Diagnoosi immunologisesti aiheutti hedelmättömyyttä
Aikana pitkä avioelämä ilman ehkäisyvalmisteiden, ja läsnä mikro-alueen limakalvoja sukuelinten voi tapahtua vähitellen paikalla immunisointi antigeenejä siittiöiden. Lääkärintarkastus Puolisoiden, koostuu karu avioliitto, ei voi selvittää syy hedelmättömyyttä 10-15 % tapaukset. Se on tässä ryhmässä hedelmättömiä puolisoiden hakiessaan erityinen tutkinta- salainen kohdunkaulan kanava, siemennesteen plasman ja seerumin sperma vasta-aineita havaitaan usein (ASAT), Käyttää laadullisia ja määrällisiä testejä immunologisen tutkimuksen.
Postkoytalnыy testi (FCT)
Postkoytalnыy testi (FCT) Se viittaa laadullisiin immunomääritys. Negatiivinen testitulos osoittaa puuttuminen siittiöiden kohdunkaulan kanava salaisuus, mutta et voi tunnistaa aiheuttaa poissaolollaan.
Menetelmä. Useissa liikkuvien siittiöiden kohdunkaulan kanava salaisuus, saatu yhdyntä, laajuuden määrittämiseksi loukkauksista niiden läpäisemään kyky hedelmättömyyttä tai immuniteetti niitä lima kohdunkaulan kanava.
FCT on tarpeen suorittaa seuraavien edellytysten: Tutkimus olisi toteutettava vuosina ovulaation, joka paljasti colpocytologic tai jotakin muuta menetelmää, etukäteen raittiutta puolisot sisällä 2-3 päivää.
Menetelmät. Kun tavallinen yhdynnän naiselle 30 minuuttia tulisi olla selällään, taivutus polvet. Douching ja puhdistus kielletty, tarvitsee vain terveysside, joka poistetaan aikana kaapata tutkimiseen limaa kohdunkaulan kanava. 2-4 tunnin kuluttua, sallittua ja jälkeen 6-10 tuntia (aika, kulunut ennen tutkimusta, ilmoitetaan analyysi) yhdynnän jälkeen kohdunkaula altistuvat käyttäen peili Cuzco ja endoservikaalisia limaa imettiin tai tuberkuliiniruiskua (ilman neulaa), pipettiä kuminen, tai polyeteenistä katetrin.
Kun peset välinettä ei tulisi käyttää desinfiointiaineet, sillä ne vaikuttavat siittiöiden liikkuvuutta. Yksi tippa tuloksena liman kohdunkaulan kanavan siirretään lämmitettiin lasilevyllä, päällystetty peitelasi, Alueella voidella parafiiniöljyyn vuotaa. Formulaatio heti mikroskopiruyut (okulaari 7X, 40X tavoite), määritetään määrä ja luonne siittiöiden liikkuvuutta. Lääke voidaan havaita aktiivinen siittiöiden progressiivinen liikkuvuus, värähtelyliike (ilmiö keinu) ja kiinteät.
Hyväksytyt tarjoavat viisi eri päätelmien FCT.
- Erinomainen (normien): viidessä näkökentät jopa 15-20 aktiivinen siittiöiden etenevä liikkuvuutta ja lisää. Siittiöiden ilmiö värähtely on alle 25 %.
- Tyydyttävä: viidessä näkökentät ylös 10 aktiivinen siittiöiden progressiivinen liikkuvuus ja vähemmän 25 % siittiöiden ilmiö keinu.
- Huono: vähemmän 5 siittiöitä viidellä näkymä.
- Miinus: Koska siittiöiden.
- Kyseenalainen: viidellä katsottuna enemmän 5 aktiivinen-liikkuvien siittiöiden ja lisää 25 % ilmiö keinu.
Kun viides tyyppi FCT usein havaittu immuuni yhteensopimattomuus puolisoiden, siis tarpeen määrittää ACAT. Tunnistaa ACAT salaisuus endoservikaaliset, plasma, siemenneste tai veri seerumin ja näyttää ne (agglutinaation tai immobilisoitu) Se vaatii nimittämistä määrällisten immuunimääritykset.
Negatiivinen PBC opinnot alkavat määritelmä läpäisemään (tunkeutuminen) kyky siittiöiden kautta vihlova testi (Pe) ja alttius sperma eritystä kohdunkaulan kanava käyttämällä testikosketin siittiöiden ja kohdunkaulan liman (TKSTSS).
Penetracionnyj testi (TP)
Ohut kapillaari pituus 10 Katso kirjoitettu aikana ovulaatio lima kohdunkaulan kanava. Yksi avoin pää kapillaarin sulkeutuu savi, ja toinen on sijoitettu koeputkeen testi tuore huudahtaa (ei enää 3 tunnin kuluttua siemensyöksy). Savi, että kapillaari on kiinnitetty pystyasentoon putkeen. Näyte inkuboidaan termostaatti lämpötilassa 37 ° C 1 ei. Laadusta huudahtaa arvostellaan tunkeutumissyvyys siittiöiden lima kohdunkaulan kanava. On olemassa kolmenlaisia kasvihuonekaasupäästöjen.
