Nasledstvennaya gemoliticheskaya αναιμία, λόγω της δραστηριότητας του πυροσταφυλικής κινάσης ανεπάρκειας των ερυθρών αιμοσφαιρίων

Nasledstvennaya gemoliticheskaya αναιμία, Σχετικές ανεπάρκεια ερυθροκυττάρων πυροσταφυλική κινάση - μια σχετικά σπάνια μορφή αιμολυτική αναιμία, που κληρονομείται με αυτοσωματικό υπολειπόμενο τρόπο, Δίνει κλινικές εκδηλώσεις σε ομοζυγώτες, προχωρά με τα σημάδια της ενδοκυτταρικής αιμόλυση, μακροκυττάρωση των ερυθρών αιμοσφαιρίων, χαμηλή περιεκτικότητα σε κάλιο. Υπάρχουν περισσότερα από 200 περιπτώσεων ομόζυγων φορέων της δραστηριότητας του ελλείμματος piruvatkinaznoy.

Παθογένεση

Πυροσταφυλική κινάση είναι ένα από τα ένζυμα, σύναψη γλυκόλυση. Αυτή η σύνδεση γλυκόλυση και ΑΤΡ που σχηματίζονται nikotinamiddinukleotid. Η πλειονότητα των ασθενών με ανεπάρκεια δραστικότητας κινάσης πυροσταφυλικής μειώνεται στο περιεχόμενο των ερυθρών κυττάρων του αίματος αυτών των δύο μεταβολιτών, Σε ορισμένες περιπτώσεις, το περιεχόμενο του ΑΤΡ είναι φυσιολογικό, αλλά διαταραχθεί η σταθερότητα της ATP κατά τη διάρκεια της επώασης. Τα φυσιολογικά επίπεδα της ΑΤΡ που βρέθηκαν σε σημαντικές δικτυοερυθροκυττάρωση. Αυτό οφείλεται στην παρουσία του δικτυοερυθροκυττάρων και τη δυνατότητα του μιτοχονδριακού ΑΤΡ όχι μόνο μέσω της γλυκόλυσης, αλλά επίσης λόγω της οξειδωτικής φωσφορυλίωσης.

Η συνέπεια της πυροσταφυλικής κινάσης ανεπάρκειας Είναι, επίσης, η συσσώρευση των προϊόντων της γλυκόλυσης, διαμορφώνεται σε προηγούμενα στάδια - fosfofenolpiruvata, 3-φωσφογλυκερικό, και ειδικότερα 2,3-διφωσφογλυκερικού. Piruvatanlaktata περιεχόμενο μειώσεις στα ερυθρά αιμοσφαίρια.

Η έλλειψη ΑΤΡ στα ερυθρά αιμοσφαίρια ανεπάρκεια κινάσης πυροσταφυλικού Οδηγεί σε διαταραχή της λειτουργίας της αντλίας ΑΤΡ-aznogo ερυθρών αιμοσφαιρίων και στην απώλεια των ιόντων καλίου, όπου η συγκέντρωση του νατρίου ιόντα στα ερυθροκύτταρα των μη αύξηση. Αυτό προκαλεί μια μείωση στην περιεκτικότητα μονοσθενών ιόντων στα ερυθροκύτταρα, αφυδάτωση του κυττάρου και συρρίκνωση του. Αυτό το φαινόμενο ονομάζεται dessikotsitoz. Η μείωση στα ερυθρά αιμοσφαίρια του νερού περιπλέκει τη διαδικασία της οξυγόνωσης και του οξυγόνου από την αιμοσφαιρίνη απελευθέρωση. Από αυτή την άποψη, ορισμένα αντισταθμιστικά ρόλο που διαδραματίζει ένα σημαντικό συσσώρευση στα ερυθροκύτταρα του 2,3-οξέος difosfoglitserinovoy.

Η συγγένεια της αιμοσφαιρίνης για οξυγόνο μειώνεται με την αλληλεπίδρασή του με 2,3-διφωσφογλυκερικού. Ως εκ τούτου,, σε υψηλότερες συγκεντρώσεις για 2,3-διφωσφογλυκερικού επιστρέφει οξυγόνου στους ιστούς διευκολύνεται.

