Diagnoos immunoloogiliselt põhjustatud viljatust

Pikal abielus elu ilma rasestumisvastaste vahendite kasutamise, ja kohalolekul mikropiirkonnas limaskestade suguorganites võib tekkida järk märgata immuniseerimise antigeenide spermatosoidide. Arstlik läbivaatus abikaasade, seisneb viljatu abielu, ei saa kindlaks teha viljatuse 10-15 % juhtudel. See on selle rühma viljatud abikaasad taotlemisel erilist uurimismeetodeid saladus emakakaelakanalist, sperma seerumi ja plasma sperma antikehad tihtipeale avastada (ASAT), Kasutab kvalitatiivseid ja kvantitatiivseid katseid immunoloogilise teadus.

Postkoytalnыy test (FCT)

Postkoytalnыy test (FCT) See tähendab, et kvalitatiivne immuuntesti. Negatiivne tulemus kinnitab puudumisel sperma emakakaelakanalist saladus, aga sa ei saa kindlaks selle põhjus nende puudumisel.

Meetod. Mitmeid liikuvate spermatosoidide emakakaelakanali saladus, mis on saadud pärast suguühte, luua ulatuses rikkumiste tõttu tungib võime viljatus või immuunsuse neile lima emakakaelakanalist.

FCT on vaja täita järgmisi tingimusi: Uuring tuleb läbi aja ovulatsiooni, mis näitas colpocytologic või muul meetodil, pärast eelnevat karskus abikaasad 2-3 päeva jooksul.

Metoodika. Pärast tavalist suguühte naisele 30 minuti lamama selili, painutamine põlvili. Douching ja puhastamine keelatud, vaja ainult hügieenilist, mille käigus eemaldatakse püüdmist uurimiseks lima emakakaelakanalist. Pärast 2-4 tundi, lubatud ja pärast 6-10 tundi (aeg, möödunud uuring, analüüsis näidatud) pärast vahekorda emakakael avatud peegli abil Cuzco ja emakakaela lima aspiratsiooni või tuberkuliinisüstalt (ilma nõelata), pipeti abil kummipall, või polüetüleenist kateetri.

Kui pestes seadme ei tohi kasutada desinfitseerimisvahendid, sest need mõjutavad seemnerakkude liikuvus. Üks tilk saadud lima emakakaelakanalist viiakse üle soojendati Klaasslaid, kaetud katteklaasi, Territoorium on määritud vedel parafiin lekkima. Koostise kohe mikroskopiruyut (okulaari 7X, 40X eesmärk), arvu määramisel ja olemus seemnerakkude liikuvus. Ravim võib tuvastada aktiivse spermide progressiivse liikumisvõime, Võnkeliikumine (nähtus hoos) ja fikseeritud.

Lubatud pakkuda viit liiki järeldusi FCT.

• Suurepärane (asjassepuutuvate): viie nägemisväli kuni 15-20 aktiivse sperma progressiivse liikuvuse ja rohkem. Sperma fenomeniga võnkumine on väiksem kui 25 %.
• Vasta: viie nägemisväli üles 10 aktiivne sperma progressiivse liikuvuse ja vähem 25 % sperma nähtus hoos.
• Vaene: vähem 5 spermatosoidide viis nägemisväli.
• Miinus: Kuna sperma.
• Kaheldav: viie nägemisväli rohkem 5 aktiivne liikumatud sperma ja rohkem 25 % nähtus hoos.

Kui viienda tüüpi FCT Sageli täheldatud immuunsüsteemi vastuolu abikaasade vahel, Seega tuleb kindlaks ACAT. Et kindlaks ACAT saladus emakakaela, plasma, sperma või veres ja näidata neid (aglutinatsioon või immobiliseeritud) See nõuab nimetamine kvantitatiivne immuunanalüüsid.

Negatiivne PBC uuringud algavad määratluse läbistava (hõlvamine) võime sperma kaudu penetrative test (Reede) ja vastuvõtlikkus spermide sekretsiooni emakakaelakanalist kasutades test kontakti sperma ja emakakaela lima (TKSTSS).

Penetracionnyj test (TP)

Õhuke kapillaaride pikkus 10 Vaata kirjutatud ajal ovulatsiooni lima emakakaelakanalist. Üks open kapillaari sulgeb savi, ja teine ​​pannakse katseklaasi test värske seemnepurske (mitte rohkem 3 tundi pärast ejakulatsiooni). Reis saviga kapillaaride on kinnitatud püstise toru. Proov inkubeeriti termostaadis temperatuuril 37 ° C. 1 ei. On kvaliteeti ejakulaat hinnatakse poolt läbivussügavuse sperma lima emakakaelakanalist. Seal on kolme tüüpi kasvuhoonegaaside.

