המחקר של קרישת דם

שיטות חקירת מערכת קרישת הדם כוללות את הקבוצות הבאות:

1. אינדיקטיבי (כללי), נותן מושג על המצב של כל מפל הקרישה בכללותו והשלבים הבודדים שלה (רישום ניתן לעשות זאת מבחינה ויזואלית או על ידי מכשירים בודדים - koagulografa, thromboelastography ואחרים.);
2. גירעון הבחנה של גורמים אישיים - בדיקות קרישה מתקנות, בדיקות ערבוב מחקר של פלזמה דם פלזמה דם של חולים עם מחסור ידוע לשמצה ידועה של גורמים מסוימים;
3. כימות של רכיבים בודדים בפעילות הפונקציונלית שלהם (בדיקות קרישה, מחקרים ומצעי chromogenic אחרים) ו (או) על סמנים חיסוניים;
4. זיהוי ההפעלה תוך-של קרישת דם ופירוק פיברין על המאפיינים הפונקציונליים או סמנים מולקולריים הפעלה כגון - לזהות במחזור גורמי קרישה מופעלים, מוצרי degranulation טסיות הדם, פיצול של מרכיבי קרישת דם או מטבוליטים שלהם, הופעתה של סמן אנטיגני החדש הופעלה גורמים והמתחמים שלהם, רכיבי metabolization שכותרתו מואצים של קרישת דם (להפחית את תקופת מחצית החיים שלהם במחזור).

כך, בהערכת המצב של קרישת דם משמשים כראוי שיטת קרישה (מעבדה ואינסטרומנטלי), העומד בבסיס תהליך האבחון, ו חיסוני, רדיונוקלידים וסוגים אחרים של מחקר. במקרים רבים, ניתן להגדיר את הרכיבים כפעילות פונקציונלית, ומערכת חיסון - התוכן של אנטיגן הרלוונטי בדם. שימוש בו-זמני של טכניקות אלה מאפשר לנו לבדל את הצורות של פתולוגיה, הקשורים לחוסר הסינתזה של גורם הקרישה המתאים (במקרה זה אותו כפי שהוא הוריד את הפעילות פונקציונלית, והסכום של אנטיגן), וצורות, שבמולקולה היא מסונתזת גורם, אבל זה לא נורמלי ופונקציונלי פגום.

כדי להתייחס למספר הצורות הראשונות של הגורם הרלוונטי הוא הוסיף הסימן "-" (למשל, VIII-, ט- ולא. ד.), והשני - סימן "+" (למשל, VIII +, + IX).

גס (כללי) בדיקות קרישה

קביעת זמן קרישה

קביעת זמן קרישה (שיטה מועדפת של לי-לבן) - שימוש ארוך bystrovypolnimy (ליד המיטה) בדיקה מעידה, מאפשר לזהות הפרעות דימום משמעותיות, הקשורים בגירעון של גורמי קרישה (חוץ מזה פקטור VII) או בהשפעה של תרופות נגד קרישת דם וFibrinolytic. הוא משמש כמדריך לבדיקה והבקרה של הפרין, חיסול של סולפט protamine הפרין. המבחן הוא רגישות נמוכה יחסית, הדמויות שלו שבורות רק בירידה ניכרת בגורמי קרישה בפלזמה (להלן 4-5 %), ולכן אינו מתאים לזיהוי של צורות קלות של המופיליה A ו- B, כמו גם דימום הפרעות כאשר angiohemophilia, מחסור בפקטור XI, prekallikrein, וkininogen משקל המולקולרי גבוה. מסיבות אלה, המבחן אינו יכול לשמש לחולים לפני ניתוח: תחת מבחן ביצועים נורמלי (5-10 דקות) אתה עלול להיתקל דימום לאחר ניתוח פזרני.

זמן recalcification פלזמה

זמן recalcification פלזמה - מבחן רגישות נמוך שאינו סטנדרטי, פחות אמין לגילוי hypocoagulation, מכל זמן קרישת דם. זה לא יכול להיות מומלץ לאבחנה של הפרעות של עצירת דימום.

Thromboplastin החלקית זמן, הפלזמה מופעלת

Thromboplastin החלקית זמן, הפלזמה מופעלת (APTT, מבחן קאולין-kefalinovыy) - שיטה מאוד רגישה, חושפת את תהליך קרישת הדם בעת הפעלת המנגנון הפנימי. סלקטיבי רגיש למחסור בגורמי קרישה בפלזמה (בגלל המחסור בטסיות דם וגורמים 3 טסיות דם פוצה ומנוהלות באופן חיצוני או eritrofosfatidom Kefalonia).

הוא משמש כדי לפקח טיפול הפרין, בדיקה לפני ניתוח של חולים, וכו '. ד. ערכים סטנדרטיים תלויים בדגימות משמשות kephaline, ברוב המקרים עד 37-50 (בצורה אופטימלית - 37-45).

