Χημική μελέτη του εγκεφαλονωτιαίου υγρού

Σημαντικές διαφορές στη σύνθεση του εγκεφαλονωτιαίου υγρού και πλάσματος αίματος είναι ότι, το γεγονός ότι το υγρό είναι περίπου 300 φορές λιγότερη πρωτεΐνη, σημαντικά λιγότερη χοληστερίνη, Γλυκόζη και περισσότερα χλωριούχα.

Χημικός σύνθεση του εγκεφαλονωτιαίου υγρού Αντικατοπτρίζει σημαντικές αλλαγές, συμβαίνουν στο κεντρικό νευρικό σύστημα.

Η πρωτεΐνη στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό

Κανονικά, το υγρό από τις κοιλίες του εγκεφάλου περιέχει 0,12-0,2 g πρωτεΐνης / L, της παρεγκεφαλίδας του εγκεφάλου tsisterny- 0,1-0,2, από την υπαραχνοειδή χώρο του νωτιαίου μυελού - ένα 0,22 0,33 g / l.

Μείωση ή αύξηση στην πρωτεΐνη του νωτιαίου υγρού Αυτό δείχνει μια παθολογική διαδικασία. Μέση περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη δεν δίνει λόγο να αρνηθεί την παρουσία μιας οργανικής βλάβης του κεντρικού νευρικού συστήματος, λόγω των πιθανών παραβιάσεων της αναλογίας των πρωτεϊνικών κλασμάτων του εγκεφαλονωτιαίου υγρού. Σε κανονική σύνθεση πρωτεΐνης διαφέρει από εγκεφαλονωτιαίο υγρό απουσία ευσφαιρίνης ορού και παρουσία επιπλέον παρατάξεις.

Η μελέτη της προέλευσης του εγκεφαλονωτιαίου υγρού πρωτεΐνες που βρίσκονται, σχεδόν 10 % δεν έχουν καμία ανοσολογική ομοιότητα με τις πρωτεΐνες του ορού και ταξινομούνται ως ειδικές πρωτεΐνες του ΚΝΣ.

Η αύξηση της περιεκτικότητας σε πρωτεΐνη στο ΕΝΥ Είναι λόγω αιμοδυναμική διαταραχές του εγκεφάλου και στασιμότητα του αίματος στα αγγεία του κεντρικού νευρικού συστήματος.

Κλάσμα Prealbuminovaya στο υγρό από τις κοιλίες του εγκεφάλου είναι 13-20%, της παρεγκεφαλίδας δεξαμενής του εγκεφάλου - 7-13, ένα ρευστό, λαμβάνεται με οσφυϊκή παρακέντηση,- 4-7 % συνολικής περιεκτικότητας σε πρωτεΐνες. Αυτό το κλάσμα της πρωτεΐνης είναι απούσα στον αποκλεισμό του εγκεφαλονωτιαίου υγρού χώρων, μπορεί να συγκαλύπτεται αλβουμίνη δεν είναι πάντα κατανέμεται στο υψηλότερο επίπεδο της πρωτεΐνης στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό.

Σε όγκους του εγκεφάλου, και φλεγμονώδεις ασθένειες του κεντρικού νευρικού συστήματος στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό μειώνει την περιεκτικότητα των λεπτών κλασμάτων (Λευκωματίνη, α1- και α2-σφαιρίνες) και αυξημένη περιεκτικότητα χονδρόκοκκων (β- και γ-σφαιρίνες).

Για τον προσδιορισμό υψηλή περιεκτικότητα στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό μπορούν να χρησιμοποιηθούν σφαιρίνες αντίδραση Pandey, με βάση την θολερότητα του υγρού λόγω πρωτεΐνη πήξης επηρεάζεται φαινόλη. Διεξαγωγή αυτής της μεθόδου πτώση αντίδραση επιτρέπει στο υγρό δοκιμής σημαντική εξοικονόμηση, Συχνά παραδίδονται στο εργαστήριο σε μια πολύ μικρή ποσότητα.

Σφαιρίνη απάντηση παρόλο που χρησιμοποιούνται στην εργαστηριακή διάγνωση, αλλά δίνει μόνο μια κατά προσέγγιση ιδέα του περιεχομένου της πρωτεΐνης.

Η ποσότητα της πρωτεΐνης στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό προσδιορίστηκε καθώς, στα ούρα, μέθοδο Brandberg-Roberts-STOLNIK ή χρωματομετρική μέθοδος χρησιμοποιώντας σουλφοσαλικυλικό οξύ και θειικό νάτριο.

Η ένταση της θολότητας, που σχηματίζεται από την προσθήκη στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό σουλφοσαλικυλικό οξύ, ανάλογη προς τη συγκέντρωση της πρωτεΐνης.

