisa nepietiekama aktivitāte citu enzīmu.

Tai ir atbalsta loma hemoglobīna stabilitāti, Yego elektroforēzes. Lai izslēgtu citas fermentopathia izmeklēja aktivitāti citu enzīmu eritrocītu, un izslēgt autoimūnu hemolītisko anēmiju veikts Coombs, agregatgemagglyutinatsionnaya.

Fluorescent metode, lai noteiktu darbību, piruvatkiiazy Beitlers

Reaģenti.

1. Fosfoenolpirovinogradnaya acid (tritsiklogeksilammoniynaya sāls) 0,15 M šķīdums, neitralizēts pH 7,0-8,0 0,2 M šķīdums NaOH (0,03 ml).
2. ADF 0,03 M šķīdums, neitralizēts (0,1 ml).
3. NAD-N 0,015 M šķīdums, neitralizēts (0,1 ml).
4. Magnija sulfāts 0,08 M šķīdums (0,1 ml).
5. Fosfāta buferšķīdums kālija 0,25 M, pH 11 7,4 (0,05 ml).
6. Distillirovannaya ūdens (0,62 ml). Maisījums var uzglabāt - 20 ° C, ir ne vairāk kā nedēļu.

Metode.

Pētniecības lietošanai asinis, kopā ar heparīnu vai nātrija citrāts. Tā centrifugē, aspirēto un sagatavot plazmas 20 % apturēšana sarkano asins šūnu, pievienojot četras apjomi izotoniska nātrija hlorīda šķīduma.

Eritrocītu suspensija tādā daudzumā 0,02 ml, ir sajaukts ar 0,2 reaģenta ml un inkubē 30 minūtes 37 ° C. Pilienu tika likts uz filtrpapīra, un pārlūkojot fluoroscope. Baseline fluorescence tika atklāta tūlīt pēc tam eritrocītu uz maisījumu pirms inkubācijas. Parasti pēc 30 min inkubācijas tas pazūd, un aktivitāte piruvāta kināzes deficīta paliekas. Tas ir, NADH kas fluorescē ietekmē UV starojuma zonā, tuvu redzamas, savukārt NAD nav fluorescē. Tā kā iepriekš šķīdums ir nestabils un viegli noārdās, nepieciešama uzraudzība. Jums vajadzētu rūpīgi nošķirt slāni balto asins šūnu, jo darbība piruvāta kināzes deficītu eritrocītu fermentu aktivitāte leikocītos var būt normāls.