Nasledstvennaya gemoliticheskaya anemiaa, johtuen aktiivisuuden pyruvaattikinaasin puutos veren punasolujen

Nasledstvennaya gemoliticheskaya anemiaa, Liittyvät punasolujen pyruvaattikinaasi puutos - melko harvinainen hemolyyttinen anemia, joka periytyy peittyvästi tavalla, Se antaa kliiniset oireet in homotsygootit, etenee merkkejä solunsisäisten Hemolyysin, makrosytoosia punasolujen, alhainen kalium. On yli 200 tapaukset Homotsygoottisen harjoittajien alijäämän piruvatkinaznoy toiminnan.

Patogeneesi

Pyruvaattikinaasi on yksi entsyymeistä, päätökseen Glykolyysivaiheen. Tämä linkki Glykolyysivaiheen ja ATP muodostivat nikotinamiddinukleotid. Suurimmalla osalla potilaista, joilla puutos pyruvaattikinaasin aktiivisuus pienenee sisällön punasolujen näiden kahden metaboliitin, Joissakin tapauksissa, ATP-sisältöä on normaali, mutta häiriintynyt vakaus ATP inkubaation aikana. Normaalin tason ATP osoitteessa merkittäviä retikulosytoosi. Tämä johtuu läsnäolo retikulosyyttien ja mahdollisuus mitokondrioiden ATP-ei vain glykolyysin, mutta myös koska oksidatiivisen fosforylaation.

Seuraus pyruvaattikinaasin puutos Se on myös kertyminen tuotteiden glykolyysin, muodostettu aiemmissa vaiheissa - fosfofenolpiruvata, 3-fosfoglyseraat-, ja etenkin 2,3-difosfoglyseraatti. Sisältö piruvatanlaktata vähentää punasoluja.

Puute ATP punasolujen pyruvaattikinaasia puutos Se johtaa häiriöitä funktion ATP-aznogo pumppu punasolujen ja kaliumin menetystä ionien, jolloin konsentraatio natrium-ionien erytrosyytteihin ei-kasvava. Tämä aiheuttaa sisällön vähentymistä yksiarvoisten ionien erytrosyytteihin, nestehukka solun ja sen kutistuminen. Tätä ilmiötä kutsutaan dessikotsitoz. Väheneminen punasolujen vettä monimutkaistaa hapetus ja hapen vapautumista hemoglobiinista. Tässä suhteessa, tiettyjä korvaavia rooli merkittävä kertyminen erytrosyyttien 2,3-hapon difosfoglitserinovoy.

Affiniteetti hemoglobiinin hapen alennetaan sen vuorovaikutus 2,3-difosfoglyseraatti. Siten, suuremmilla pitoisuuksilla 2,3-difosfoglyseraatti palaa happea kudoksiin helpottuu.

Kliinisiä oireita aktiivisuuden pyruvaattikinaasin puutos

Kliinisiä oireita puutos pyruvaattikinaasigeenin toimintaa riippua hemolyysin. Joissakin tapauksissa, lisääntynyt hemolyysin ilmenee syntyessään ja siihen liittyy esiintyminen vakava hemolyyttinen kriisistä, aiheuttaen tarvetta verensiirtoihin säilyttää hemoglobiinin osa-normaalille tasolle. Muissa tapauksissa tauti voi esiintyä lähes oireeton kanssa ensimmäisiä merkkejä kasvoi Hemolyysin (subikterichnost kovakalvon ja ihoa) vuotiaiden 17-30.

Yleisesti; verrattuna microspherocytosis, pyruvaattikinaasi puute on ankarampaa.

Lähes kaikki potilaat, joilla ilmeni selvänä perna. Hienoinen kasvu sen paljastaa joitakin poikkeamia heterotsygoottisten harjoittajat, vaikka heillä anemia, yleensä, puuttuva. Määrä potilaita mahdollisten splenomegalia. Merkittävä kasvu maksan harvoin löytyy. Yksittäistapauksissa, joissa potilaiden säärihaavat tunnistettu.