Σε αιμορραγικό εγκεφαλονωτιαίο υγρό περιεκτικότητα σε πρωτεΐνη μπορεί να βελτιωθεί με τις πρωτεΐνες του πλάσματος. Μετά την παραλαβή του εγκεφαλονωτιαίου υγρού, χρώματος του αίματος, ο ασθενής πρέπει να λάβει το αίμα από το δάκτυλο σε ένα διάλυμα χλωριούχου σωλήνα και ισοτονικό νατρίου για να ληφθεί, χρωματισμένο κάπως πιο έντονα, από το υγρό. Σωλήνες με εγκεφαλονωτιαίο υγρό και το αίμα θα πρέπει να είναι το ίδιο πάχος και το χρώμα γυαλί. Το χρώμα των υγρών επιπέδων στο συγκριτή, προσεκτικά προσθήκη στο αραιωμένο αίμα ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου, τότε φυγοκεντρήθηκε και η ποσότητα της πρωτεΐνης σε ένα άχρωμο διαφανές πάνω- ιζηματογενή υγρό. True πρωτεΐνης στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό λαμβάνεται αφαιρώντας την ποσότητα της πρωτεΐνης στο αραιωμένο αίμα από την ποσότητα της πρωτεΐνης στο υγρό αιμορραγική. Μεθοδολογία Αυτό δεν είναι πολύ ακριβής, Χρησιμοποιείται σε περιπτώσεις, Όταν αιμορραγικό εγκεφαλονωτιαίο υγρό γίνεται άχρωμο μετά από φυγοκέντρηση.

Η περιεκτικότητα σε πρωτεΐνες του εγκεφαλονωτιαίου υγρού αυξάνεται κατά παράβαση των αιμοδυναμική, φλεγμονώδη, μετά από εγχειρήσεις στο κεντρικό νευρικό σύστημα, καθώς και στους όγκους του εγκεφάλου και του νωτιαίου μυελού. Η σημαντική αύξηση στην ποσότητα της πρωτεΐνης παρατηρείται σε φλεβική στάση, σε συνδυασμό με την παραβίαση της κυκλοφορίας του εγκεφαλονωτιαίου υγρού. Σε τέτοιες περιπτώσεις, υψηλής πρωτεΐνης άρωση κανονική - πρωτεΐνη-διαχωρισμού κυττάρων. Σε συνδυασμό με το ότι xanthosis χαρακτηριστικό σύνδρομο Froana, η οποία παρατηρείται σε όγκους του εγκεφάλου και του νωτιαίου μυελού. Η μείωση της ποσότητας της πρωτεΐνης στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό σημειώνεται σε υπερέκκριση και υδροκέφαλο του.

Nonne-Apelt αντίδραση dlya ειδική σφαιρίνη. Αρχή του συνίσταται στην κατακρήμνιση του σφαιρίνες παρουσία κορεσμένου διαλύματος θειικού αμμωνίου. Η αντίδραση θεωρείται θετικό όταν η περιεκτικότητα στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό 0,05 % σφαιρίνες και περισσότερα. Δίνει μια ένδειξη του περιεχομένου της σφαιρίνες στο νωτιαίο υγρό.

Αριθμός σφαιρίνη αυξήθηκε σημαντικά σε χρόνιες φλεγμονώδεις και εκφυλιστικές διεργασίες στο κεντρικό νευρικό σύστημα (μηνιγγίτιδα, meningoэncefalit, γενική παράλυση, σκλήρυνση κατά πλάκας). Με την αύξηση του επιπέδου της λευκωματίνης, σφαιρίνες σπασμένα αναλογία σφαιρίνης του εγκεφαλονωτιαίου υγρού. Κανονικά θα κυμαίνεται μεταξύ 0,2-0,3. Για μια πιο ακριβή εικόνα του πρωτεϊνικού κλάσματος του εγκεφαλονωτιαίου υγρού θα πρέπει να καθορίσει με ηλεκτροφόρηση ή άλλων ποσοτικών μεθόδων.

Μελέτη της συνθέσεως πρωτεΐνης του εγκεφαλονωτιαίου υγρού με ηλεκτροφόρηση - Μια διαδικασία χρονοβόρα, από τη μελέτη της σύνθεσης του ορού του αίματος. Στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό των 200-400 φορές λιγότερη πρωτεΐνη, Ως εκ τούτου, προ-συμπυκνώματος (συμπυκνωμένος) με υπερδιήθηση σε κενό, διαπίδυση έναντι δεξτράνη ή αραβικό κόμμι, και εξάτμιση υπό κενό. Ωστόσο, η πάχυνση του εγκεφαλονωτιαίου υγρού μπορεί να χάσει τα κλάσματα πρωτεΐνης ή εντοπισμό αντικειμένων. Σε σχέση με τον προσδιορισμό αυτό έχει αναμφίβολα πλεονέκτημα proteinogram εγκεφαλονωτιαίο υγρό με ηλεκτροφόρηση σε γέλη άγαρ ή πολυακρυλαμιδίου.