פלזמה זמן קאולין

קאולין בפלזמה - מבחן, דומה לקודם, אבל בלי התוספת של kephaline הפלזמה (eritrofosfatida), לפיה רגיש לא רק למחסור בגורמי קרישה בפלזמה, אבל גם לחוסר גורם טסיות 3 טסיות דם. הערכת פעילות משוערת של גורם זה יכול להתבצע על ידי השוואה של זמן הפלזמה מבחן קאולין עם תוכן גבוה ונמוך של טסיות דם (נורמה - 57-70 עם).

אנחנו לא ממליצים על השימוש ברכיבי פוספוליפידים, נותנים בaPTT פעמים קרישה שווה ל 55 ים ועוד, כמו זה מקטין באופן משמעותי את הדיוק ושחזור של בדיקות, לרבות הקביעה כמותית של הפקטור VIII ותשיעי.

פלזמה זמן סיליקון

פלזמה זמן סיליקון - זמן recalcification הפלזמה, וכתוצאה מכך silikonirovaniya מחט, צינורות, pipetok, לא. זה. עם הפעלת מגע מינימאלית. המבחן רגיש להפעלה תוך-המדינה של hypercoagulable של מגע השלב של סטארט-אפ (גורמי XII וXI), עם זאת, פגיעה זו מתגלה בצורה ברורה יותר על ידי הגדרת זמן קרישת סיליקון של כל דם (על בסיס Lee-הלבן או tromboelastograficheskoy קובט siliconized תהליך הרישום).

ערכים סטנדרטיים תלויים במחקר סיליקון ונחוש הדם של אנשים בריאים לכל אחת מהמדגם הנפרד שלה. בעת בחירת סיליקון היא הטובה ביותר, המשתרע לתואר הגדול ביותר של זמן קרישה (פלזמה).

פרותרומבין (thromboplastin) פלזמה זמן

פרותרומבין (thromboplastin) פלזמה זמן (זמן מהיר, מדד פרותרומבין) מאפיין את שיעור הקרישה של פלזמה דם recalcified תהליך אתחול למכשיר חיצוני, לא. זה. הוספת thromboplastin מוח אנושית (או ארנבת).

thromboplastin הפעילה טופל על דגימות מעורבות של נורמלי (מבחן) פלזמה. פעילות thromboplastin הנפוצה ביותר עם 12-18 (בטכניקה קלסית עם Kvika- 12-13). Thromboplastin החלשה, שיטת השגיאה הגדולה יותר.

בפלזמה רגילה מבחן זמן פרותרומבין מסייע לזהות את הגירעון המבודד או מצטבר של מורכב פרותרומבין - VII, איקס, и V השני, ממנו שלושה גורמים (VII, и X השני) K-vitaminozavisimy והפעילות שלהם יורדת בהשפעת תרופות נגד קרישת דם עקיפה. בהקשר זה, מבחן פרותרומבין הוא יסוד בשליטה coumarins המינון (neodikumarin, או pelentan, sinkumar et al.) ותרופות אחרות בקבוצה זו (fenilin).

זמן פרותרומבין הוא נורמלי עם גירעון של גורמי מנגנון הפנימי של הפעלה של prothrombinase - גורם XII, XI, ט, ח (לא. זה. לכל סוגי המופיליה והפגם Hageman), כמו גם המחסור של prekallikrein וkininogen משקל המולקולרי גבוה (kininogena VM)

בספרות שונה ייעוד של תוצאות בדיקת פרותרומבין. המועיל ביותר כדי לציין את זמן פרותרומבין של המחקר והשליטה של ​​פלזמה דם בשניות (מתן המידע והפעילות של thromboplastin משמשת). לפעמים אני משתמש ביחסם של שני ערכים אלה, לא. זה. מדד (פלזמה מחקר PV, מ ,)/(פלזמה שליטת MF, מ), (שיעור .9-1.1).

צורה נוספת של הערכה של מדד זה, אשר בשימוש נרחב ביותר במעבדות, מדד פרותרומבין הוא לחשב את האחוז על ידי עריכת חשבון פרופורציות המשוב (נורמה - 90-110%), עם זאת, חישוב זה לא בסדר, כי בין הריכוז של גורמי קרישה וזמן קרישה יש לא חשבון, תלות לוגריתמים. חוץ מזה, מבחן פרותרומבין הוא רגיש רק לירידה בגורמי קרישה בהמשך 50 % הגודל הרגיל שלהם. מכוח אמצעי זה להשתמש בקביעת אחוז מדד פרותרומבין ידי עקומת דילול (1:2, 1:4, 1:8 ולא. ד.) מעורב מדגם של פלזמה רגילה. כזה עקום בנוי פעם אחת לthromboplastins פעילות ראשונית שונה (מ 12 ל 18 מ) והוא נקבע על פי מדד פרותרומבין במטופלים שנחקר. היתרון של שיטה זו מורכבת שב, כי התוצאות של כל המחקרים, לרבות בוצע בדינמיקה בימים שונים, אינו מתאים למדגמים שונים של פלזמה דם נורמלית אקראית, ולממוצע באותם פרמטרים סטנדרטיים, וכתוצאה מכך שיטת שגיאה מופחתת באופן משמעותי. מדדים, מתקבל על ידי עקומת פרופורציה ודילול של פלזמה רגילה, לא מתאים לכל אחד אחר. זה צריך להילקח בחשבון כאשר ניטור ההשפעה של תרופות נגד קרישת דם עקיפה, למדד לרדת קונבנציונלי 50 % כ מתאים להפחתה של דילול עקומת מדד ל• 25-30% בהקשר זה, הניתוח תמיד צריך לציין, איך הוא היחס פרותרומבין, מה הם תקני ביצועים לפעילות של thromboplastin.

