Diagnozė imuniniu sukėlė nevaisingumą

Per ilgą santuokinį gyvenimą be kontracepcijos naudojimo, ir atsižvelgiant į mikroregionui gleivinės buvimo lyties organų gali atsirasti palaipsniui vietoje imunizacijos antigenai spermatozoidų. Fizinis patikrinimas iš sutuoktinių, kurį sudaro turincia santuokos, negali nustatyti nevaisingumo priežastį 10-15 % atvejai. Būtent šiame nevaisingų sutuoktinių grupės taikant specialius tyrimo metodus slaptu gimdos kaklelio kanalą, spermos plazmoje ir serume spermos antikūnai dažnai aptinkamas (AST), Naudoja kokybinius ir kiekybinius imunologinių tyrimų.

Postkoytalnыy testas (FCT)

Postkoytalnыy testas (FCT) Ji nurodo kokybinę analizės metodu. Neigiamas testo rezultatai rodo, spermos nebuvimą gimdos kaklelio kanalą paslaptis, bet jūs negalite nustatyti jų nėra priežastis.

Metodas. Iki judrių spermatozoidų skaičius gimdos kaklelio kanalą paslaptis, gautas po lytinio akto, nustatyti jų gebėjimą skverbiasi su nevaisingumo ar imunitetu pažeidimų mastą, jų gleives iš gimdos kaklelio kanalą.

FCT būtina atlikti šias sąlygas: Tyrimas turėtų būti atliktas ovuliacijos laikotarpiu, kuri atskleidė colpocytologic arba kitas metodas, po išankstinių abstinencijos sutuoktinių per 2-3 dienas.

Metodologijos. Po to, kai įprastu lytinio akto moteriai, 30 minučių turėtų gulėti ant nugaros, lenkimo savo kelio. Douching ir valymo draudžiamas, reikia tik higieninės servetėlės, kuris yra pašalinamas per skirto gleivių iš gimdos kaklelio kanalą tyrimo surinkimo. Po 2-4 valandų, leidžiama ir po 6-10 valandų (laikas, praėjęs prieš tyrimą, nurodyta analizės) po lytinių santykių gimdos kaklelis veikiami naudojant veidrodį Cuzco ir gimdos kaklelio gleivių pripūtimo ar su tuberkulino švirkštą (be adatos), pipete su gumine kriauše, arba polietileno kateteris.

Plaudami priemonė neturėtų būti naudojamas dezinfekavimo, kaip jie įtakos spermatozoidų judrumą. Vienas lašas gauto gleivių iš gimdos kaklelio kanalą yra perkeliamas į pašildyto stiklelio, padengtas dengiamąja, Teritorija sutepti skystu parafinu ištekėti. Formulavimas karto mikroskopiruyut (okuliaras 7X, 40X tikslas), Nustatant skaičių ir pobūdį spermos judrumui. Narkotikų gali būti aptinkamas kartu su aktyviai spermos judrumui laipsniškai, Virpesių judėjimas (svingo reiškinys) ir fiksuoto.

Priėmė teikti penkių rūšių išvados FCT.

• Puikus (atitinkamos normos): penkiose srityse peržiūrėti iki 15-20 su aktyvus spermos laipsniškai mobilumo ir daugiau. Spermatozoidų su svyravimo reiškinio yra mažesnis nei 25 %.
• Tenkinanti: penkiose srityse peržiūrėti iki 10 aktyvus spermos progresuojanti mobilumas ir mažiau 25 % sperma su svingo reiškinys.
• Prastas: mažiau 5 spermatozoidų iš penkių matymo laukais.
• Minuso: nebuvimas spermoje.
• Abejotinas: penkiose srityse Rodyti daugiau 5 aktyviai judrių spermatozoidų ir dar daugiau 25 % svingo reiškinys.

Kai penktą tipo FCT Dažnai pastebima, imuninę nesuderinamumo sutuoktinių, Todėl būtina nustatyti ACAT. Norėdami nustatyti ACAT slaptą gimdos kaklelio, plazma, sperma arba kraujo serume ir juos rodyti (agliutinacija ar imobilizuota) Jis reikalauja kiekybinių imuniniai paskyrimo.

Neigiamas PBC tyrimai pradėti su skverbiasi apibrėžimas (įsiskverbimas) iš spermos gebėjimą per Skverbiamasis bandymo (Penk) ir jautrumas spermos sekrecijos gimdos kaklelio kanalą, naudojant bandomąjį Susisiekite spermos ir gimdos kaklelio gleivių (TKSTSS).

Penetracionnyj testas (TP)

Plonas kapiliarų ilgis 10 Žiūrėti įvedėte metu ovuliacijos gleivių ir gimdos kaklelio kanalą. Vienas atviras galas kapiliarų uždaro molio, o antrasis yra dedamas į mėgintuvėlį su bandymo šviežios ejakuliacija (nebe 3 valandoms po ejakuliacijos). Su molis kapiliariniu yra pritvirtintas prie vertikalioje vamzdžio. Mėginys yra inkubuojamas termostate esant temperatūrai, 37 ° C 1 ne. Dėl ejakuliato kokybė vertinama pagal tai, įsiskverbimo gylis spermos į gimdos kaklelio kanalą gleivių. Yra trijų rūšių šiltnamio efektą sukeliančių dujų.