Laboratorio indikaattorit toiminnan pyruvaattikinaasin puutos

Suurin osa potilaista puutos pyruvaattikinaasin aktiivisuuden havaittiin kohtalainen anemia (4,34- 6,21 mmol / l, tai 70-100 g / l), Kuitenkin aikana kriisien hemoglobiiniarvoa voidaan laskea 3,1 3,72 mmol / l (50-60 G / l). Sisältö eritrotsitov- 2,5-3,0 T 1 l. Hemolyyttinen kriisi voidaan aiheuttama infektio. Tapaukset hemolyysin voitto kuukautisten aikana.

Punasolujen potilailla, joilla pyruvaattikinaasin puutos ominaista makrosytoosia kanssa normohromiey, lievää anisosytoosia ja poikilosytoosia. Siellä oli reilu polychromatophilia. Joskus löytyy mishenevidnye punasoluja ja punasolujen kanssa scalloped reunoja tai muodossa Mulberry, usein tunnistettu basofiilisten punasolujen punktatsiya, Jolly corpuscles. Joidenkin potilaiden perifeerisessä veressä havaittiin merkittävä määrä erythrokaryocytes, kriisin aikana, se voidaan nostaa jopa 60-70 %. ESR, valkosolujen, leukogram, verihiutalemäärät normaalin rajoissa. Kuten muiden hemolyyttinen anemia, luuytimessä paljasti terävä ärsytystä punainen alkio hematopoieesia.

Taso Bilirubiinin, yleensä, lisääntynyt epäsuora.

Vapaan plasman hemoglobiini normaali, mutta voidaan alentaa tasoa haptoglobiini. Hemosiderin virtsassa on poissa. Sikiön hemoglobiinin sisältöä ja hemoglobiini₂ normaalin rajoissa.

Osmoottinen vastus punasolujen pyruvaattikinaasin puute useimmissa tapauksissa normaalissa, joskus vähentää, kun päivän inkuboinnin. Autogemoliz, yleensä, päivitetty eriasteisesti. Tapauksia pyruvaattikinaasi puute normaali autogemolizom. Ensimmäisessä raportoitu tapauksia pyruvaattikinaasin puute on rekisteröity tyypin II autogemoliza, korjaa lisäämällä ATP: tä, ja ei korjata tai hieman korjata lisäämällä glukoosin. Sen jälkeen, monissa tapauksissa on kuvattu entsyymin puutos tyypin I autogemoliza tai ei lainkaan. Siksi ei ole suositeltavaa soveltaa menetelmää autogemoliza erotusdiagnoosia hemolyyttinen anemias. Elinikä punasolujen puutos pyruvaattikinaasin toiminta on aina lyhenee.

Tyyppi perintö pyruvaattikinaasia toimintaa peittyvästi periytyvä. Heterotsygootit käytännössä terve, Mukaan eri tutkijoiden, vakavuus alijäämä ovat vaihdelleet 50 että 70 % normit.

Diagnostinen aktiivisuus pyruvaattikinaasin puutos

Diagnoosi pyruvaattikinaasin puutos veren punasolujen voidaan odottaa, että ne pystyvät tapauksessa hemolyyttinen anemia, virtaava yli vuoden kasvu perna, ilman merkkejä ääreisverenkierron tahroja microspherocytosis, elliptotsitoza ja stomatotsitoza.

Laadulliset testit aktiivisuuden määrittämiseksi pyruvaattikinaasin. Tätä tarkoitusta varten, menetelmä on laajalti käytetty fluoresoiva tahra, perustuvat, että reaktion kuluessa, katalysoivat pyruvaattikinaasia, nikotinamiddinukleotid hapetettu ja fluoresenssi häviää.

Aktiivisuus pyruvaattikinaasin terveillä henkilöillä vaihteli 4,0 että 7,7 mmol (min / 1010 punasolujen) tai 4,0 että 7,7 Teho. Useimmat homotsygoottiset kantajia taudin entsyymin vähemmän 1 Teho. Voi kuitenkin olla tapauksia hieman vähentynyt entsyymin. Diagnoosi harvinainen hemolyyttinen anemia on erittäin vaikeaa, ja diagnoosi voidaan tehdä vain tutkimuksessa entsyymikinetiikka.

