Methods avastamiseks Leishmania luuüdis äigepreparaadina
Reaktiive avastamiseks Leishmania
- Metüülalkohol, või absoluutset etüülalkoholi, või segu Nikiforov (segu võrdsetes kogustes eeter ja absoluutse etanooli).
- Фосфатный буфер pH 6,9-7,1, valmistamiseks, mis on segatud 40 ml KH2RO4 (9,078 g kuivaine KH2RO4 sisse 1 liitri lahuse) ja 60 ml Na2PHO4 (11,876 g kuivaine 1 liitri lahuse).
- Azureozin Romanovsky.
Määramis Leishmania luuüdi mustamine
Luuüdi tähnid kohe pärast hoolitsemine, mitte purustada ega deformeeruda rakud,valmistades õhuke määrdub. Kui tihe punktkeratopaatiat, teha jäljendi. Kui olulised vere tähnid sellest isoleeritud klaasi vähe valkjas tükid rasva, kui nad on eristatavad, ja valmistada neid määrdub.
Valmis mustamine on õhu käes kuivatatud, siis fikseeritud, kui veri määrdub. Kuiv fikseeritud määrdub võib säilitada mitu päeva.
In mustamine valatakse lahjendatud puhvris värvimine Romanovsky (umbes 3-5 ml) ja lahkus 30 50 m. Pärast värvimist loputada destilleeritud veega, kuivatatud ja uuritakse mikroskoobiga keelekümbluse süsteem.
Tulemuste hindamine avastamise Leishmania luuüdis äigepreparaadina
Keset Leishmania haiguse tavaliselt leitud luuüdi punktkeratopaatiat olulises koguses ning seetõttu on nad kergesti leitavad. Kuid varases staadiumis haiguse ja ravi saavatel patsientidel, selgitada haigustekitaja, See nõuab pikka Kõiki mustamine (mitte vähem 40 m).
Leshmania leitud makrofaagides või ekstratsellulaarselt ümarad või risovidnyh rakud 3-5 mikronit läbimõõduga. Tsütoplasma värvub hall-sinine värv, ja tuum - on punakas-lilla. Tsütoplasmas paiknev kinetoplasts - kepikujulisi või ümarad haridus, intensiivselt värviline core.
Sest Leshmania mõnikord vereliistakute või "shards" rakkude (Komocki citoplazmy, tuumamaterjali sisaldavate), leidub luuüdi määrdub, välismaa mikroorganismid (nt, ainurakne vetikad), lõksus mustamine värvimise ajal. Värvitud mustamine on raskem, kui Leshmania (tumesinine tsütoplasmas ja tuumas hele karmiinpunane), kinetoplasts puudu.