• Teigiamas - Dėl įsiskverbimo gylis (didžiausias atstumas centimetrais, keliavo bent jau vieną spermos) aukščiau 5 cm; spermatozoidų, į didžiausio prasiskverbimo tašką daugiau 5 matomas, ir judresnių spermatozoidų skaičius viršutinio trečdalio kapiliarų yra didesnis nei 50 %.
• Abejotinas - Prasiskverbti iki gylio 5 Žiūrėti mažiau spermatozoidų skaičius 5, jų mobilumas viršutinį trečdalį kapiliarinių pasiekia 50%.
• Minuso - Dėl įsiskverbimo gylis pasiekia spermos 1 cm.

Spermos gebėjimą skverbtis Tai priklauso nuo menstruacinio ciklo fazės. Ji pradeda išeiti iš 9-dieną menstruacinio ciklo,, palaipsniui aktyvinti, pasiekia savo didžiausią ekspresiją ovuliacijos laikotarpiu, vyko šiame lygyje dvi dienas, ir tada palaipsniui mažėja.

Testas kontaktiniai sperma ir gimdos kaklelio gleives (TKSTSS)

Ant objektinio stiklelio yra įdėti nedidelį lašą gleivių iš gimdos kaklelio kanalą, ovuliacijos metu paimti iš moterų, ir to paties dydžio lašas ejakuliato skaičius. Abi lašai yra padengtas padengti stiklo, kuri yra šiek tiek nuspaudus už, sujungtos su lašo. Vaistas yra dedamas į drėgną kamerą (Petri lėkštelę su sudrėkintu vatos tamponu) ir inkubuojami termostate esant temperatūrai, 37 ° C 1 ne.

Esant šioms sąlygoms, normalių spermatozoidų įsiskverbti į įprastą kaklelio kanalą slaptumą, kaip galima matyti po mikroskopu ne didinimo 200X. Norint įvertinti reakcijos artimiausioje tarp dviejų laikmenų ribos skaičiuoja skverbiasi iš gimdos kaklelio kanalo spermos slaptumą dviejų gretimų matymo laukais skaičių.

Su puikia TKSTSS dviejų sričių vaizdas atskleidžia daugiau 25 aktyviai judrių spermatozoidų į svingo reiškinys mažiau 25 %. Jei patenkinamos TKSTSS dviem matymo laukais atskleidė daugiau 15 aktyviai judrių spermatozoidų, TKSTSS mažas - mažiau nei 15. Neigiamas nėra skverbtis TKSTSS, jei abejotina - iš virpesių reiškinys viršija 25 %.

Šiame bandyme, kaip PCT, svingo reiškinys, kaip 25 %, tikėtinas, Tai rodo ACAT buvimą ir reikalauja kiekybinių imuniniai paskyrimo.

Naudojant spermą ir gimdos kaklelio išskyrų kanalų nevaisingoms ir derlingus vyrus įvairių sumų naudojant TKSTSS nustatyti nevaisingumo vyrą.

• Pavyzdys 1. Paimta slaptą kanalą iš moterų nevaisingų porų ir kontrolės ejakuliato sveikų vyrų gimdos kaklelio. Puikus TKSTSS rodo silpną skverbties gebėjimas spermos vyru, o normalus sekrecijos gimdos kaklelio kanalą jautrumą.
• Pavyzdys 2. Visapusiškai paslaptis gimdos kaklelio kanalą sveiką moterį ir jos vyras ejakuliato nevaisingų porų. Blogas TKSTSS rodo silpną skverbtis spermos.
• Pavyzdys 3. Padaryta slapti gimdos kaklelio moterys nevaisingų porų ir kontrolės ejakuliato sveiki vyrai. Blogas TKSTSS rodo nepilnavertiškumo slaptą gimdos kaklelio kanalą, kurios akivaizdžiai nekerta normaliai spermatozoidų.

Kiekybiniai imunologiniai tyrimai

Mikroagglyutinatsionny testas Friberg

Mikroagglyutinatsionny testas Friberg (TF) pakankamai jautrūs ir yra prieinama klinikinių diagnostinių laboratorijų. Naudojant TF gali nustatyti ACAT ir agliutinacijos titras buvimą įvairių medžiagų (plazmos ejakuliato, ekstraktai gleivių gimdos kaklelio kanalą ir abiejų sutuoktinių serume).

Reagentai:

1. Fosfatinio buferio druskų tirpalu (FSB) 0,01 М pH 7,2-7,4.

2. Vazelinovoe alyvos.

Įranga: mikroskopas, tuberkulino švirkštas, mikroagglyutinatsionnye pipetter 1 ml, mikropipetė talpa 0,1 ml.

