Paveldima hemolizinė anemija, dėl to, piruvato kinazės trūkumo raudonųjų kraujo ląstelių aktyvumo

Paveldima hemolizinė anemija, susijęs su eritrocitų piruvato kinazės trūkumas - santykinai retas forma hemolitinės anemijos, kuris yra paveldima autosominiu recesyviniu būdu yra, tai suteikia klinikiniai pasireiškimai homozygotas, vyksta su ženklais ląstelėje hemolizės, eritrocitų makrocitozė, mažas kalio kiekis. Yra daugiau nei 200 atvejai homozigotinių vežėjų deficitas piruvatkinaznoy veiklos.

Patogenezė

Piruvato kinazės yra vienas iš fermentų, sudaryti glikolizės. Ši nuoroda glikolizės ir ATF suformuotas nikotinamiddinukleotid. Pacientų, sergančių trūkumas piruvato kinazės aktyvumo, dauguma yra sumažinta raudonųjų kraujo ląstelių, šių dviejų metabolitų kiekį, Kai kuriais atvejais, ATP kiekis yra normalus, bet sutrikdyta ATP stabilumą inkubacijos metu. Normalius ATP rasti bent gerokai reticulocytosis. Tai yra dėl to, kad retikulocitų buvimo ir mitochondrijų ATP galimybe ne tik per glikolizę, bet taip pat dėl ​​to, kad oksidacinio fosforilinimo.

Piruvato kinazės trūkumu pasekmė Taip pat iš glikolizės produktų kaupimas, susidaro ankstesniuose etapuose - fosfofenolpiruvata, 3-phosphoglycerate, ir ypač 2,3-diphosphoglycerate. Turinio piruvatanlaktata sumažėja raudonųjų kraujo kūnelių.

ATP trūksta eritrocituose piruvato kinazės trūkumu Tai veda prie sutrikimų ATP-aznogo siurblio raudonųjų kraujo ląstelių funkciją ir kalio jonų nuostolius, punktą, kuriame natrio jonų koncentracija eritrocitų ne didėja. Tai sukelia į vienvalentėmis jonų kiekis eritrocitų sumaž, dehidratacija ląstelę ir jos susitraukimą. Šis reiškinys vadinamas dessikotsitoz. Raudonųjų kraujo ląstelių sumažėjimas vandens apsunkina deguonimi ir deguonies išleidimo procesą hemoglobino. Šiuo atžvilgiu tam tikroms kompensacinėms vaidmuo gerokai kaupimo eritrocituose 2,3 rūgšties difosfoglitserinovoy.

Hemoglobino už deguonies giminingumas yra sumažintas jos sąveiką su 2,3-diphosphoglycerate. Taigi, esant didesnei koncentracijai už 2,3-diphosphoglycerate grįžta deguonies į audinius palengvino.

Klinikiniai požymiai iš piruvato kinazės trūkumu veiklos

Klinikiniai pasireiškimai trūkumas piruvato kinazės aktyvumo priklausys nuo hemolizės laipsnį. Kai kuriais atvejais išaugo hemolizė pasireiškia nuo gimimo ir lydi sunkios hemolizinė krizės atsiradimo, sukelia poreikį kraujo perpylimai išlaikyti hemoglobino sub-normalu lygių. Kitais atvejais, liga gali pasireikšti be simptomų beveik su pirmaisiais padidėjimo požymių hemolizės (subikterichnost Odena ir oda) amžiaus 17-30 metų.

Paprastai; palyginti su microspherocytosis, piruvato kinazės trūkumas yra sunkesnis.

Beveik visi pacientai, sergantys apčiuopiamas blužnies. Šiek tiek padidėjo jos atskleisti kai kurių anomalijas Heterozigotinių vežėjams, nors jie turi anemija, paprastai, dingęs. Pacientų įmanoma blužnis skaičius. Labai padidėjo kepenų retai. Pavieniams pacientams su kojų opos nustatė.

