Diagnoze imunoloģiski izraisījis neauglības

Ilgu laulības dzīve neizmantojot kontracepcijas laikā, un klātbūtnē mikro reģiona gļotādas dzimumorgānus var notikt pakāpeniski pamanīt imunizācijas antigēni spermatozoīdu. Fiziskā pārbaude no laulātajiem, veido neauglīgs laulības, nevar noteikt cēloni neauglības 10-15 % gadījumi. Tas ir šajā grupā neauglīgām laulātajiem, piemērojot īpašas izmeklēšanas metodes slepenu dzemdes kakla kanāla, spermas plazmas un seruma spermas antivielas bieži konstatēti (ASAT), Izmanto kvalitatīvos un kvantitatīvos testus imunoloģisko pētniecības.

Postkoytalnыy tests (FCT)

Postkoytalnыy tests (FCT) Tas attiecas uz kvalitatīvu imunoloģisko. Negatīvs testa rezultāts liecina neesamību spermas kakla kanāla noslēpums, bet jūs nevarat noteikt cēloni viņu prombūtnes laikā.

Metode. Pēc skaita kustīgo spermas kakla kanāla noslēpums, iegūti pēc coitus, noteikt, kādā mērā pārkāpumiem to iekļūst spēju ar neauglību vai imunitāti, kas viņiem gļotas no dzemdes kakla kanāla.

FCT ir nepieciešams veikt šādus nosacījumus: Pētījums jāveic periodā ovulācijas, kas atklāja colpocytologic vai citu metodi, pēc iepriekšējas abstinences laulātajiem 2-3 dienu laikā.

Par metodika. Pēc parastās coitus par sievieti 30 minūtes vajadzētu gulēt uz muguras, saliekuma jūsu ceļgaliem. Douching un tīrīšanas aizliegtā, nepieciešams tikai sanitāro salvete, kas noņem sagūstīšanu par pētījuma gļotas no dzemdes kakla kanāla laikā. Pēc 2-4 stundām, pieļaujama un pēc 6-10 stundām (laiks, pagājis pirms pētījuma, norādīts analīzes) pēc dzimumakta dzemdes kakla pakļauti izmantojot spoguli Cuzco un endocervikālo gļotas turbopūtes vai tuberkulozes šļirci (bez adatas), pipete ar gumijas spuldze, vai polietilēna katetrs.

Kad izskalojot instrumentu nedrīkst izmantot dezinfekcijas, jo tie ietekmē spermatozoīdu kustīgumu. Viens piliens iegūto gļotas no dzemdes kakla kanāla tiek nodota silda stikla slaidu, pārklājumu segstikliņu, Teritorija ieeļļot ar šķidro parafīnu noplūde. Formulēšana nekavējoties mikroskopiruyut (actiņas 7X, 40X mērķis), Nosakot skaitu un raksturu spermatozoīdu kustīgumu. Zāles var noteikt ar aktīvo spermatozoīdu kustīgumu pakāpenisku, svārstību kustību (fenomens sparā) un fiksēto.

Pieņemts nodrošināt piecu veidu FCT secinājumi.

• Teicams (attiecīgās normas): piecās redzeslauku līdz 15-20 ar aktīvo spermatozoīdu pakāpenisku mobilitāti un vairāk. Spermas ar fenomenu svārstību ir mazāks nekā 25 %.
• Apmierinot: piecās jomās apskatīt līdz 10 aktīvo spermatozoīdu progresīva mobilitāte un mazāk 25 % sperma ar fenomenu sparā.
• Nabags: mazāk 5 spermatozoīdu piecās redzeslauku.
• Mīnuss: trūkums spermas.
• Apšaubāms: piecās jomās Skatīt vairāk 5 aktīvi kustīgās spermas un vairāk 25 % fenomens sparā.

Kad piektais veids FCT bieži novēro imūno nesaderību starp laulātajiem, Tādēļ nepieciešams, lai noteiktu ACAT. Lai identificētu ACAT slepeno endocervikālo, plazma, sperma vai asins seruma un parādīt tos (aglutināciju vai bloķēts) Tas prasa iecelt kvantitatīvo imūntesti.

Negatīvs PBC studijas sākas ar definīciju iekļūst (iespiešanās) spēja spermu caur caururbjošs testa (Piektd) un uzņēmība to spermas sekrēciju kakla kanāla, izmantojot testa kontaktu spermas un dzemdes kakla gļotas (TKSTSS).

Penetracionnyj tests (TP)

Plānas kapilāru garums 10 Skatīt drukāti ovulācijas gļotas no dzemdes kakla kanāla laikā. Viens atvērts gals kapilāru aizver māls, un otrs ir ievietots mēģenē ar testa svaigu ejakulāta (vairāk ne 3 stundas pēc ejakulācijas). Ar māla kapilārā ir pievienots pie vertikālā cauruli. Paraugu pakļauj inkubācijai termostatā pie temperatūras 37 ° C. 1 nē. Par no ejakulāta kvalitāte tiek vērtēta ar dziļumu iekļūšanu spermas ar gļotām no dzemdes kakla kanāla. Ir trīs veidi, siltumnīcefekta gāzu.