Οι κλινικές εκδηλώσεις της δραστικότητας της πυροσταφυλικής κινάσης ανεπάρκειας

Οι κλινικές εκδηλώσεις της δραστικότητας κινάσης πυροσταφυλικής ανεπάρκεια εξαρτώνται από το βαθμό της αιμόλυσης. Σε ορισμένες περιπτώσεις, η αυξημένη αιμόλυση εκδηλώνεται κατά τη γέννηση και συνοδεύεται από την εμφάνιση σοβαρών αιμολυτική κρίση, προκαλώντας την ανάγκη για μεταγγίσεις αίματος για να διατηρηθεί η αιμοσφαιρίνη σε υπο-φυσιολογικά επίπεδα. Σε άλλες περιπτώσεις, η ασθένεια μπορεί να εμφανιστεί σχεδόν ασυμπτωματική με τα πρώτα σημάδια της αυξημένης αιμόλυσης (subikterichnost σκληρό χιτώνα και δέρμα) ηλικίας 17-30.

Γενικά; σε σύγκριση με microspherocytosis, πυροσταφυλική κινάση ανεπάρκεια έχει μια πιο σοβαρή.

Σχεδόν όλοι οι ασθενείς με ψηλαφητό σπλήνα. Η μικρή αύξηση του αποκαλύπτονται ορισμένες ανωμαλίες του ετερόζυγοι φορείς, αν και έχουν αναιμία, συνήθως, λείπει. Ένας αριθμός των ασθενών που είναι δυνατόν σπληνομεγαλίας. Μια σημαντική αύξηση των ηπατικών σπάνια. Σε μεμονωμένες περιπτώσεις ασθενών με προσδιορίζονται έλκη ποδιών.

Εργαστήριο δείκτες δραστηριότητας της πυροσταφυλικής κινάσης ανεπάρκειας

Η πλειονότητα των ασθενών με ανεπάρκεια δραστικότητας κινάσης πυροσταφυλικής παρατηρήθηκε μέτρια αναιμία (4,34- 6,21 mmol / l, ή 70-100 g / l), Ωστόσο, κατά τη διάρκεια της αιμοσφαιρίνης κρίσεων μπορεί να μειωθεί σε 3,1 3,72 mmol / l (50-60 G / l). Περιεχόμενο eritrotsitov- 2,5-3,0 Τ 1 l. Αιμολυτική κρίση μπορεί να προκληθεί από λοίμωξη. Υπάρχουν περιπτώσεις κέρδος αιμόλυσης κατά την έμμηνο ρύση.

Ερυθρά αιμοσφαίρια των ασθενών με ανεπάρκεια της πυροσταφυλικής κινάσης χαρακτηρίζεται από μακροκυττάρωση με normohromiey, ελαφρά ανισοκυττάρωση και ποικιλοκυττάρωση. Υπήρχε μια δίκαιη polychromatophilia. Βρέθηκε μερικές φορές mishenevidnye ερυθρά αιμοσφαίρια και τα ερυθρά αιμοσφαίρια με ακμές scalloped ή με τη μορφή της μουριάς, συχνά εντοπίζονται βασεόφιλα ερυθροκυττάρων punktatsiya, Jolly αιμοσφαιρίων. Μερικοί ασθενείς στο περιφερικό αίμα αποκάλυψε ένα σημαντικό αριθμό erythrokaryocytes, κατά τη διάρκεια της κρίσης, μπορεί να αυξηθεί μέχρι και 60-70 %. ΕΣΡ, μέτρηση λευκών αιμοσφαιρίων, leukogram, Η αιμοπεταλίων εντός του φυσιολογικού εύρους. Όπως και με άλλες μορφές αιμολυτική αναιμία, στο μυελό των οστών αποκάλυψε μια απότομη ερεθισμό κόκκινο φύτρο αιμοποίηση.

Το επίπεδο της χολερυθρίνης, συνήθως, αυξήθηκε λόγω των έμμεσων.

Η ελεύθερη αιμοσφαιρίνη στο πλάσμα κανονικός, αλλά μπορεί να είναι μειωμένα επίπεδα απτοσφαιρίνης. Αιμοσιδιρίνη στα ούρα είναι απούσα. Περιεχόμενο της εμβρυϊκής αιμοσφαιρίνης και αιμοσφαιρίνης Α₂ εντός του φυσιολογικού εύρους.