זמן תרומבין פלזמה

זמן תרומבין פלזמה, לא. זה. זמן הקרישה של הפלזמה citrated על ידי הוספה אליו פעילות סטנדרטית של תרומבין, זהו מבחן עיקרי להערכת בשלב הסופי של קרישת דם. טיפול חשבונאי במדד זה הוא חשוב לפרשנות הנכונה של כל בדיקות קרישה האחרות, על הפרת השלב הסופי של קרישת דם חייב בהכרח להארכת זמן קרישה בכל השיטות הנ"ל.

ברוב המקרים, במהלך הבדיקה, תרומבין המשמש ריכוז זה של פתרון תרומבין, אשר, בשילוב עם נפח שווה של פלזמה דם לקרישת נותנת 12 18 מ, אבל בשימוש disfibrinogenemy ההכרה וריכוזים חלשים (מוביל לירידה של 30-35 עם).

Trombinovoe Vremya - מחוון אבחון חשוב, הפרתה נצפתה כמולד, וכאשר רכשו נפוץ (משניים) gipoprotrombinemii, ברוב disfibrinogenemy, כמו גם בהשפעת של הפרין, פירוק פיברין מוצר (PDF) ומעכבים אחרים של הרכבה עצמית וantithrombins מונומרים הפיברין. מכוח זמן תרומבין זה במקום הראשון ודסק"ש החריף וsubacute המופרע יותר ויותר, שממלא תפקיד חשוב באבחון המהיר של פתולוגיה זה.

מבחן Autokoagulâcionnyj

מבחן Autokoagulâcionnyj (רשות) - שני שלבים רגישים ביותר, הוא מתאר את התהליך של קרישת דם כאשר הוא התחיל את המנגנון הפנימי. כמו aPTT, הבדיקה אינה רגישה למחסור בגורם שביעי, אבל באותו הזמן עדותו אינה תלויה בתוכן של פיברינוגן (фактора אני) בסרום המבחן, איך זה שונה מכל דוגמאות האחרות מעידות על קרישה.

יתרון נוסף של ACT מורכב ב, שחקר דם מדולל, אשר מגביר באופן משמעותי את הרגישות של הבדיקה למחסור בגורמי קרישה ו, חוץ מזה, יישום של ACP אינו דורש השימוש בקאולין וkephaline, מאז סטנדרטיזציה של מגע ההפעלה של פוספוליפידים וזה הושג hemolysate תאי דם האדומים שלו נחקר.

ACP תקציר הוא, שב 2 מיליליטר של פתרון hypotonic (0,222 %) סידן כלוריד מתווסף 0,1 מיליליטר של בדיקת דם.

בhemolysate-סידן זה תערובת נוצר וprothrombinase תרומבין, פעילות נקבעה על ידי הוספה ברצף 0,2 מיליליטר של תערובת זו ל 0,2 פלזמה מבחן מיליליטר (כל 2 דקות במהלך הראשון 10 מ ', ולאחר מכן - לאחר כל 10 דקות ל 1 לא).

הפלזמה היא המקור של פיברינוגן נחקר, אשר בדק את הפעילות וכתוצאה מכך בתערובת של תרומבין. כפי שניתן לראות במחקרים רבים, זה יכול להיות מוחלף על ידי פלזמה של בני אדם בריאים או פתרון פיברינוגן דם. במקרה זה, זרימת הדם של המטופל מצטמצמת 0.1-0,2 מיליליטר (זה יכול להיות שנלקח מהאצבע!), מה transformiruet autokoagulâcionnyj mikrokoagulâcionnyj מבחן (MKT) וזה עושה את זה מאוד נוח לשימוש לילדים, כולל המחקר של עצירת דימום בתינוקות.

פעילות קרישה במעשה וILC בתחילה מגביר באנשים בריאים בדרך כלל מגיע למקסימום של 10 דקות, דגירה של תערובת דם-סידן (CCF), כאשר מצע קרישת הפלזמה מתרחש ב 10 ± 1. אז פעילות קרישת KKS מתחיל לרדת, הוא מציין כי איון של תרומבין נוצר בי. כאשר gemofïlïyax, הפעולה של הפרין ופעילות קרישת קרישה אחרת של KKS מופחת באופן חד, והמהלכים מקסימום מהדקה ה -10 במועד מאוחר יותר. כאשר hypercoagulable נצפה עלייה משמעותית יותר מוקדם ובפעילות תרומבין בCCS.

בעת ביצוע בדיקה במבחנה (הגדרה רק 10 דקות של דגירה, CCR) ניתן להשתמש בו כדי לפקח על טיפול בהפרין. היתרון של שיטה זו כדי לבדוק את זמן thromboplastin חלקית מופעל הוא, שהשווה את השפעת ההפרש בcephalins שונה זמן קרישת הפרין.