• Jaatav - Sügavus tungimist (suurim kaugus sentimeetrites, sõitnud vähemalt ühe seemnerakuga) üle 5 cm; arvu seemnerakkude juurest suurima tungimist rohkem 5 silmapiiril, ja mitmeid motile seemnerakkudes ülemises kolmandikus kapillaari on suurem kui 50 %.
• Kaheldav - Sügavus tungimist kuni 5 Vaata vähem spermatosoidide arvu 5, nende liikumist ülemise kolmandiku kapillaaride jõuab 50%.
• Miinus - Sügavus tungimist sperma jõuab 1 cm.

Võime seemneraku tungimine See sõltub faasi menstruaaltsükli. Ta hakkab tekkima alates 9. päevast menstruaaltsükli,, järk-järgult, aktiveerides, saavutab oma maksimaalse väljenduse perioodi ovulatsiooni, hoitakse sellel tasemel kaks päeva, ja siis järk-järgult väheneb.

Test kontakti sperma ja emakakaela lima (TKSTSS)

Slaidile pannakse väike tilk lima emakakaelakanalist, võetud naistel ovulatsiooni, ja mitmed ühesuurused tilk ejakulaat. Mõlemad tilka on kaetud Katteklaasi, mis on veidi allavajutatuna, liitunud languse. Ravim pannakse niiskuskambris (Petri tassis niisutatud vatitikuga) ja inkubeeriti termostaadis temperatuuril 37 ° C. 1 ei.

Nendes tingimustes normaalse seemnerakkude tungida saladuse normaalse emakakaelakanalisse, nagu võib näha mikroskoobi all suurendusega 200X. Selle arvestamiseks reaktsiooni paigale vaheline piir kahe meedia loendab tungivad salajase emakakaelakanalist seemnerakkude kahe külgneva nägemisväli.

Suurepärase TKSTSS kahes nägemisväli paljastab rohkem 25 aktiivselt liikuvate spermatosoidide nähtusega hoos vähem 25 %. Kui rahuldav TKSTSS kahes nägemisväli näitas rohkem 15 aktiivselt liikuvate spermatosoidide, TKSTSS madala - vähem kui 15. Negatiivne puudub levik TKSTSS, kui küsitav - nähtus võnkumise ületab 25 %.

Selles katses, nagu PCT, nähtus hoos, üle 25 %, tõenäoliselt, See näitab juuresolekul ACAT ja nõuab nimetamine kvantitatiivne immuunanalüüsid.

Kasutades sperma ja emakakaela sekreedi kanal viljatu ja viljakas mehed erinevates kogustes kasutades TKSTSS kindlaks viljatu mehe.

• Näide 1. Võetud saladus kanal emakakaela naistel viljatutele paaridele ja kontrolli seemnepurske tervet meest. Suurepärane TKSTSS näitab nõrk muldatungivuse sperma abikaasa ja tundlikkus normaalse sekretsiooni emakakaelakanalist.
• Näide 2. Võetud täis saladus emakakaelakanalist terve naine ja tema abikaasa ejakulaati viljatutele paaridele. Bad TKSTSS näitab nõrk tungimist spermatosoidide.
• Näide 3. Võetud saladus emakakaela naiste viljatutele paaridele ja kontrolli seemnepurske tervet meest. Bad TKSTSS näitab alaväärsustunnet saladus emakakaelakanalist, mis ilmselt ei tungi normaalne spermatosoidide.

Kvantitatiivsed immunoloogilised testid

Mikroagglyutinatsionny test Friberg

Mikroagglyutinatsionny test Friberg (TF) piisavalt tundlik ja on saadaval kliinilise diagnostika laboratooriumid. Kasutades TF saab olemasolu määramiseks ACAT ja aglutinatsiooni tiitrit erinevate materjalide (plasma seemnepurske, ekstraktid lima emakakaelakanalist ja seerumis mõlemad abikaasad).

Reaktiivid:

1. Fosfaat-puhverdatud soolalahusega (FSB) 0,01 М pH 7,2-7,4.

2. Vazelinovoe õli.

Varustus: mikroskoop, tuberkuliinisüstalt, mikroagglyutinatsionnye pipetter 1 ml, mikropipeti võimsusega 0,1 ml.

