Mikroskopiskā pārbaude cerebrospinālajā šķidrumā

Noteikšana cytosis

Cerebrospinālajā šķidrumā veseliem cilvēkiem, kas ietverti ļoti maza šūnu skaitu. Klīniskā nozīme ir galvenokārt leikocītu (limfocīti). Lai saskaitītu leikocītu netraucē eritrocīti, Tie iznīcina tos, pievienojot neatšķaidītu cerebrospinālajā šķidrumā 1/10 daļas etiķskābes fuchsin. Magenta krāsas kodoli šūnas sarkans. Krāsošanai leikocītu izmantojot reaģentu Samson (sajaukts 30 ml ledus etiķskābe, 2 ml sašķidrinātās fenola, 2 ml šķīdums spirtovogo fuchsin 1 : 10 un dolivayut 100 ml destilēta ūdens). Reaģents izturīgs, labas traipu šūnas un dažu stundu laikā pasargā tos no citolīzei.

Tie var būt arī risinājums, kas ietver 5 ml 10 % etiķskābe 0,1 Mr. metilvioleta. Tas ir mazāk stabils, šūnas traipu zils.

Sakarā ar citolītisks īpašībām cerebrospinālā šķidruma, lai saskaitītu šūnu vajadzētu būt tūlīt pēc. Šķidrums tiek mērīta uz mēģenē vai mikropipete pilieni proporcionāli 10 daļas cerebrospinālajā šķidrumā un 1 Šķīduma krāsošana un atstāj uz 10-25 minūtēm iekrāsošanas šūnā. Vaislai var izmantot maisītāji leikocītu. Šūnas galvas un muguras smadzeņu šķidrums ļoti ātri pielipt sienām caurulēm, lai šķidrums, box in vitro, pirms pētījuma rūpīgi jāsamaisa rotācijas kustības starp plaukstām.

Lai aprēķinātu šūnu skaitu tiek izmantota Fuchs kameru Rozentalya. Skaitot produkciju visā tīklā caur 5 min pēc aizpildot kamera. Šūnu skaits 1 l aprēķina pēc formulas:

X =(A * 11)/(3.2*10)

kur X - šūnu skaits 1 l; A - šūnu skaits, skaitīti uz ekrāna virsmā; 3,2 - No kameras tilpums; 11/10 - Atšķaidīšanas.

Atļauts reģistrācija Rezultātu skaits kā frakcija, piemēram, 14/3, kur 14 - Elementu skaits saskaitīto kamerā, 3 - Noapaļošana kameras tilpums. Ar liels šūnu skaits ir pietiekams, lai saskaitīt tos vienā pusē tīklam, un iegūtais skaitlis dubultot. Ar izteiktu pleocytosis (ievērojams šūnu skaita palielināšanās) ļāva saskaitīt šūnas 16 Mazie laukumi un reizināt šo skaitli ar 16.

Ja nav no Fuchs-Rosenthal kamerā var izmantot Skaitīšanas kamera Goryaeva ar ievērojami mazāku jaudu, tāpēc tas ir nevis šūnu skaits ir mazāks par trim kvadrātu, aprēķināt vidējo aritmētisko un reizināt to 1,2. Modifikators 1,2 iegūst no formulas

X =(A * 11)/(0.9*10)

kur 0,9 ietilpības kamera, 11/10 - Atšķaidīšanas.

Kad skaitot šūnas cerebrospinālajā šķidrumā neatšķaidīta viens no pirmajiem pilieni, izriet no punkcijas adatas, ievieto Fuchs-Rosenthal un noteiktu skaitu, šūnu, kā norādīts iepriekš.

Parasti, šūnu skaits (limfocīti) uz 1 l cerebrospinālā šķidruma No sirds kambarus smadzeņu un smadzenīšu smadzeņu tvertnē ir 0-1, un šķidro, iegūst, jostas punkciju - 2-4.