ACP מבוסס (MKT) הוא פיתח שיטה פשוטה ומדויקת של hemophilias האבחנה המבדלת.

עם האסמכתאות מובא בACT אינדיקציות טבלאות המרה (MKT) ניתן לבטא כאחוז וגרף - autokoagulogrammy.

כדי להעריך את מספר הפרמטרים הכלליים נמצא בשימוש נרחב קרישת דם ושיטות האינסטרומנטלי של חקירה, בעיקר באמצעות koagulografov וthromboelastography שונים.

Thromboelastography לא רק נותן רעיון של הפרמטרים הזמן של דם הקרישה או פלזמה, אלא גם על מאפייני מבנה ומכאני של קרישים נוצרו. בשנים האחרונות, חומרה ושיטות הרישום הציגו קשר הפעלת תקינה ופוספוליפידים של קרישה. קרישה גם נוצרו לביצוע ההמוני של בדיקות קרישה נפוצות - aPTT, פרותרומבין, תרומבין והקלטה אוטומטית אחרת של התוצאות.

שיטות של בידול של מחסור השונים של גורמי קרישה וקביעת כמותית שלהם

הטבלה הבאה מציגה נתונים, שהמחקר המהוסס של קרישת דם באמצעות שלוש בדיקות בסיסיות מאפשר לגורמי קרישת פלזמה שונות גירעון הבחנה קבוצה. אז, האטה רק בבדיקת קרישת פרותרומבין (הקלד אני הפרות) כאשר כל סימנים האחרים של מאפיין הנורמלי של חוסר תורשתי של גורם VII או להפחית את רמתו של גורם זה בשלבים המוקדמים של פיתוח של צהבת חסימתית או ב1-2 הימים הראשונים של טיפול עם תרופות נגד קרישת דם שלבי פעולה עקיפה, כאשר הדיכוי של הסינתזה של גורם VII הוא קדימה בהפחתת התפתחותה של כל גורמי קרישת K-vitaminozavisimyh האחרים.

הפרה של המנגנון הפנימי בלבד של קרישה, לא. זה. זמן מופעל חלקי thromboplastin וACP (тип השני), יש מחסור של XII הגורם, XI, ט, ח, Villeʙranda (לא בכל הצורות), kininogens prekallikreina וVM. פגמים אלה במחסור XII גורם קרישה תורשתית, prekallikrein וkininogen WM הוא נדיר ביותר ואינו מלווה בדימום, ואילו המחסור בפקטור VIII (המופיליה), ט (המופיליה B) וגורם פון Willebrand נפוץ מאוד (גדול מ 96 % כל ההפרעות תורשתיות דימום) ומלווה בדימום חמור. ביניהם את המקום הראשון ולנהל אבחנה מבדלת נוספת.

מחסור בפקטור XI נדיר יחסית (על 0.5-1.0 % vsex gemofïlïy), תמורה עם דימום קל מאוד (בעיקר לאחר פציעות וניתוחים) ותופס עמדת ביניים בין תת-הקבוצה הראשונה של הפרעות ללא תסמינים והמופיליה ומחלות פון Willebrand.

סוג אחר של הפרעות מאופיינות בהתארכות כזמן thromboplastin חלקית וACP, וזמן פרותרומבין. זה אופייני למחסור של V גורמים, X או השני, או לחוסר מורכב של K-גורמי vitaminozavisimyh (VII, איקס, ט, השני), שהוא ציין בצהבת חסימתית וצורות אחרות של K-מחסור בויטמין, ובעת קבלת תרופות נגד קרישת דם עקיפה.

לבסוף, כפי שניתן לראות מטבלה זו, פגיעה אפשרית בעדות של שלוש בדיקות (тип IV), שהוא ציין בהיפו התורשתי והנרכש- וdisfibrinogenemiyah (לא כל), כאשר לוקחים תרופות נגד קרישת דם של פעולה ישירה (geparina, gyeparinoidov, hirudin et al.), טיפול של מפעילי הפירוק פיברין ותרופות defibriniruyuschimi (streptokinase, האוריקינאז et al.), מופיע בantithrombins הדם וחומרי פתולוגי, חיבור מניעה (הרכבה) הפיברין-monomerov - paraproteinov, kryohlobulynov, מתחמים חיסוניים, כמו גם את הקרישה המתוחכמת, הנגרם על ידי דסק"ש. כך זמן תרומבין הוא לעתים קרובות מופרע במידה רבה יותר, וקצת קודם לכן, מבדיקות אחרות.

כאשר לוקחים בחשבון משך המחלה ואת האפשרות של קישורי מוצא או משניים תורשתיים עם מחלות אחרות ותרופות או תופעות אחרות, הנוכחות או עדר של דימום וסוגה אינו יכולה לזהות בצורה נכונה את ראשיתה של הפרעות עמוקות אלה של קרישת דם.