- Myöntävä - Syvyys tunkeutuminen (suurin etäisyys senttimetreinä, matkusti ainakin yhden siittiöiden) yläpuolella 5 cm; määrä siittiöiden kannalta suurin levinneisyys lisää 5 näköpiirissä, ja määrä liikkuvia siittiöitä ylempään kolmannekseen kapillaarin on suurempi kuin 50 %.
- Kyseenalainen - Tunkeudu syvälle jopa 5 Katso vähemmän siittiöiden määrä 5, heidän liikkuvuutensa ylimmästä kolmanneksesta kapillaarisen saavuttaa 50%.
- Miinus - Syvyys tunkeutuminen siittiöiden saavuttaa 1 cm.
Siittiöiden kykyä levinneisyys Se riippuu vaihe kuukautiskierron. Hän alkaa nousta 9 päivänä kuukautiskierron,, vähitellen aktivoimalla, huipussaan ilmaus vuosina ovulaation, pidetään tällä tasolla kaksi päivää, ja sitten vähitellen vähenee.
Testikosketin siemennesteen ja kohdunkaulan liman (TKSTSS)
Diassa on laittaa pieni tippa limaa kohdunkaulan kanava, otettu naisten aikana ovulaation, ja useita samankokoisia pisara siemennesteessä. Molemmat tippaa peitetään suojalasi, joka on hieman painettuna, liittyi laskuun. Lääkeaine on sijoitettu kosteaan kammioon (Petrimalja kostutetulla pumpulipuikolla) ja inkuboitiin termostaatilla lämpötilassa 37 ° C 1 ei.
Näissä olosuhteissa, normaali siittiöiden tunkeutuvat salaisuus normaali kohdunkaulan kanava, kuten voidaan nähdä mikroskoopilla suurennuksella 200X. Huomioimaan reaktio lähellä rajaa kahden median laskee numero läpäisemään salaisuus kohdunkaulan kanava sperma kahden vierekkäisen näkökenttää.
Erinomainen TKSTSS kahdessa näkökenttää paljastaa lisää 25 aktiivisesti liikkuvien siittiöiden ilmiö swing vähemmän 25 %. Jos tyydyttävää TKSTSS kahdessa näkökenttää paljasti lisää 15 aktiivisesti liikkuvien siittiöiden, TKSTSS matalan - alle 15. Negatiivinen poissa levinneisyys TKSTSS, jos kyseenalainen - ilmiö värähtely ylittää 25 %.
Tässä testissä, kuten PCT, ilmiö keinu, yli 25 %, todennäköinen, Se osoittaa läsnäolon ACAT ja edellyttää nimittämistä määrällisten immuunimääritykset.
Siemennesteellä ja kohdunkaulan eritteiden kanava hedelmättömiä ja hedelmällinen miesten eri määriä käyttämään TKSTSS tunnistaa hedelmättömiä aviomies.
- Esimerkki 1. Taken salainen kanava kohdunkaula naisilla lapsettomille pareille ja ohjaus huudahtaa tervettä miestä. Erinomainen TKSTSS merkitsee heikkoa tunkeutumiskyky siittiöiden miehensä, ja alttius normaalin erityksen kohdunkaulan kanava.
- Esimerkki 2. Ottanut täysin salaisuus kohdunkaulan kanava terve nainen ja hänen miehensä siemennestettä lapsettomille pareille. Huono TKSTSS merkitsee heikkoa tunkeutuminen siittiöiden.
- Esimerkki 3. Taken salainen endoservikaalisia naisten lapsettomille pareille ja ohjaus huudahtaa tervettä miestä. Huono TKSTSS osoittaa alemmuuskompleksi salaisuus kohdunkaulan kanava, joka ilmeisesti eivät läpäise normaalia siittiöiden.
Määrällinen immunologiset kokeet
Mikroagglyutinatsionny testi Friberg
Mikroagglyutinatsionny testi Friberg (TF) riittävän herkkiä ja on saatavilla kliinistä taudinmäärityslaboratorioita. TF: llä voi määritellä, ACAT ja agglutinaation tiitteri eri materiaaleista (plasma huudahtaa, otteita limaa kohdunkaulan kanava ja seerumissa molempien puolisoiden).
Reagenssit:
1. Fosfaattipuskuroitu suolaliuos (FSB) 0,01 М pH 7,2-7,4.
2. Vazelinovoe öljy.
Laitteet: mikroskooppi, tuberkuliiniruiskua, mikroagglyutinatsionnye pipetillä 1 ml, mikropipetin kapasiteetti 0,1 ml.