Οσμωτική αντίσταση των ερυθροκυττάρων ανεπάρκειας πυροσταφυλικής κινάσης, στις περισσότερες περιπτώσεις κανονικής, μερικές φορές μειώνεται μετά από επώαση ημέρες. Autogemoliz, συνήθως, αναβαθμιστεί σε διάφορους βαθμούς. Υπάρχουν περιπτώσεις πυροσταφυλικού ανεπάρκεια κινάσης με κανονική autogemolizom. Στην πρώτη κρούσματα της φωσφορικής αφυδρογονάσης έχει καταχωρηθεί τύπου ΙΙ autogemoliza, διορθώνει την προσθήκη ΑΤΡ, και όχι η διόρθωση ή ελαφρώς διόρθωση την προσθήκη γλυκόζης. Στη συνέχεια, πολλές περιπτώσεις έχουν περιγραφεί με τον τύπο ανεπάρκεια του ενζύμου Ι autogemoliza ή όχι. Ως εκ τούτου, δεν συνιστάται να εφαρμοστεί η μέθοδος autogemoliza για τη διαφορική διάγνωση της αιμολυτικές αναιμίες. Η διάρκεια ζωής των ερυθρών κυττάρων αίματος με ανεπάρκεια δραστικότητας κινάσης πυροσταφυλικής πάντα συντομεύεται.

Δραστηριότητα πυροσταφυλική κινάση κληρονομιά Τύπος αυτοσωματικό υπολειπόμενο. Ετεροζυγώτες ουσιαστικά υγιή, Σύμφωνα με διάφορους ερευνητές, η σοβαρότητα του ελλείμματος κυμαίνονταν από 50 να 70 % πρότυπα.

Διαγνωστικά δραστηριότητα του πυροσταφυλικού ανεπάρκεια κινάσης

Η διάγνωση της πυροσταφυλικής κινάσης ανεπάρκεια των ερυθρών αιμοσφαιρίων μπορεί να αναμένεται να παραδώσει στην περίπτωση της αιμολυτικής αναιμίας, ρέει πάνω από τα χρόνια με την αύξηση του σπλήνα, έλλειψη περιφερικό αίμα επιχρίσματα σημάδια microspherocytosis, elliptotsitoza και stomatotsitoza.

Ποιοτική δοκιμές για τον προσδιορισμό της δραστικότητας της πυροσταφυλικής κινάσης. Για το σκοπό αυτό, η μέθοδος χρησιμοποιείται ευρέως φθορίζουσα χρωστική, βασισμένο στο, ότι κατά τη διάρκεια της αντίδρασης, kataliziruemoy piruvatkinazoy, nikotinamiddinukleotid οξειδώνεται και ο φθορισμός εξαφανίζεται.

Η δραστηριότητα της πυροσταφυλικής κινάσης σε υγιή άτομα κυμαίνονταν από 4,0 να 7,7 mmol (min / 1010 ερυθροκυττάρων) ή 4,0 να 7,7 Ισχύς. Η πλειοψηφία των ομόζυγων ενζυμικής δραστηριότητας της νόσου λιγότερο 1 Ισχύς. Ωστόσο, μπορεί να υπάρχουν περιπτώσεις ελαφρά μείωση της δραστικότητας του ενζύμου. Διάγνωση μιας σπάνιας μορφής αιμολυτική αναιμία είναι πολύ δύσκολο, και η διάγνωση μπορεί να γίνει μόνο με τη μελέτη της κινητικής του ενζύμου.

Διαφορική διάγνωση της αιμολυτικής αναιμίας, που συνδέονται με την ανεπάρκεια της πυροσταφυλικής κινάσης

Η διαφορική διάγνωση της αιμολυτικής αναιμίας, που συνδέονται με την ανεπάρκεια της πυροσταφυλικής κινάσης, αναγκαία για την εκτέλεση άλλων μορφών κληρονομικής αιμολυτική αναιμία.

Δεδομένου ότι οι περισσότεροι ασθενείς με ανεπάρκεια στη δραστικότητα κινάσης πυροσταφυλικού σε αντίθεση με τα άτομα, πάσχουν microspherocytosis, elliptotsitozom, stomatocitozom, αιμολυτική αναιμία, κλιματιζόμενο μεταφορά ασταθή αιμοσφαιρίνη, και θαλασσαιμία νόσος κληρονομείται με αυτοσωματικό υπολειπόμενο, ότι αυτή η παθολογία βρίσκεται μόνο στην ίδια γενιά και σχεδόν ποτέ δεν δει τους γονείς.