הכל בדיקות הבחנה מבוססות על העיקרון של תיקון, לא. זה. לקביעה, המידה שבה חשפה הפרעת דימום או בוטלה, לעומת, לא דגימות שהוסרו מפלזמת דם או מוצרי דם שהושגו מחסור מלאכותי ידוע בבירור של גורם קרישה.

לשם כך, מעבדות מיוחדות כדי ליצור אוסף של faktorodefitsitnyh הפלזמה הדם, מקבל אותם מחולים עם סט ידוע עמוק (פחות 1 %) מחסור של כל גורם ולאחסן אותם בחבילות קטנות (על ידי 0,5 מיליליטר) טמפרטורה - 30 מעלות צלזיוס. במידת צורך, דגימות אלה מופשרים ומשמשות בבדיקות אבחון.

פלזמה, היה להפשיר או להישאר בשימוש בטעות, ההקפאה-מחדש אינה כפופה ל. אין להשתמש בבדיקות הכליאה עם מעכב פלזמה חיסוני של גורם. ערכות האבחון של מספר חברות מכילה דגימות מיובשות בהקפאה של גורמי קרישה חסרות פלזמה דם שזוהו (פלזמה מצע). עם זאת, הפרעות דימום רבות ראו רק לעתים רחוקות בפרקטיקה קלינית, מחסור במרכיבי דם נורמלי מוכנים באופן מלאכותי עניין שימוש של גורמי קרישה מסוימים, ופלזמה הטרוגנית (תרנגולות, ברווזונים ואחרים.).

הטבלה הבאה מספקת מידע על התוכן של גורמי קרישה במרכיבי הדם, משמש לתיקון של בדיקות קרישה, בהתאם לתנאי האחסון שלהם. שימוש בטבלה זו, קל לפענח ראיות של כל אחת משלוש בדיקות הקרישה הגדולות. הטכניקות המתקנות של בדיקות מסוג המשמש זה, טופל על ידי מגע והפעלה של פוספוליפידים, לא. זה. קאולין-kefalinovыe או gemolizata primeneniem (בACT).

בדיקות ערבוב פלזמה של חולים עם פלזמה דם, בהחלט ידע מחסור של גורם

קבע את זמן thromboplastin חלקית מופעל בפלסמת המבחן, פלזמה רגילה (שליטה) ומחסור בפקטור VIII בבירור ידוע פלזמה (בחולים עם המופיליה), ט (של המופיליה B), и XI XII. לאחר מכן, תערובת של דגימות פלזמה ציטראט נחקרה (7/10 הנפח) וברציפות עם כל אחד מפלזמות לקויות (3/10 הנפח), מאז מחסור של הפקטור VIII ותשיעי (הצורות הנפוצות ביותר של פתולוגיה!).

לתערובת הוסיף קאולין וcephalin, ועל ידי 2 דקות נתון לrecalcification (ב 37 מעלות צלזיוס). לתערובת, שבו זמן thromboplastin חלקית מופעל אינו מנורמל, יש לו את אותו הפגם בקרישת.

אז, אם חולה הנבחן הופעל זמן thromboplastin חלקית מנורמל על ידי הוספת פלזמה דם של חולים עם מחסור ידוע ידוע של הפקטור VIII, אבל תיקנתי את הפלזמה של חולים עם דם מחסור בגורם התשיעי, יש לו המופיליה.

באופן דומה,, אבל על פי המבחן להבחין מורכב פרותרומבין מחסור פרותרומבין (איקס, V, и VII השני).

מבחן דור thromboplastin

לבידול של הפרות של המנגנון הפנימי של קרישת דם משמש לרוב קלאסי מבחן דור thromboplastin ההחלפה של רכיב טסיות דם, הכנת שדורשת השקעה ניכרת של זמן ודם, Kefalonia חסרונות דור thromboplastin המבחן הוא עבה כמותה, הצורך להכין מספר גדול של חומרים כימיים, זמן משמעותי על יישומה.

מבחן מתקנת, המבוסס על בסיס autokoagulyatsionnogo המבחן.

אבחון מהיר של בעיות הוא די בדיקה מתקנת תשובות שונות, בהתבסס על התיקון השני, אותו מרכיבי autokoagulyatsionnogo המבחן מבוסס הדם הנורמלי.

בדיקה זו היא אמינה ביותר, מהירות וקלות היישום ודורשים מעט (לא עוד 0,5 מיליליטר) סכום של בדיקת דם, ניתן להשתמש בו בילדים.

זה, כמו במבחן דור thromboplastin, משמש לתיקון של הפלזמה adsorbed וסרום ישן, אשר מחדש centrifuged-לפני המחקר. בשלושה בקבוקונים שפכו 2 מיליליטר 0,222 % פתרון סידן כלורי ושניים מהם נוספו 0,1 מיליליטר adsorbed של פלזמה רגילה (1-אני בקבוקון) ו 0,1 סרום נורמלי ישן מיליליטר (2-אני בקבוקון). שלושה צינורות האחרים פיפטה 0,2 מיליליטר של פלזמה רגילה citrated. אז לכל הצינורות עם פתרון סידן כלורי נוסף 0,1 מיליליטר של דם ציטראט של המבחן.