Metodas. Kraujo tyrimas serumo yra inaktyvuojamas inkubacijos inkubatoriuje bent 56 ° C 30 m,. Ejakuliato, gautas masturbacija, iš karto praskiestas tiek, kad FSB, spermos koncentracija buvo 40 milijonas. į 1 ml.

Dėl to, kad medžiaga, (plazmos ejakuliato, išgauti iš gimdos kaklelio kanalą arba serume slaptumą) rengia praskiesto seriją 1:4 į 1:128 naudojant kaip skiedimo FSB skysčio. Šulinių parafino alyvos mikroagglyutinatsionnyh planšetės tuberkulino švirkštą su adata įvedama (pagal vazelinovoe aliejaus) Lašeliai kiekvienu bandymo medžiagos praskiedus. Po kiekvieno Mėginys plaunamas keturis kartus švirkštą. Kiekvienu praskiedimas yra pridedama prie 5 kartus mažesnis kritimas ejakuliato, ir 4 h kambario temperatūroje aptikta agliutinuoja. Paskutinis veisimas, kuriuo pagal esant 100x priartinimas mikroskopu aptiktą 3 Zlepiać pagal peržiūros ir daugiau, agliutinacijos titras atitinka ACAT.

Spermoimmobilizuyuschy testas Izodzhima (SIT).

Titras Imobilaizeris ACAT serumas, plazmos ar sperma ekstraktas paslaptis gimdos kaklelio kanalas nustatomas pagal judrių spermatozoidų skaičius į antigenų buvimą (sperma).

Komponentai.

1. Ejakuliato, kuris yra pagamintas ir paruošti panašiai, už TF naudojant FSB; judrumas didesnis 70 %.

2. Komplementsoderzhaschaya serumas jūrų kiaulytėms.

3. Imuninės žmogaus serumo (IChS), suteikiant į komplemento buvimą per 1 h inkubacijos imobilizavimo 90 % sperma.

4. Normalus žmogaus serumo (NCHS), inaktyvuojamas šildymo temperatūroje, 56 ° C 30 m,.

5. Testas inaktyvuota serumas, plazmos ir sperma išgauti slaptą gimdos kaklelio kanalą.

Metodas. Įvertinti komplemento veiklą Imobilaizeris 1st vamzdelis dedamas 0,5 ml izotoninio natrio chlorido tirpalo, nustatyti spermatozoidų judrumui pakeitimus be AST 2-asis mėgintuvėlio - 0,5 ml NHS, kontrolės imobilizacijos trečiasis vamzdis - 0,5 ml ICHS ir nustatyti ACAT Imobilaizeris 4-ąjį vamzdis - 0,5 ml serumo, arba plazma ejakuliacija, ekstrakto ar sekrecijos gimdos kaklelio.

Tada, kiekvienas vamzdis yra įvesta 0,1 ml papildo. Paskutinis dalykas, visiems vamzdžių pridedama 0,05 ml spermatozoidų pakaba, kurio koncentracija yra 40 milijonas. į 1 ml. Tripod vamzdžiai buvo dedamas į inkubatoriuje esant temperatūrai, 37 ° C, 1 ne. Vamzdeliai pašalintas iš orkaitės ir atsargiai kratomas atspindėti gyventojo sulipusių spermos.

Norėdami įvertinti pagal didinamąjį mikroskopu rezultatus (400X) apskaičiuojamas iš judresnių spermos procentinės dalies tam mėgintuvėlio lašo, nusėda ant stiklelio ir padengta su dangčiu. Be to, ji nustato, kad judrių spermatozoidų procentas iš mėgintuvėlių lašelių su NHS ir ICHS. Reakcijos į kurį formulės rezultatas

SIT = K / A

čia K - iš judrių spermatozoidų skaičius į su ICHS ir NHS kontrolės;

Apie - nuo judrių spermatozoidų skaičius mėgintuvėlį (serume testas, arba plazma ejakuliacija, arba iš gimdos kaklelio kanalo paslaptis).

Esant vidutiniam SIT<2 bandymas yra neigiamas, (skaičius judančių spermatozoidų ląstelių kontrolinio bandymo ir į mėgintuvėlius maždaug tas pats), Jei indeksas CTI>2 - Bandymas teigiamas, T. tai yra. medžiagoje (serumas, plazmos ar sperma išgauti slaptą gimdos kaklelio kanalą) yra imobilizuoti ACAT.

• Pavyzdys 1. Tvarkdariams ICHS - 10 % Judesį spermatozoidų. Antrasis valdymas su NHS - 80% Judesį spermatozoidų. Abi valdymo kartu - 90 % Judesį spermatozoidų. Mėgintuvėlyje - 80 % Judesį spermatozoidų.

SIT = R / D = 90/80 = 1,1

Bandymas yra neigiamas,, imobilizuota ACAT nėra.

• Pavyzdys 2. Mėgintuvėlyje - 40 % Judesį spermatozoidų, Tačiau, atsižvelgiant į kontrolės, Pavyzdyje 1.

K. = 90/40 = 2.2

Bandymas teigiamas. Yra imobilizuotą antikūnas (AST), per kurį spermatozoidų judrumas gerokai sumažintas.