Bērni, kas jaunāki par trim mēnešiem 1 l cerebrospinālā šķidruma tiek konstatēts 20-23 šūnām, līdz vienam gadam - 14-15, līdz diviem gadiem - 11-14, no diviem līdz pieciem gadiem - 10-12, no pieciem līdz septiņiem gadiem-8-10, septiņiem līdz desmit gadiem - 6-8, vairāk nekā desmit gadu - 4-5.

Kad meningīts, audzēji smadzeņu abscess un šūnu skaita cerebrospinālajā šķidrumā palielinās.

Pētījumā ar hemorāģisko cerebrospinālā šķidruma dažos gadījumos ir nepieciešams, lai noteiktu tās patieso cytosis. Šim nolūkam Friedman metode: hemorāģisko šķidrums iegūt reaģents Samson noteikt šūnu skaitu un izotonisku nātrija hlorīda skaitīšanai skaitu sarkano asins šūnu 1 l cerebrospinālā šķidruma.

Piemēram, šūnu skaits 1 l - 20, skaits, sarkano asins šūnu - 3600. Par sarkano asins šūnu un balto asins šūnu skaits, atzīst pacientam no vispārējās analīzes, veic pirms jostas punkciju. Piemēram, uz 1 ml asiņu 4 200 000 eritrocītu, 7000 leikocīti. Tātad viens ir leikocītu 4200000/7000 = 600 eritrocītus.

Lai iegūtu patieso vērtību cytosis vienādot:

uz 600 sarkanās asins šūnas - 1 leikocīts;

uz 3600 eritrocīti - X leikocīti, Tātad,

X = 3600/600 = 6 леикоцитов.

True galvas un muguras smadzeņu šķidruma cytosis 20-6 = 14 šūnas 1 l.

Šīs metodes pielietošana ir ierobežots, jo galvas un muguras smadzeņu šķidruma ar ievērojamu piejaukumu asinis nav piemērota šāda pētījuma.

Kvantitatīva eritrocītu cerebrospinālajā šķidrumā Tas ir iestatīts uz noteiktu smagumu pacienta stāvokļa pie intrakraniālas asiņošanu.

Klātbūtnē 1 l 2000-5000 eritrocīti galvas un muguras smadzeņu šķidruma tiek iekrāsota rozā krāsā, 900-1000 Eritrocīti - tikai nedaudz opalescējošs. Bezkrāsains šķidrums var noteikt ar zemu saturu eritrocītu. Klīniskā nozīme ir dinamikā līmeņa sarkano asins šūnu pieaugumu.

Šūnu diferenciācija cerebrospinālā šķidruma Tas notika skaitīšanas kamerā formā native un stained.

Pie lielā palielinājumā (10X vai 15X okulāra, 40X objektīvs) šajā skaitīšanas kamerā pievēršot uzmanību apjoma šūnu, forma, atrašanās vietu un lielumu kodolos, Klātbūtne ļāva citoplazmu. Tas ir viegli atšķirt limfocītu, neutrophilic granulocītu, makrofāgi. Parasti, muguras smadzeņu šķidrumā, kas satur tikai limfocīti.

Lai pilnībā raksturo šūnu sastāva muguras smadzeņu šķidrumā pētīta iekrāsotās preparāti. Šūnas tika iekrāso šķidrums sliktāk, nekā asins šūnu. Ir vairāki veidi, kā krāsošana: ar Rosina, Dauzīšanās, Papanicolaou, Alekseev, Var Gryunvalydu, Pappengeymw.

Nosakot raksturu metodi dienasgaismas mikroskopija pleocytosis

Nosmelt pārklājumu stikla plāksnītes un pilienu muguras smadzeņu šķidrumā sajauc to ar fluorhroma krāsu (maisījums ūdens sāls šķīdumu akridīnoranžo un Rhodamine audzēšanas 1:20000). Jauktais zāles ir jāizskata saskaņā ar fluorescences mikroskopa ML-2 ar zili violeta gaismu redzamajā spektrā, izmantojot kombinācijas ierosināšanas filtru: FS 1-4, FBS 14-4, BS 8-2 un bloķēšanas filtru LS-1 iegremdēšanas objektīvs. Kā neflyuorestsiruyuschego iegremdēšana eļļa, ko izmanto pētniecības dimetil (ortoftalskābes acid dimetil esteris).