בדיוק 4 דגירה דקות, התערובת של פעילות הקרישה שלה נבדקה על פלזמה רגילה.

הירידה החדה בפעילות הקרישה רק במבחנה הראשונה (BaSO הרגיל₄-פלזמה) זה מצביע על חוסר סבלנות של גורם התשיעי (המופיליה B), רק בצינור השני (סרום מישן) - הגירעון של הפקטור VIII (המופיליה); אם תיקון מתרחש בשני הצינורות (חזק באותה מידה), לאחר מכן, ברור ש, יש מחסור של XI גורם או XII (סנטימטר. שולחן. 14).

בדיקה זו היא רגישה מאוד, כמחקר נערך בהתגרש 20 בזמן פיצוי גורם הדם 3 טסיות הדם Hemolysate. מגיב רק מועסק - פתרון hypotonic של סידן כלורי, מה שהופך את המדגם ציבורי.

באותה מידה פשוטה היא השיטה של ​​דגימות תיקון, בוצע על בסיס בדיקה לגורם בידול חוסר prothrombin השני, и V השביעי +, איקס (שולחן).

על מנת להפריד את החוסר שביעי גורם וX, בדיקות נוספות שבוצעו קרישה עם התוספת של ארס נחשי צפע פתרון הפלזמה דם למד - תרופות lebetoks (ריכוז כזה נבחרים של רעל, kephaline שבנוכחות של סידן כלורי גורם קרישה 20-25 עם; כל מרכיבי לקוחים בסכום 0,1 מיליליטר ולערבב) (הטבלה שלהלן).

עם אותה מטרת ההכנה משמשת ארס צפע ראסל, מגורים בהודו (הכנה stipven).

אבחנה מבדלת תושלם, אם יהיה צורך, על ידי כימות הגורמים הנדירים או מעכבים חיסוניים ספציפיים, מדוע שיטות רגישות מאוד, סטנדרטיות מיוחדות. טכניקות בנייה אלה משמשים עקומות דילול של דגימות מעורבות של פלזמה דם נורמלית עם חוסר התיקון של גורמים, בנוסף למבחן. עקומות אלה מגדירות את הפעילות של גורם המבחן בפלזמה של חולים.

במיוחד קביעת כמותית חשובה של פקטור VIII ריכוז ותשיעי, ואת הנוכחות של מעכבים בחולים עם המופיליה A ו- B (במיוחד לפני ובמהלך הניתוח וטיפול בתחליפים אינטנסיביים), כמו גם דימום לאחר לידה פזרני נדחית, כאשר יש צורך לבדל את דסק"ש ופתולוגיה נדירה - ההופעה של גורם מעכב חיסון השמיני (עדיין הרבה פחות - פקטור V).

עם מחסור עמוק של גורם XIII (פתולוגיה תורשתית נדירה מאוד) כל בדיקות הקרישה נורמליות, אבל פירוק קרישים באוריאת 5M ו7M.

זה עוזר להבחין מחסור שונים של גורמי קרישה גם חשבון במידה ו, במיוחד, מבחינת בדיקות קריאות נרמול לחולים הבאות עירוי לוריד של מוצרי דם, לא. זה. מותאם לחיות על ידי השיטה. 3. Barkagan.

טכניקה זו יעילה במיוחד כאשר הבדל גדול בגורם גזירה תוחלת חיים שבמחזור. אז, מורכב פרותרומבין משך מחצית החיים משתנה מכמה שעות (фактор שביעי) לכמה ימים (фактор השני). עמדת ביניים ביניהם לקחת X פקטור (2-2.5 ימים) וV (12-18).

לכן, לאחר עירוי מאסיבי של עליית מדד פרותרומבין סילון הפלזמה עם גורם השביעי החסר הוא קצר מאוד, מחסור של V גורם - מעט יותר (כ 4-6 פעמים), מחסור של X פקטור ו, במיוחד, השני לתקופה ארוכה יותר (על 1-2 ימים). זה משמעותי בהקשר זה וההשפעה על תרופת מדד פרותרומבין PPSB (תרכיז של גורם שביעי, ט, и X השני). הוא גם מנרמל זמן פרותרומבין, חוסר שביעי גורם, ועמיד יותר לזמן קצר (פעמים רבות!) מחסור של X הפקטור והשני. מאז תרופה זו היא לא פקטור V, מחסור זה אינו תיקן אותם.

הבדל דומה מתגלה בטיפול עירוי והחלפה של קרישת גורמי מנגנון פנימי (XII, XI, IX и השמיני), שרשום מבחן thromboplastin חלקית מופעל.

מעניין במיוחד הוא קריאות השמיני וaPTT גורם תיקון רמת רמקול כאשר טיפול עירוי של המופיליה ומחלות פון Willebrand. הראשון של תנאים אלה מזוהה דימום מייד שיפור מרבי לאחר עירוי (לרסס, מהר!) פלזמה Antihemophilic או ממשל קריופריציפיטט, אחרי די מהיר (ל10-18 שעות) ירידה מתמדת בה, בעוד vWF הוא ציין כמה פעילות קרישת גידול בתוך כמה שעות לאחר עירוי, ולאחר מכן ירידתו - הרבה יותר לאט, מ. בהקשר זה, בטיפול במחלתו של פון Willebrand הוא לעתים רחוקות משמש יותר עירויי חילוף, מ המופיליה.