Erotusdiagnoosia hemolyyttinen anemia, liittyvä puute pyruvaattikinaasia

Erotusdiagnoosia hemolyyttinen anemia, liittyvä puute pyruvaattikinaasia, tarpeen suorittaa muita perinnöllinen hemolyyttinen anemia.

Sillä useimmilla potilailla puutos aktiivisuuden pyruvaattikinaasin toisin yksittäisten, kärsimystä microspherocytosis, elliptotsitozom, stomatotsitozom, hemolyyttinen anemia, ilmastoitu vaunu epävakaa hemoglobiini, ja talassemia tauti periytyy peittyvästi periytyvä, että tämä patologia löytyy vain saman sukupolven ja lähes koskaan nähnyt vanhempien keskuudessa.

Kun perinnöllinen anemia, ilmastoitu vaunu epävakaa hemoglobiini, erityisesti vaikea tauti, joskus proband on ensimmäinen kantavan mutaatio, ja sitten tauti lähetetään seuraavan sukupolven. Siksi erotusdiagnoosi on tehtävä hemoglobinopatiat, ilmastoitu vaunu epävakaa hemoglobiini, sekä väistyvä perinnöllinen hemolyyttinen anemia, aiheuttama puutteellinen toiminta muiden entsyymien.

Olla tehtävä hemoglobiini vakaus, Yego elektroforeesi. Sulkea muut fermentopathia tutki toimintaa muiden entsyymien punasolujen, ja jättää autoimmuuni hemolyyttinen anemia suorittaa Coombs, agregatgemagglyutinatsionnaya.

Fluoresoiva menetelmä määrittämiseksi aktiivisuus piruvatkiiazy Beutler

Reagenssit.

1. Fosfoenolpirovinogradnaya happo (tritsiklogeksilammoniynaya suola) 0,15 M liuos, neutraloidaan pH-arvoon 7,0-8,0 0,2 M NaOH: (0,03 ml).
2. ADF 0,03 M liuos, neutraloidaan (0,1 ml).
3. NAD-N- 0,015 M liuos, neutraloidaan (0,1 ml).
4. Magnesiumsulfaatti 0,08 M liuos (0,1 ml).
5. Fosfaattipuskuri liuokseen, jossa oli kalium- 0,25 M, pH 11 7,4 (0,05 ml).
6. Distillirovannaya vesi (0,62 ml). Seos voidaan säilyttää - 20 ° C: ssa ei ole yli viikko.

Menetelmä.

Tutkimuskäyttöön verta, otettu hepariini tai natriumsitraattia. Se sentrifugoidaan, hengittävä ja valmistella plasman 20 % keskeyttäminen punasolujen lisäämällä neljä tilavuutta isotoninen natriumkloridiliuos.

Punasolujen suspensioon määrä 0,02 ml sekoitetaan 0,2 ml reagenssia ja inkuboitiin 30 minuuttia 37 ° C. Pisara asetettiin suodatinpaperille, ja lukemassa fluoroskoopin. Perustason fluoresenssi havaittiin heti lisäämisen jälkeen punasolujen seokseen ennen inkubaatiota. Normaalisti 30 min inkuboinnin se katoaa, ja aktiivisuus pyruvaattikinaasin puutos edelleen. Tämä on, NADH joka fluoresoi vaikutuksen alaisena UV-säteilyn alueella, lähellä näkyvä, katsoo NAD ei fluoresoi. Koska ratkaisu edellä on epävakaa ja helposti hajoaa, edellyttää seurantaa. Sinun tulee huolellisesti erottaa kerros valkosolujen, koska aktiivisuus pyruvaattikinaasigeenin puutos punasolujen entsyymiaktiivisuus valkosoluissa voi olla normaali.