Tumšā fona redzeslauku polynuclears limfocītu un viegli identificēt ar zaļu mirdzumu citoplazmu. Count rinda 100 šūna, ņemot skaits limfocītu un neitrofilu.

Limfocīti atšķiras no dabas neitrofīlo kodolā (glybchatoy struktūra ar oranžu ieslēgumi) un spilgti zaļa fluorescence.

Neutrophilic granulocītu ir skaidra struktūra, to kodoli hromatīna difūzi lit, vienota spilgti- zaļš. Citoplazmu ir dzeltens- zaļš, IT izkaisīti ķieģeļu sarkans granulas.

Nenozīmīgus gadījumus cytosis dzimtā galvas un muguras smadzeņu šķidruma centrifugē un nogulsnes pētījums.

Fluorescent mikroskopiskā izmeklēšana cerebrospinālā šķidruma padara to viegli secināt, ka neitrofīlo, limfoleikozes vai polymorphonuclear šūnu daba pleocytosis.

Morfoloģiskās īpašības šūnās cerebrospinālajā šķidrumā

Limfocīti

Cerebrospinālajā šķidrumā veseliem cilvēkiem konstatēts mazie un vidējie limfocītu (1-2 1 l) lielums 4-6 mikroni. Šī apaļas formas šūnas ar lielu kodolu un glybchatym ļoti šaurs citoplazmu.

Kad limfoīdo Pleocytosis (tuberkulozes meningīts, cisticerkoze) kopā ar mazajiem un vidējiem lieliem limfocītu parādīties (8-9 M), reizēm tas ir iespējams noteikt šūnas ar tiešo skaldīšana.

Par limfocītu skaits (kopā ar citiem šūnām) palielinājumi cerebrospinālajā šķidrumā smadzeņu audzēju, Hronisks meningīts laikā. Kad Neiroķirurģiskie slimības skaita pieaugums limfocītu pēcoperācijas periodā notiek pēc skaita palielināšanu, neitrofīlu un norāda labvēlīgu iznākumu.

Plazmas šūnas

Plazmas šūnas var konstatēt cerebrospinālajā šķidrumā tikai tad, kad strāva ilgi smadzeņu iekaisumu un smadzeņu plēves. Morfoloģija plazmas šūnas, piemēram,, asins vai kaulu smadzeņu punktveida.

Šī apaļas formas šūnas ar ekscentriski atrodas kodolā un intensīvi krāsainu, bazofylnoy citoplazma. Dažos gadījumos to skaits var sasniegt 26%. Ir plazmas šūnas pēcoperācijas periodā un ar lēnu gaitā reparative procesus smadzeņu traumu.

Gistiocitы

Ar normālu cerebrospinālajā šķidrumā dažreiz atrodami veidā vienu kopiju.

Iekrāsoto preparāti histiocytes ir liels kodols un salīdzinoši šaurs citoplazmu. Par šūnu daudzums 7 līdz 10 m, apaļas vai neregulāras formas. Par pupu kodols vai neregulāras formas asmens, normohromnaja. Nucleoli ir redzami dzimtā preparātu zem fāzu kontrasta mikroskopija.

Ja tuberkulozes meningīts cerebrospinālajā šķidrumā atklāja lielu skaitu histiocytes, attālināts un klasteri, s citoplazma bazofylnaya, intensīvāk krāsots.

Saskaņā ar pieejamajiem datiem, Daži glijas šūnu veidus var pārveidot histiocytes. Liels skaits histiocytes tiek konstatēts muguras smadzeņu šķidrumā pacientiem, tika veikta operācija uz smadzenēm vai mugurkaula (kas liecina par aktīvu audu reakciju un normālu brūču dzīšanu), un indivīdiem, cieš no tuberkulozes meningītu un cisticerkozes ar lēnu pašreizējā iekaisums. Kad smadzeņu audzēji ar iebrukumu fani subarachnoid telpu vai kambara sienas var parādīties histiocytes muguras smadzeņu šķidrumā kopā ar izmainītu šūnu un makrofāgos, kas ir raksturīgi rašanos ap audzēja reaktīvās zonā.