Laboratoriniai veiklos rodikliai piruvato kinazės trūkumu

Daugumai pacientų su trūkumu piruvato kinazės aktyvumo pastebėjo vidutinio sunkumo anemija (4,34- 6,21 mmol / l, arba 70-100 g / l,), Tačiau per krizių hemoglobino gali būti sumažintas iki 3,1 3,72 mmol / l (50-60 G / l). Turinio eritrotsitov- 2,5-3,0, T 1 L. Hemolizinio krizė gali būti sukeltas infekcijos. Yra atvejų, hemolizės pelnas per menstruacijas.

Raudonieji kraujo kūneliai pacientų su piruvato kinazės trūkumu būdingas makrocitozė su normohromiey, Nedidelis anizocitozė ir poikilocytosis. Nebuvo tikroji polychromatophilia. Kartais rasti mishenevidnye raudonųjų kraujo ląstelių ir raudonųjų kraujo ląstelių Troškinti kraštus arba į šilkmedžio formos, dažnai identifikuojamos bazofiliniai eritrocitų punktatsiya, Jolly eritrocitų. Kai periferiniame kraujyje pacientams atskleidė didelį kiekį erythrokaryocytes, Per krizės laikotarpiu, jis gali būti padidintas iki 60-70 %. ENG, baltųjų kraujo ląstelių skaičius, leukogram, trombocitų skaičius normos ribose. Kaip ir kitų formų hemolizinė anemija, kaulų čiulpuose atskleidė SHARP dirginimas raudona augimo kraujodaros.

bilirubinas, paprastai, padidėjo dėl netiesioginio.

Laisvas hemoglobino plazmos normalus, tačiau jis gali būti sumažintas haptoglobinas lygį. Hemosiderin šlapime nėra. Vaisiaus hemoglobino kiekis ir hemoglobino₂ normos ribose.

Osmosinis atsparumas eritrocitai piruvato kinazės trūkumu dažniausiai normaliomis, kartais sumažintas po dienos inkubacijos. Autogemoliz, paprastai, naujovinami iki įvairaus laipsnio. Yra atvejų, piruvato kinazės trūkumu įprastos autogemolizom. Per pirmąjį pranešė atvejai piruvato kinazės trūkumu buvo užregistruotas II tipo autogemoliza, ištaisoma ATP to, o ne koreguoti ar šiek tiek koreguoti gliukozės papildymas. Vėliau, daugeliu atvejų buvo aprašyta su fermento trūkumas I tipo autogemoliza arba ne. Todėl nerekomenduojama taikyti metodą autogemoliza už diferencinę diagnozę hemolizinė anemias. Raudonųjų kraujo ląstelių trūkumas piruvato kinazės aktyvumo trukmė visada yra sutrumpintas.

Tipas paveldėjimo piruvato kinazės aktyvumas autosominiu recesyvinis. Heterozigotų praktiškai sveiki, Remiantis įvairių mokslininkų, deficito sunkumo svyravo nuo 50 į 70 % normos.

Diagnostikos veikla piruvato kinazės trūkumu

Piruvato kinazės trūkumo raudonųjų kraujo ląstelių diagnozė gali būti tikimasi pristatyti į hemolizinės anemijos atveju, teka per metus su blužnies padidėjimas, periferinės kraujo tepinėlius ženklai microspherocytosis trūkumas, elliptotsitoza ir stomatotsitoza.

Kokybiniai tyrimai nustatymo piruvato kinazės aktyvumą. Šiam tikslui metodas yra plačiai naudojamas fluorescencinis dėmę, remiantis, kad reakcijos žinoma, kataliziruemoy piruvatkinazoy, nikotinamiddinukleotid oksiduojasi ir fluorescencijos dingsta.