Meetod. Blood testseerumit inaktiveeritakse inkubatsiooni inkubaatoris 56 ° C. 30 m. Hüüatama, saada masturbatsioon, kohe lahjendatud selliselt, et FSB, kontsentratsioon spermide oli 40 miljon. sisse 1 ml.

Kuna materjal (plasma seemnepurske, väljavõte saladus emakakaelakanalist või seerumi) valmistub seerialahjendused 1:4 kuni 1:128 kasutades vedela lahjendamiseks FSB. In auke parafiinõli mikroagglyutinatsionnyh planšettidega tuberkuliinisüstalt nõelaga kasutusele (all vazelinovoe õli) Väike tilka iga lahjendamine katsematerjal. Pärast iga proovi pesti neli korda süstla. Igas lahjendamist lisatakse 5 korda väiksem langus hüüatama, ja 4 h toatemperatuuril tuvastasime aglutinaadid. Viimati aretus, kusjuures mikroskoobi all on 100X suurendus tuvastatud 3 aglutineerima üle vaadata ja rohkem, aglutinatsiooni tiiter vastab ACAT.

Spermoimmobilizuyuschy test Izodzhima (SIT).

Tiiter immobiliseerimismeetodid ACAT seerumi, plasma või sperma väljavõte salajase emakakaelakanalisse on seatud mitmeid liikuvate spermatosoidide kohalolekul antigeenide (sperma).

Komponendid.

1. Hüüatama, mis on toodetud ja valmistatakse sarnaselt, TF kasutades FSB; motoorika ületavad 70 %.

2. Komplementsoderzhaschaya seerumi merisigade.

3. Immuunsüsteemi inimese seerumi (IChS), andes juuresolekul täiendus läbi 1 h inkubatsiooni immobilisatsioon 90 % sperma.

4. Normaalne inimese seerumi (NCHS), inaktiveerida kuumutamine temperatuuril 56 ° C. 30 m.

5. Test inaktiveeritud seerumi, plasma ja sperma eraldada saladus emakakaelakanalist.

Meetod. Hinnata täiendus aktiivsus liikumatuks 1. toru sisse 0,5 ml isotooniline naatriumkloriidi lahus, määramiseks muutusi spermatosoidide liikuvust ilma ASAT 2. katseklaasi - 0,5 ml NHS, kontrolli immobilisatsioon kolmanda toru - 0,5 ml ICHS ja määrata ACAT liikumatuks 4. toru - 0,5 ml seerumit, või plasma hüüatama, väljavõte või sekretsiooni emakakaela.

Siis, iga toru on kehtestatud 0,1 ml täiendus. Viimane asi, mida kõik torud lisatakse 0,05 ml sperma peatamise kontsentratsioonis 40 miljon. sisse 1 ml. Tripod Tuubid asetati inkubaatorisse temperatuuril 37 ° C 1 ei. Torud on ahjust ja hoolikalt loksutada kajastada väljakujunenud aglutineeri spermatosoidide.

Hinnata tulemusi, suure suurendusega mikroskoobi (400X) arvutatakse protsendina liikuvate spermatosoidide kukub katseklaasi, hoiule klaasslaidile ja kaetud kattega. Samamoodi seatud liikuvate spermatosoidide protsendiline in piiskadega katseklaasidesse NHS ja ICHS. Reaktsiooni tulemusel arvesse valemit

SIT = K /

kus K - arv liikumatud sperma kontrolli ICHS ja NHS;

Umbes - arv liikuvate spermatosoidide Katseklaasis (seerumi test, või plasma эяkulяta, või saladus emakakaelakanalist).

Mis keskmine SIT<2 test on negatiivne (arvu liikuvate spermatosoidide kontrolli ja katseklaasid umbes sama), Kui indeks CTI>2 - Katse positiivne, t. see on. materjalis (seerum, plasma või sperma eraldada saladus emakakaelakanalist) immobiliseeritud ACAT.

• Näide 1. Juhtimiskeskuse ICHS - 10 % liikuvate spermatosoidide. Teine kontroll NHS - 80% liikuvate spermatosoidide. Kaks kontroll koos - 90 % liikuvate spermatosoidide. Katseklaasis - 80 % liikuvate spermatosoidide.

SIT = R / D = 90/80 = 1,1

Test on negatiivne, immobiliseeritud ACAT puuduvad.

• Näide 2. Katseklaasis - 40 % liikuvate spermatosoidide, Kuid kontrollrühma, Näites 1.

KN = 90/40 = 2,2

Katse positiivne. Hetkel immobiliseeritud antikeha (ASAT), mille kaudu spermatosoidide liikuvust märkimisväärselt vähenenud.