Makrofāgi

Makrofāgu veidojas no viena- endotēlija šūnas un multi-arahnoidālā mater un monocītu. Elementi endotēlija arahnoidālā mater ir atdalītas no syncytium un kļūt noapaļotas šūnas, kam amoeboid kustību un iekļūt cerebrospinālajā šķidrumā.

Makrofāgi aktīvi aprīt un sagremot šūnas un citus elementus, iekrist cerebrospinālajā šķidrumā patoloģiskiem procesiem, veicinot tās attīrīšanu. Ar citoplazmā makrofāgu ieslēgumi diferencēt viegli kamerā un krāso.

Makrofāgi phagocytose eritrocīti, iznīcinātas vai nemodificēta neutrophilic granulocītu, tauku pilienu, gematoidina kristāli, uc. Bieži citoplazmā par makrofāgu vacuoles dažāda lieluma ir pieejami, vai arī viena liela vakuola, kas aizņem lielāko daļu citoplazmu, bet galvenais ir nobīdīts uz perifēriju. Šādos gadījumos, šūna ir forma gredzena - cricoid makrofāgu.

Parasti makrofāgi uz muguras šķidruma prombūtnē. To izskats normālā šūnu skaitu norāda uz asiņošanas vai iekaisuma centrālās nervu sistēmas. Liels skaits makrofāgu cerebrospinālā šķidruma pēcoperācijas periodā norāda aktīvo sanāciju (pozitīva perspektīva). Neliels skaits makrofāgu vai to trūkums izsakot Pleocytosis - nelabvēlīgas prognostisks zīme.

Granulu bumbiņas – putu šūnas

Granulu bumbiņas (putu šūnas) Makrofāgi ir liels ar vairākām ieslēgumi tauku pilienu citoplazmu.

Šis ir visbiežāk šūnas noapaļota forma, magenta krāsot tumši brūnā krāsā. Ārstējot muguras šķidruma Sudāna III granulu bumbiņas krāsotas oranži-sarkans.

Konstatēti muguras smadzeņu šķidrumā, kad tas nonāk šķidrumu no cistas dažādu etioloģiju, samazinājuma smadzeņu audu (ar pilieniem tauku), dažreiz pēcoperācijas periodā, dažos smadzeņu audzēju (kraniofaringiome, ependymoma, un citi.). Ja audzējs atrodas netālu sirds kambarus, granulu lodītes bieži konstatē cerebrospinālajā šķidrumā no ventrikulu. Par granulu bumbiņas avots ir microglia, un oligodendrocytes, šūnas no ārējā apvalka kuģu un arahnoidālā.

Neutrophilic granulocītu

Neitrofilo granulocītu cerebrospinālajā šķidrumā līdzīgi asins neutrophilic granulopitami, s citoplazma (ar skaitīšanas kamerā un vietējiem preparātiem) bieži izstiepts vai ir izcilni (pseudopodia). Šo šūnu novērota pirmajās 10-15 minūtēs pēc portfeļa cerebrospinālajā šķidrumā un dažādība liecina saglabāšanu neutrophilic- spēja granulocītu, lai pārvietotos. Raksturīgs ir segmentēts kodols, daiviņu skaits, kurā svārstās no diviem līdz pieciem; stab neitrofilo granulocītu ir reti.