מחקר של הפעילות הפונקציונלית של גורמי קרישה ורכיבים של kallikrein-kinin ומערכות Fibrinolytic באמצעות מצעי chromogenic

השיטות המבוססות על המחקר של הפעילות של אנזימי מפרקי חלבונים ומעכביהם, מעורב בקרישת דם, היווצרות פירוק פיברין וkinin, בעוצמה ובקצב המחשוף במיוחד רגיש לפפטידים אנזימים אלה, אשר שוחרר במהלך הפירוק של סוכן צביעה (ב-нитроанилин).

התואר של צבע של התערובת מגיבה נקבע על ידי spectrophotometry, ועוצמתה נשפטת על הפעילות של האנזימים המתאימים (גורם קרישה, kallikreina, plasmin ואחרים.), ולעכב את התהליך - את הפעילות של מעכבי אנזים.

אז, למשל, השפעה של הפרין ובאנטי-טרומבין III ניתן להעריך על ידי מחשוף של מצעי chromogenic החלשת הגורם Xa או תרומבין, והפעילות של α₂-antiplasmin - להפחתה של מצע plasmin chromogenic המקביל. מצעי Chromogenic או שיש לי ייעוד מספרי (למשל, S-2,222), או מכונה hromozinami קידומת מקוצרת, המציין את האנזים, שהמצע רגיש (למשל, Chromozym PL - субстрат плазмина, Chromozym TH - מצע תרומבין, Chromozym PK - prekallikreina / kallikreina מצע, וכו '. ד.).

מצעי Chromogenic להרחיב את היכולות של המחקר של המערכת לעצרת הדם, אבל אין מספיק זמין למעבדות רבות. חלק מהמחקרים, עשיתי עם העזרה שלהם, יש להם יתרונות על פני בדיקות קרישה קונבנציונליות ולתת להם את התוצאות התואמות; במקרים אחרים, השימוש בם מפשט ומאיץ את מחקר, זה עושה את זה מדויק יותר; במקום השלישי - יש טכניקות אלה משמעות עצמאית ולא ניתן להחליף בדיקות קרישה (למשל, prekallikreina הגדרה).

נחישות חיסונית של הרכיבים של המערכת עוצר דמום

נחישות חיסונית של הרכיבים של המערכת לעצרת הדם מתבצעת על ידי שיטות:

• Immunoprecipitation;
• Immunoelectrophoresis;
• Radioimmunoassay ואחר עם antisera המתאים

תוכן משוער זה של אנטיגן בפלזמה של גורם קרישת הדם (או שברים שלה), לא פעילות פונקציונלית, אשר יכולה להיות מופחת באופן דרמטי עם אנטיגן הנורמלי בפלזמה. מצב זה אופייני לכל המקרים, כאשר מסונתז בגוף נורמלי (פונקציונלי פגום) גורמים, שמירת antigenicity, אבל חסר היכולת להשתתף בעצירת דימום.

זה מאפשר לך להבחין בין ההפסקה המוחלטת של סינתזה של גורמים רלוונטיים והיצירה של צורות חריגות.

עם זאת, כמה רכיבים של המערכת לעצרת הדם ניתן לקבוע רק מערכת חיסון.

קבוצה זו כוללת מחקרים חשובים כגון, כהגדרת הרכיבים הבאים:

• ב-тромбоглобулина;
• A2-макроглобулина;
• протеинов и S C;
• אנטיגנים הפקטור VIII:C и השמיני:ר_זיכרון;
• פירוק פיברין מוצר (PDF);
• kompleksov neoantigenov תרומבין - אנטי-טרומבין III וplasmin - antiplasmin;
• מספר בדיקות אחרות.

לכן, מחקר חיסוני להשלים את ההערכה התפקודית של הרכיבים השונים של המערכת של עצירת דימום באופן משמעותי.

בדיקות אבחון, המבוסס על השימוש בסמים כריאגנטים מארס הנחש

זה כבר הוקם ארוך, שארס נחש רב מכיל אנזימי מפרקי חלבונים פעילים ביותר, קרישת דם גורם ואת ההשפעה על הקישורים השונים של מפל הקרישה. כתוצאה מכך, ארס נחש ומבודד מcoagulase שימוש נרחב לגילוי הפרעות עוצר דמום, קביעה כמותית של גורמי קרישה, איתור וכימות של מתחמי מונומר הפיברין המסיס (RFMK) ומספר מחקרים אחרים.

דגימות של ארס נחש היא לעתים קרובות הרבה יותר קלה ולעשות אבחנה מהירה יותר של הפרעות של עצירת דימום.

הטבלה מציגה את הנתונים על מנגנון פעולה של רעלים בקרישת דם, ולהשתמש ביכולות האבחון של כל אחד מהם.