• Apstiprinošs - Par iekļūšanu dziļums (lielākais attālums centimetros, ceļojis Vismaz vienā spermas) iepriekš 5 cm; skaits spermas maksimālās iespiešanās vairāk 5 aktuāli, un skaits kustīgo spermatozoīdu augšējā trešdaļā kapilāru ir lielāks nekā 50 %.
• Apšaubāms - Dziļums iespiešanās līdz pat 5 Skatīt mazāk spermatozoīdu skaitu 5, viņu mobilitāti augšējā trešdaļā kapilāru sasniedz 50%.
• Mīnuss - Par iekļūšanu spermas sasniedz dziļums 1 cm.

Par spermas spēja pret iespiešanos Tas ir atkarīgs no fāzē menstruālā cikla. Viņa sāk parādīties no 9. dienas menstruālā cikla,, pakāpeniski aktivizējot, sasniedz savu maksimālo izpausmi periodā ovulācijas, kas notika šajā līmenī divas dienas, un pēc tam pakāpeniski samazinās.

Test kontaktlēcas sperma un dzemdes kakla gļotas (TKSTSS)

Uz slaida tiek likts nelielu pilienu gļotas no dzemdes kakla kanāla, ņemts no sievietes ovulācijas laikā, un vairāki tā paša izmēra pilienu ejakulāta. Abi pilieni ir pārklātas ar vāku stikla, kas ir nedaudz nospiestu, pievienojās pie kritums. Zāles ir ievietots mitrā kamerā (Petri trauciņā ar samitrinātu vates tamponu) un inkubē termostatā pie temperatūras 37 ° C. 1 nē.

Šādos apstākļos normālo spermatozoīdu iekļūt noslēpumu normālu kakla kanāla, kā to var redzēt zem mikroskopa palielinājumā 200X. Lai ņemtu vērā reakciju pie robežas starp divām mediju saskaita iekļūst noslēpumu kakla kanāla sperma diviem blakus esošiem redzeslauku.

Ar lielisku TKSTSS divās jomās skatījums atklāj vairāk 25 aktīvi kustīgās spermas in fenomenu sparā mazāk 25 %. Ja apmierinoša TKSTSS divās redzeslauku atklāja vairāk 15 aktīvi kustīgās spermas, TKSTSS in zems - mazāk nekā 15. Negatīvs prombūtnē iespiešanās TKSTSS, ja apšaubāma - fenomens svārstību pārsniedz 25 %.

Šajā testā, kā PCT, fenomens sparā, pārsniedzot 25 %, iespējams, Tas liecina klātbūtni ACAT un prasa iecelt kvantitatīvo imūntesti.

Izmantojot spermu un dzemdes kakla izdalījumi kanālu neauglīga un auglīgās vīriešus dažādos daudzumos, lai, izmantojot TKSTSS identificēt neauglīga vīru.

• Piemērs 1. Ņemts slepenu kanālu dzemdes kakla sievietēm neauglīgiem pāriem un kontrole izšļākt veseliem vīriešiem. Excellent TKSTSS norāda vāja iespiešanās spēju spermu viņas vīrs, un uzņēmību normālas sekrēcijas kakla kanāla.
• Piemērs 2. Ņemts pilns noslēpums kakla kanāla veselīga sieviete un viņas vīrs izšļākt par neauglīgiem pāriem. Bad TKSTSS norāda vāja iekļūšanu spermas.
• Piemērs 3. Taken slepenie endocervikālo sieviešu neauglīgiem pāriem un kontrole izšļākt veseliem vīriešiem. Bad TKSTSS norāda mazvērtības slepeno kakla kanāls, kas acīmredzami nav iespiesties normālu spermatozoīdu.

Kvantitatīvie imunoloģiskie testi

Mikroagglyutinatsionny tests Friberg

Mikroagglyutinatsionny tests Friberg (TF) pietiekami jutīga un ir pieejams klīniskās diagnostikas laboratorijām. Izmantojot TF var noteikt klātbūtni ACAT un aglutinācijas titru dažādos materiālos (plazmas izšļākt, ekstrakti gļotas no dzemdes kakla kanāla un serumā abu laulāto).

Reaģenti:

1. Fosfātu buferšķīdums (FSB) 0,01 М pH 7,2-7,4.

2. Vazelinovoe eļļa.

Iekārta: mikroskops, tuberkulīna šļirce, mikroagglyutinatsionnye pipetter 1 ml, mikropipete jauda 0,1 ml.