Uzglabājot cerebrospinālajā šķidrumā izmaiņām pirms neutrophilic granulocītu, nekā citām šūnām. Par neitrofīlo granulocītu kodoli Tos var šķīdināts vai segmenti ir noapaļoti, ar skaidrām kontūrām, savienots ar tievu tilta; vēlāk viņi izpausties individuāliem granulu. Microphage, kas tiek glabāti tikai viens kodols segments noapaļota forma, ko atgādina Loevit šūna. Tur pietūkušas neutrophilic granulocītu ar neskaidrām kontūrām segmentos, aizņem gandrīz visu citoplazmu. In iekrāso preparātiem var novērot visus posmus sabrukuma neutrophilic granulocītu - pietūkums kodols uz pilnīgu iznīcināšanu šūnu struktūru, kad kontūras nav redzamas citoplazma, un galvenie segmenti ir bezveidīgs, kas sastāv no mīkstas acs hromatīna. Dalība šajās šūnās neutrophilic granulocītu var noteikt tikai uz peroksidāzes: klātbūtne zaļu-dzeltenu vai brūnu granulas citoplazmā iznīcinātā.

Dažreiz, muguras smadzeņu šķidrumā notikt neutrophilic granulocītu ar piknotiskajiem kodolā kā neregulāras formas gabali hyperchromic.

Neitrofilo granulocītu parādās cerebrospinālajā šķidrumā ar asiņošanu šajā subarachnoid telpā, iekaisuma slimības nervu sistēmas, pēc neiroķirurģiskas operācijas. Klātbūtne neitrofilo granulocītu asinīs muguras smadzeņu šķidrumā norāda iekaisumu plēves.

Par neitrofilu nemainīsies pārsvars pierādījumi par akūtu iekaisumu.

Pēkšņs izskats neutrophilic pleocytosis novērots pārtraukumu abscess zem gļotādas smadzenēs.

Ja abscess, Atrodas dziļi smadzeņu audu, parasti novēro pauda vieglu pleocytosis ar pārsvars limfocītu.

Kad vājināšanās iekaisuma cerebrospinālajā šķidrumā parādās deģenerētā formas neutrophilic granulocītu.

Par modificētu un nemodificētu neitrofilu klātbūtne ir raksturīga notiekošo iekaisuma procesu. Jāņem vērā,, ka neutrophilic granulocītu parādās nemainīti cerebrospinālā šķidruma piejaukumu svaigas asinis, Šādos gadījumos, jums jādefinē koriģējošu cytosis.

Eozinofīlā granulocītu

Eozinofīla granulocītu dzimtā paraugos cerebrospinālajā šķidrumā no citām šūnām ir diferencētas, klātesot raksturīgu lielu spīdīgu smiltis, zapolnyayuschey citoplazma. Šūnas ar divu lāpstiņām kodolu reti, bieži novēro mononukleāro forma. Morfoloģija in iekrāso eozinofīlā granulocītu pašiem, asinīs. Cerebrospinālajā šķidrumā ir visbiežāk konstatēts iznīcinātas eozinofīlā granulocītu.

Saturs eozinofīla granulocītu uz muguras šķidrumā pie svārstās no cisticerkozes 1 līdz 46%.

Par meningīta kā komplikācija Arahnoidīts tsistitserkoznogo notikums pavada neutrophilic pleocytosis un samazināja skaitu eozinofīlā granulocītu. Par abstsedirovaniya ehinokoku burbuļa smadzenēs kas raksturojas ar tās satura neutrophilic granulocītu un eozinofīlā, kas kalpo kā papildu funkcija atšķirt to no abscess. Dažreiz liels skaits eozinofīla granulocītu var atrast saturu cistas audzēju galvas un muguras smadzenes (neurinoma, kraniofaringiome, ependymoma, vēža metastāzēm smadzenēs). Ievērojamais pieaugums skaita eozinofīla granulocītu muguras smadzeņu šķidrumā var novērot pēc kambara tsisternoskopii.

Pēc izņemšanas smadzeņu audzēju ar aktīvo brūču dzīšanu pēcoperācijas pieaugumu skaita eozinofīlā granulocītu, ko var uzskatīt par vietējo alerģisku reakciju uz traumu smadzeņu plēves un uzsūkšanos produktu audu sabrukšanas.

Par modificētas šūnas un ēnu šūnas

Pateicoties citolītisks īpašības cerebrospinālajā šķidrumā šūnu, ietverts to ilgu laiku, saglabā tikai par citoplazmā kontūras un kodolos atlieku. Noteikt to morfoloģiskās piederību nav iespējams. Vairumā gadījumu šīs pārmaiņas ir pakļauti neutrophilic granulocītu, dažreiz ļaundabīgs audzējs šūnas. Viegli iziet citolīzei arahnoidālā šūnas un ependymal kambarus.