Menetelmä. Verikoe seerumi inaktivoitiin inkuboimalla inkubaattorissa 56 ° C 30 m. Huudahtaa, saatu masturbaatio, heti laimennetaan siten, että FSB, pitoisuus siittiöiden oli 40 miljoona. sisään 1 ml.
Koska materiaalin (plasma huudahtaa, poimia salaisuus kohdunkaulan kanava tai seerumin) valmistelee sarja laimennoksia 1:4 että 1:128 käyttäen nestemäisiä laimentamiseen FSB. Kuopissa parafiiniöljyllä mikroagglyutinatsionnyh planchettes tuberkuliiniruiskuun neulalla otetaan käyttöön (alle vazelinovoe öljy) Pieni tippa kutakin laimennosta testimateriaalin. Sen jälkeen, kun kukin näyte pestään neljä kertaa ruiskun. Kussakin laimennus lisätään 5 kertaa pienempi pisara huudahtaa, ja 4 tuntia huoneenlämpötilassa havaitaan agglutinoi. Viimeisin jalostus, jolloin mikroskoopilla klo 100X suurennuksella havaitaan 3 agglutinoivat tarkastelun alla ja lisää, agglutinaatio tiitteri vastaa ACAT.
Spermoimmobilizuyuschy testi Izodzhima (SIT).
Tiitteri immobilisoiva ACAT seerumin, plasma tai siemennesteen ote salainen kohdunkaulan kanava on asetettu useissa liikkuvien siittiöiden läsnä antigeenien (sperma).
Komponentit.
1. Huudahtaa, joka tuotetaan ja valmistetaan samalla, TF käyttäen FSB; liikkuvuutta ylittää 70 %.
2. Komplementsoderzhaschaya seerumin marsujen.
3. Immuuni ihmisen seerumin (IChS), jolloin läsnä komplementin kautta 1 tunnin inkuboinnin liikkumattomuus 90 % sperma.
4. Normaalin ihmisen seerumin (NCHS), inaktivoitiin kuumentamalla lämpötilassa 56 ° C 30 m.
5. Testi inaktivoitua seerumia, plasma ja siemennesteen poimia salaisuus kohdunkaulan kanava.
Menetelmä. Arvioida komplementtiaktiivisuus immobilisoimalla ensimmäinen putki otetaan käyttöön 0,5 ml: lla isotonista natriumkloridiliuosta, määrittää muutoksia siittiöiden liikkuvuutta ilman ASAT toinen koeputki - 0,5 ml NHS, ohjaus liikkumattomuus kolmas putki - 0,5 ml ICHS ja määrittää ACAT immobilisoimalla 4. putki - 0,5 ml seerumia, tai plasman huudahtaa, otteen tai eritystä endoservikaaliset.
Sitten kukin putki käyttöön 0,1 ml täydentää. Viimeinen asia kaikkiin putkiin lisätään 0,05 ml siittiösuspensiota pitoisuutena 40 miljoona. sisään 1 ml. Kolmijalka putket laitettiin lämpökaapissa 37 ° C 1 ei. Putket poistetaan uunista ja huolellisesti ravisteltiin heijastamaan vakiintuneen agglutinoi siittiöiden.
Tulosten arvioimiseksi kovassa suurennus mikroskoopilla (400X) laskettu prosenttiosuus liikkuvien siittiöiden tippa koeputken, talletettu lasilevyllä ja peitetty kannen. Samoin, se asettaa prosenttiosuus liikkuvien siittiöiden pisaroita koeputkia NHS ja ICHS. Reaktion tuloksena huomioon kaavalla
SIT = K /
jossa K - lukumäärä liikkuvien siittiöiden ohjaus ICHS ja NHS;
Tietoja - määrä liikkuvien siittiöiden koeputkeen (seerumin testi, tai plasman huudahtaa, tai salaisuus kohdunkaulan kanava).
Keskimääräinen SIT<2 testi on negatiivinen (määrä liikkuvien siittiösolujen hallinnassa ja koeputket suunnilleen saman), Jos indeksi CTI>2 - Testi on positiivinen, t. se on. materiaalissa (seerumi, plasma tai siemennesteen poimia salaisuus kohdunkaulan kanava) on immobilisoitu ACAT.
- Esimerkki 1. Junansuorittaja voivat ICHS - 10 % liikkuvien siittiöiden. Toinen ohjaus NHS - 80% liikkuvien siittiöiden. Molempien toimintojen yhteen - 90 % liikkuvien siittiöiden. Koeputkessa - 80 % liikkuvien siittiöiden.
SIT = R / D = 90/80 = 1,1
Testi on negatiivinen, immobilisoitu ACAT poissa.
- Esimerkki 2. Koeputkessa - 40 % liikkuvien siittiöiden, Kuitenkin, valvonta-, esimerkissä 1.
KN = 90/40 = 2,2
Testi positiivinen. On immobilisoidun vasta-aine (ASAT), jonka kautta siittiöiden liikkuvuutta vähensi.