Aptikimo metodai Leishmania į nukentėjusių audinių grandymo, išskiriant grynąją kultūrą
Kai sėjos grandymo paveiktą audinį, kad pacientas su konkrečiu maitinamosios terpės Leishmania daugintis, ir jie gali būti aptikti mikroskopijos.
Reagentas
Среда W.W.W. už Leishmania auginimą (14 g agaro, 6 g natrio chloridas, apie 150 ml defibrinated triušių kraujyje, paimtas tiesiogiai iš širdies, prieš ruošiant terpę, 900 ml distiliuoto vandens). Distiliuotame vandenyje buvo pridėta natrio chlorido ir agaro. Kolbą, kurioje yra terpė buvo kaitinamas iki visiško ištirpimo iš agaro, ir 20-30 min sterilizuoti garo sterilizatorius bent 147,1 kPa, (15 į).
Atšaldomas iki 56 ° C agaras pridėti sterilų defibrinated triušio kraujas, maišyti Kolba sukasi ir supilti į sterilia pipete 4 ml vamzdžiai. Gertuvės kraujo agaro išdavimo metu yra vandens vonia temperatūroje 58 ° C,. Su vidutinio patarimai vamzdžiai.
Po to, kai kietinimą agaro, jos yra sudėtos į inkubatoriuje per dieną bent 37 ° C sterilumo kontrolės ir gauti skystą kondensatą. Jei jis yra pagamintas nėra pakankamai, prieš sėją steriliuose buteliukuose, galite įdėti apie 1 Viename ml šių tirpalų: 0,85 % natrio chloridas, 1 % peptonu sprendimas, Hanks sprendimas, laktoalbuminą hidrolizatas ar kitų maistinių medžiagų žiniasklaida izotoniniu koncentracijos.
Metodai aptikti Leishmania į nuograndų nukentėjusių audiniuose atskirai gryno kultūros
Kai pasirenkate kultūrą atidžiai sekti sterilumo taisyklės. Bandymų zonos odos yra nuvaloma medvilniniu tamponu, sudrėkinta 70 % alkoholis.
Po išgarinimo alkoholio aštrus galo sterilų oftalmologinės skalpelio įpjovimo gumbelis ilgio yra 2-3 mm. Nuo sumažinti su steriliu Pastero pipete apačioje do grandymo audinį. Gautas lašas serozinis-kruvinų skysčio buvo perkelta į mėgintuvėlį su aplinka. Manipuliavimo yra atliekamas kelis kartus, sėjos medžiagos kiekvieną kartą naują vamzdis. Ausų kištukai įterptos į parafino arba juos guminius dangtelius ir dedamas į inkubatorių ne 22-24 ° C.
Rezultatų įvertinimas
Augalai yra tiriamas mikroskopu kasdien identifikuoti sukėlėjas. Naršyti gimtoji narkotikus, parengta smulkinto lašų metodu, objektyvas 40×40. Rezultatai yra laikomas neigiamu sėjos, jei 40 dienos patogenas nerastas. Kultūros pailgos Leishmania (10-12 Microns su laidų).
Taikymas kultūros metodas yra labiausiai naudinga, kai Primena tuberkuliozė ir leišmaniozės forma, diagnostika, kad kiti metodai gali būti mažiau veiksmingas.