Audu bazofilo ir atrodami muguras šķidrumā pēc neiroķirurģijā.

Šūnas arahnoidālā MATER cerebrospinālajā šķidrumā

Šūnas arahnoidālā mater (arahnoэndoteliya) - Vienu kārtu epitēlija šūnu, tās var diferencēt kā skaitīšanas kamerā šūnu skaita, un stained, pagatavoti no dūņu cerebrospinālajā šķidrumā. Šī salīdzinoši lielais neregulāras formas šūnas vai noapaļota ar salīdzinoši nelielu apaļu vai ovālu kodolu, centralizēti atrodas.

Šūnu kodoli krāso hipohromā, un citoplazmu - gaiši- vai pelēcīgi zila krāsa, Tādējādi tas ir bieži neregulārie kontūras un satur ieslēgumi daļiņu fagocitozei (tauku pilienu, šūnveida elementi, vakuoli). No šūnām arahnoidālā mater citoplazma bieži iznīcina, Šādos gadījumos ir konstatēti raksturīgo kodolā un citoplazmā lūžņi. Hromatīna ir melkopetlistuyu kodoli vai graudu struktūru, dažreiz daudz viens zils nucleolus. Par kodolos izmērs 5 līdz 19 m.

Ar muguras smadzeņu šķidrumā vienības šūnu arahnoidālā klātbūtne vēl nav pierādījumu par patoloģiju, kā šīs šūnas odere subarachnoid telpu un, pīlinga, nonākt cerebrospinālajā šķidrumā. Skaitu novēroto arahnoidālā arahnoidīta šūnu palielināšana, smadzeņu cisticerkoze. Saturs arahnoidālā cistas ir atrodami atsevišķās vietās arahnoidālā šūnu un symplasts kā grupu kodoliem dažāda lieluma un krāsu intensitāti, ieskauj gaiši citoplazmā bez skaidras robežas starp šūnām.

No dzīsleni pinumu šūnas

No dzīsleni pinumu no sirds kambarus mugurkaula šķidrumā var ievadīt daudzstūru, noapaļota, dažreiz liela cilindriska (15-19 M) šūna. Mazs (4-5 M) kodolus atrodas centrā vai ekscentriski, hyperchromatic, citoplazma эozynofylnaya, intensīvi krāsainu. Citoplazmā šūnās dzīsleni pinumu ir graudainību, dažreiz veidā ieslēgumu un clumps, izmērs 1-3 mikronu, apaļas vai neregulāras formas, zaļganā vai zilganā krāsā. Dažas šūnas var tikt konstatēta vai notverti ar sarkano asins šūnu vacuolar.

No dzīsleni pinums šūnas visbiežāk atrodams šķidrums no sirds kambarus smadzeņu.

Šūnas ependymal kambara galvas un muguras smadzeņu šķidruma smadzenēs

Šūnas ependymal kambara galvas un muguras smadzeņu šķidruma smadzenēs, iegūst, jostas punkciju, Tas ir viegli iznīcināti gatavošanas procesā un traipiem. In iezīmētu uztriepju viņiem ir sava veida izglītības, kas sastāv no ovālas kodolu ar maigu struktūru. Dažos šūnu konservēta citoplazma aptver kodolu veidā šauras robežas.

Šķidrums no sirds kambarus smadzenēs ir visizplatītākie ependymal šūnas ar konservētu struktūra, morfoloģiski atgādina šūnas arahnoidālā mater, bet par to apgleznoti bālāka kodols un ir vairāk piedāvājumu, viendabīga hromatīna. Par Ovāls ependymal šūnām stabi bieži norādījusi, Citoplazmā ir pelēcīga nokrāsa. Ir atsevišķi izvietotas un lielas kopas šūnu, kas nevar noteikt ar robežām atsevišķo šūnu.