Metode. Asins analīzes serumu inaktivē inkubācijas inkubatorā at 56 ° C. 30 m. Iesaukties, iegūst, masturbācija, nekavējoties atšķaida, lai FSB, koncentrācija spermas bija 40 miljons. uz 1 ml.

Sakarā ar materiāla (plazmas izšļākt, ekstrakts noslēpumu kakla kanāla vai serumā) gatavo virkni atšķaidījumu 1:4 līdz 1:128 izmantojot kā šķidrums atšķaidīšanas FSB. Akās ar parafīna eļļu mikroagglyutinatsionnyh planšetes tuberkulīna šļirci ar tiek ieviesta adata (saskaņā vazelinovoe eļļu) Mazie pilienus katru atšķaidījumu pārbaudes materiāla. Pēc katra parauga mazgā četras reizes šļirci. Katrā atšķaidījuma pievieno uz 5 reizes mazāks kritums ejakulāta, un ar 4 st istabas temperatūrā atklāti aglutinācijas reakciju ar. Pēdējais audzēšana, ar ko saskaņā ar mikroskopu pie 100x palielinājuma atklāta 3 salīmēts pārskata un vairāk, aglutinācija titrs atbilst ACAT.

Spermoimmobilizuyuschy tests Izodzhima (SIT).

Titrs immobilizing ACAT serums, plazmas vai spermas izraksta noslēpums dzemdes kakla kanāls ir noteikts skaits kustīgo spermatozoīdu klātbūtnē antigēnu (sperma).

Sastāvdaļas.

1. Iesaukties, kas tiek ražots un sagatavots līdzīgi, par TF izmantojot FSB; kustīgumu pārsniegt 70 %.

2. Komplementsoderzhaschaya serumu jūrascūciņām.

3. Imūnās cilvēka seruma (IChS), piekāpšanos par papildinājumu klātbūtni caur 1 h inkubācijas imobilizācija 90 % sperma.

4. Normāla cilvēka seruma (NCHS), inaktivē karsējot temperatūrā 56 ° C. 30 m.

5. Test inaktivēts serums, plazmas un spermas iegūt slepenu kakla kanāls.

Metode. Izvērtēt komplementa aktivitātes immobilizing 1st cauruli tiek ieviesta 0,5 ml izotoniska nātrija hlorīda šķīduma, noteikt izmaiņas spermatozoīdu kustīgumu bez ASAT 2. mēģenē - 0,5 ml NHS, kontrole imobilizācija trešais caurule - 0,5 ml ICHS un lai noteiktu ACAT immobilizing vērtē 4. caurule - 0,5 ml seruma, vai plazmas no ejakulāta, ekstrakts vai sekrēcija endocervikālo.

Tad katrs caurule ir ieviesta ar 0,1 ml papildinājums. Pēdējā lieta, lai visiem caurulēm tiek pievienots 0,05 ml spermas suspensijas koncentrāciju 40 miljons. uz 1 ml. Stangu caurules tika ievietoti inkubatorā pie temperatūras 37 ° C 1 nē. Šīs caurules tiek izņemti no cepeškrāsns un uzmanīgi sakrata, lai atspoguļotu pastāvīgo aglutinācijas reakciju spermu.

Lai novērtētu rezultātus zem augsta palielinājuma mikroskopa (400X) aprēķina procentuālo kustīgo spermatozoīdu ar pilienu mēģenē, nogulsnējas uz stikla plāksnītes un nosedz ar pārsegu. Tāpat, tā nosaka procentuālo kustīgo spermatozoīdu tādās pilienu no mēģenēm ar NHS un ICHS. Reakcijas vērā formulu rezultāts

SIT = K / A

kur K - skaits kustīgo spermatozoīdu kontrolē ar ICHS un NHS;

Par - skaita kustīgo spermatozoīdu mēģenē (seruma tests, vai plazmas no ejakulāta, vai noslēpums kakla kanāla).

Ar vidējo SIT<2 tests ir negatīvs (skaits kustīgās spermas šūnu kontroli, gan mēģenēs ir aptuveni tāds pats), Ja indekss CTI>2 - Tests ir pozitīvs, t. tas ir. materiālā (serums, plazmas vai spermas iegūt slepenu kakla kanāls) tiek bloķēts ACAT.

• Piemērs 1. Ground kontrole ICHS - 10 % kustīgās spermas. Otrais kontrole ar NHS - 80% kustīgās spermas. Abas vadības ierīces kopā - 90 % kustīgās spermas. Jo mēģenē - 80 % kustīgās spermas.

SIT = R / D = 90/80 = 1,1

Tests ir negatīvs, Apturēta ACAT prombūtnē.

• Piemērs 2. Jo mēģenē - 40 % kustīgās spermas, Tomēr, kontrolē, Piemērā 1.

KN = 90/40 = 2.2

Tests pozitīvs. Ir Apturēta antiviela (ASAT), caur kuru spermas kustīgums ievērojami samazināts.