Όταν κληρονομικής αναιμίας, κλιματιζόμενο μεταφορά ασταθή αιμοσφαιρίνη, ιδιαίτερα σε σοβαρή νόσο, Μερικές φορές εξεταζόμενος είναι ο πρώτος φορέας της μετάλλαξης, και στη συνέχεια η ασθένεια μεταδίδεται στην επόμενη γενεά. Ως εκ τούτου, η διαφορική διάγνωση πρέπει να πραγματοποιείται με αιμοσφαιρινοπάθειες, κλιματιζόμενο μεταφορά ασταθή αιμοσφαιρίνη, καθώς και υπολειπόμενο κληρονομική αιμολυτική αναιμία, οφείλεται σε ελαττωματική δραστηριότητα των άλλων ενζύμων.

Παίζει στηρίζει τη σταθερότητα της αιμοσφαιρίνης ρόλο, Yego ηλεκτροφόρηση. Για να αποκλειστούν άλλες fermentopathia διερευνήθηκε η δραστικότητα άλλων ενζύμων των ερυθροκυττάρων, και να αποκλείσει αυτοάνοση αναιμία αιμολυτική πραγματοποιηθεί Coombs, agregatgemagglyutinatsionnaya.

Φθορισμού μέθοδος για τον προσδιορισμό της δραστικότητας με piruvatkiiazy Beutler

Αντιδραστήρια.

1. Fosfoenolpirovinogradnaya οξύ (tritsiklogeksilammoniynaya αλάτι) 0,15 Μ διάλυμα, εξουδετερώθηκε σε ρΗ 7.0-8.0 0,2 Μ διάλυμα ΝαΟΗ (0,03 ml).
2. ADF 0,03 Μ διάλυμα, εξουδετερώνεται (0,1 ml).
3. NAD-Ν 0,015 Μ διάλυμα, εξουδετερώνεται (0,1 ml).
4. Θειικό μαγνήσιο 0,08 Μ διάλυμα (0,1 ml).
5. Φωσφορικό ρυθμιστικό διάλυμα καλίου 0,25 Μ, pH 11 7,4 (0,05 ml).
6. Distillirovannaya νερό (0,62 ml). Το μίγμα μπορεί να αποθηκεύεται σε - 20 ° C είναι όχι περισσότερο από μία εβδομάδα.

Μέθοδος.

Για ερευνητική χρήση του αίματος, λαμβάνεται με ηπαρίνη ή κιτρικό νάτριο. Είναι φυγοκεντρείται, αναρρόφηση και την προετοιμασία του πλάσματος 20 % εναιώρημα ερυθρών αιμοσφαιρίων με την προσθήκη τέσσερις όγκους διαλύματος χλωριούχου νατρίου ισοτονικού.

Εναιώρημα ερυθροκυττάρων σε μία ποσότητα 0,02 ml αναμιγνύεται με 0,2 ml αντιδραστηρίου και επωάζονται για 30 λεπτών σε 37 ° C. Ένα σταγονίδιο τοποθετήθηκε στο διηθητικό χαρτί, και την περιήγηση στο ακτινοσκόπιο. Baseline φθορισμός ανιχνεύθηκε αμέσως μετά την προσθήκη των ερυθροκυττάρων στο μίγμα πριν από την επώαση. Κανονικά μετά από 30 λεπτά επώασης εξαφανίζεται, και η δραστηριότητα των λειψάνων ανεπάρκειας πυροσταφυλικής κινάσης. Αυτό είναι, NADH που φθορίζει υπό την επίδραση της υπεριώδους ακτινοβολίας στην περιοχή της, κοντά στο ορατό, λαμβάνοντας υπόψη ότι η NAD δεν φθορίζει. Επειδή το ανωτέρω διάλυμα είναι ασταθές και αποικοδομείται εύκολα, απαιτεί παρακολούθηση. Θα πρέπει να διαχωρίσει προσεκτικά το στρώμα των λευκών αιμοσφαιρίων, δεδομένου ότι η δραστηριότητα του πυροσταφυλικού δραστικότητας του ενζύμου των ερυθροκυττάρων ανεπάρκεια κινάσης σε λευκοκύτταρα μπορεί να είναι φυσιολογική.