יכולות אלה להרחיב עוד יותר את השימוש בו זמני של מספר רעלים ובדיקות קרישה הנפוצה פשוטות. אז, למשל, השימוש בו זמני של בדיקות קרישה עם עייף צפע ארס, ועושה את זה קל להבחין בין המחסור בגורם שביעי, и Х-V השני (בטבלה שלהלן), ועם תיקון נוסף של הפלזמה הרגילה המסוננת (V גורם הכח והשני) -defitsit X פקטור וV.

קביעת תרופות נגד קרישת דם הפיזיולוגי הבסיסיות

החשוב ביותר הוא קביעת הפעילות של תרופות נגד קרישת דם הפיזיולוגי העיקריות - אנטי-טרומבין III, ירידה שניתן לקבוע מבחינה גנטית (קרישיות יתר ראשוניים) או משניים בשל הצריכה אינטנסיבית (דסק"ש, פקקת מאסיבי) או מואץ חילוף חומרים (lyechyeniye gyeparinom, L-asparaginazoй, אמצעי מניעה סינתטית) ומצור של מתחמים חיסוניים, paraproteinami, פיברונקטין, חלבוני שלב אקוטיים.

בכל מקרה, ירידה בפעילות של אנטי-טרומבין III מתחת 60-65 % הוא תומך בקרישת intravascular, זה עושה אפקט נוגד קרישה פחות מובהק של הפרין. עם זאת, לעתים קרובות מאוד בין רמת אנטי-טרומבין III וירידה ברגישות להפרין אין חוק-ציות.

זה בדרך כלל היחלשות הפעולה נוגדת הקרישה של הפרין באופן משמעותי שולט על מידת הירידה בפעילות של אנטי-טרומבין III. הוכיח, שגירעונות בצורות שונות של הפרין הזיקה אנטי-טרומבין III שלה יכולים להשתנות בדרגות שונות. חוץ מזה, שברים שונים של הפרין, היחס שבתרופות מאוד לשינוי, יש גם זיקה שונה לאנטי-טרומבין III. לכן, כמעט, חשוב לחקור גם את הפעילות בפועל של אנטי-טרומבין III, ויכולתו להפוך בהשפעת נוגדת הקרישה הפרין מהיר משחק.

יש Antikoagulyantnaya פעילות אנטי-טרומבין III

יש Antikoagulyantnaya פעילות אנטי-טרומבין III זה נקבע על ידי היכולת של הפלזמה המבחן (התגרש - השיטה או Copley ינטרשטיין defibrinirovannoй teplovoй denaturacieй ב 56 מעלות צלזיוס - שיטות Loligera, Abildgaarda et al.) להשבית לתקופה מסוימת של קלט מתרומבין מחוץ. פעילות תרומבין השייר בפלזמה יכולה להיות שנקבעה לפעילות הקרישה שלה (של fibrinogene, סולפט בריום הפלזמה adsorbed) או על ידי מחשוף של מצע chromogenic, רגיש לתרומבין או פקטור Xa (inaktiviruet poskolyku אנטי-טרומבין III וגורם эtot).

הפרין-kofaktornaya aktivnosti

פעילות קו-פקטורי הפרין כלול באנטי-טרומבין הפלזמה III תקופה ארוכה יותר שנקבעה על ידי סובלנות מבחן הפלזמה להפרין, אשר יכול להיחשב כמעידה, כי זה נותן פיזור רחב מאוד של ערכים נורמלים ולהתרבות מספיק.

הרבה יותר מדויק בדיקות izvodimy PLAY, שחקר את ההשפעה של ריכוזים שונים של הפרין בפלזמת מחקר זמן תרומבין, המכיל כמות קטנה של טסיות דם. ההשוואה מתבצעת עם התארכות זמן תרומבין שליטה פלזמה רגילה, לאשר מתווספות אותו הפרין הדגימות.

אז, תרומבין-הפרין assay ללמוד הפלזמה הדם מתווספים לסכום של הפרין, אשר להאריך שליטה בזמן תרומבין עם 15 ל32-35 עם (ריכוז נמוך) ועד 95-110 (ריכוז גבוה של הפרין). מנתונים אלה, מדד הפעילות מחושב antithrombins פלזמה (AAP) ופלזמה נוגדת קרישה מילואים (CBA).

כמו כן, נעשה שימוש נרחב בטכניקות דומות כדי להעריך את מידת איון של תרומבין בבדיקות קרישה, ומצעי chromogenic.

זיהוי חיסוני של אנטיגן של אנטי-טרומבין III

זיהוי חיסוני של אנטיגן של אנטי-טרומבין III זה מאפשר לך להבחין בין סוגים שונים של קרישיות יתר:

• עם סינתזה לקויה של אנטי-טרומבין III (רמות נמוכות של סמן אנטיגני כראוי מופחתות פעילות);
• עם סינתזה השתמרה צורותיה חריגות ופונקציונלי פגומות (רמת סמן אנטיגני היא הרבה יותר גבוהה, פעילות מ).

חלבוני C ו- S, тромбомодулин и₂-macroglobulin נקבע על ידי שיטות immunoenzymatic.