Piruvato kinazės Sveikų asmenų veikla svyravo nuo 4,0 į 7,7 mmol (min / 1010 eritrocitai) arba 4,0 į 7,7 Galia. Homozigotinių liga fermentų aktyvumo dauguma mažiau 1 Galia. Tačiau, gali būti atvejų, šiek tiek sumažėjo aktyvumo fermento. Diagnostika reta forma hemolizinė anemija yra labai sunku, ir diagnozė gali būti tik fermentų kinetikos tyrimas.

Diferencinė diagnostika hemolizinė anemija, susijęs su trūkumas piruvato kinazės

Diferencinė diagnostika hemolizinė anemija, susijęs su trūkumas piruvato kinazės, būtina atlikti kitų formų paveldimos hemolizinė anemija.

Kadangi dauguma pacientų, kurių organizme trūksta piruvato kinazės aktyvumo, skirtingai nei privačių asmenų, kenčia microspherocytosis, elliptotsitozom, stomatocitozom, hemolizinės anemijos, kondicionieriai vežimas nestabili hemoglobino, ir talasemija liga yra paveldima autosominiu recesyvinis į, kad ši patologija yra nustatyta tik tuo pačiu karta ir beveik niekada tarp tėvų.

Kai paveldimas anemija, kondicionieriai vežimas nestabili hemoglobino, ypač sunkios ligos, kartais proband yra pirmasis nešiklį mutacijos, ir tada liga yra perduodami į kitą kartos. Todėl skirtumas diagnozė turi būti atliekamas su hemoglobinopathies, kondicionieriai vežimas nestabili hemoglobino, taip pat nutolstantis paveldima hemolizinės anemijos, atsirandantis dėl nepakankamo veiklos kitų fermentų.

Ji vaidina pagalbinį vaidmenį hemoglobino stabilumą, Yego elektroforezės. Su kitų fermentopathia atskirties ištirti kitų fermentų eritrocitų veikla, ir neįtraukti autoimuninė hemolizinė anemija, Kumbso bandymai atliekami, agregatgemagglyutinatsionnaya.

Fluorescenciniu metodu procedūra, piruvatkiiazy Beutler

Reagentai.

1. Fosfoenolpirovinogradnaya rūgšties (tritsiklogeksilammoniynaya druska) 0,15 M tirpalas, neutralizuoti iki pH 7,0-8,0 0,2 M NaOH tirpalo (0,03 ml).
2. ADT 0,03 M tirpalas, neutralizuotas (0,1 ml).
3. NAD-N 0,015 M tirpalas, neutralizuotas (0,1 ml).
4. magnio sulfatu 0,08 M tirpalas (0,1 ml).
5. Fosfato buferinio tirpalo kalio druskos 0,25 M, pH vertė 11 7,4 (0,05 ml).
6. Distiliuoto vandens (0,62 ml). Mišinys gali būti laikomas - 20 ° C, yra ne daugiau kaip per savaitę.

Metodas.

Naudoti moksliniams tyrimams kraujo, kartu su heparinu ar natrio citrato. Ji yra centrifuguojamas, įsiurbimo ir paruošti plazmos 20 % pakaba raudonųjų kraujo ląstelių, pridedant keturis tūriai izotoninis natrio chlorido tirpalas.

Eritrocitų suspensija sumą 0,02 ml, yra sumaišomas su 0,2 ml reagento ir inkubuojami 30 minučių 37 ° C,. Lašelių buvo ant filtravimo popieriaus ir naršyti fluoroscope. Bazinis fluorescencija buvo aptikta iš karto po eritrocitų Be mišinio, prieš inkubacijos. Paprastai po 30 min inkubavimo jis dingsta, ir piruvato kinazės trūkumo lieka veikla. Tai yra, NADH kurie švyti UV spindulių poveikio zonoje, arti matomas, o NAD nėra švyti. Kadangi virš tirpalo yra nestabilus ir lengvai pablogėjusiomis, reikia stebėti. Turėtumėte atidžiai atskirti baltųjų kraujo ląstelių sluoksnį, nuo piruvato kinazės nepakankamumo eritrocitų fermento aktyvumo aktyvumas leukocitų gali būti normali.