Ηλεκτροφόρηση σε γέλη άγαρ σε υγιές ανθρώπινο εγκεφαλονωτιαίο υγρό απομονωμένος γ₂– и γ₃-hlobulynы.

Μια πιο ευαίσθητη μέθοδος κλασμάτωσης των πρωτεϊνών του εγκεφαλονωτιαίου υγρού, δεν απαιτεί πύκνωση, Αυτό είναι эlektroforez της poliakrilamidnom Gele, επιτρέπει την ταυτοποίηση των πρωτεϊνικών κλασμάτων 30-40, κυρίως στην γ-σφαιρίνη.

Η μέθοδος ανοσοηλεκτροφόρηση ανιχνευθεί στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό ανοσοσφαιρίνης Α, Μ, σολ, περιεχόμενο είναι 3-4 φορές μικρότερη, από ορό: 2,65 мг / л IgG, 2,05 mg / l IgA και 0,24 мг / л IgM.

Κλασματική σύνθεση των πρωτεϊνών στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό ηλικία υφίσταται σημαντικές αλλαγές. Για τα παιδιά χαρακτηρίζεται από χαμηλά επίπεδα αλβουμίνης, αν και το επίπεδο της προ- κλάσμα λευκωματίνης είναι σχετικά υψηλή. Οι ηλικιωμένοι που παρατηρείται αύξηση των IgA και IgG, τα οποία αναφέρονται σε γ-σφαιρίνες.

Η μελέτη των κλασματικών σύνθεση των πρωτεϊνών του εγκεφαλονωτιαίου υγρού έχει σημαντική διαγνωστική αξία, Από έναν αριθμό ασθενειών του ΚΝΣ (όγκους, rasseânnom κατά πλάκας) η συνολική ποσότητα του δεν μπορεί να αλλάξει. Το πιο διαγνωστικά πολύτιμες είναι η ταυτόχρονη προσδιορισμός των κλασμάτων πρωτείνης, Lipo- και γλυκοπρωτεϊνών.

Ιδρύθηκε, ότι σε οξείες φλεγμονώδεις νόσους του νευρικού συστήματος είναι πλέον χαρακτηρίζεται από μια αύξηση της περιεκτικότητας του εγκεφαλονωτιαίου υγρού α-σφαιρίνες, για χρόνιες φλεγμονώδεις διεργασίες - ανοσοσφαιρίνη, και κακοήθη νεοπλάσματα - β-λιποπρωτεΐνη.

Προσδιορισμό των πρωτεϊνών Κολλοειδές αντίδραση

Αντίδραση Lange Είναι με βάση το, η επαφή παθολογικά αλλαγμένη εγκεφαλονωτιαίο υγρό με λεπτή κολλοειδές διάλυμα χλωριούχου χρυσού στην παρουσία ηλεκτρολυτών που προωθούν την πήξη και το χρώμα του διαλύματος άλλαξε.

Κανονικά, το εγκεφαλονωτιαίο υγρό δεν αλλάζει το χρώμα του κολλοειδούς διαλύματος του χρυσού, Παραμένει κόκκινο. Αλλάξτε το χρώμα του διαλύματος που εγκρίθηκε στην παθολογία για την αξιολόγηση των στοιχείων:

• Κόκκινο - 0;
• κόκκινο και μοβ - 1;
• Violet - 2;
• κόκκινο και μπλε ή κόκκινο και ιριδίζοντα με μικρή εναπόθεση σωματιδίων - 3;
• μπλε - 4;
• αχνά ροζ χρώμα με μια μπλε απόχρωση, και ιζημάτων - 5;
• άχρωμο με ίζημα - 6.

Διακρίνουν τέσσερις τύπους αντίδρασης Lange:

• κανονικός, όπου η αλλαγή χρώματος δεν εμφανίζεται καθόλου, ή 3-5 σωλήνες χρώμα είναι ελαφρώς διαφορετικά από τα χρώματα του σωλήνα ελέγχου (κόκκινο με ελαφρά μοβ απόχρωση);
• εκφυλιστική, που χαρακτηρίζεται από μια μεταβολή του χρώματος στο αριστερό ήμισυ του αριθμού των σωλήνων (από μωβ σε λεύκανση) και η εμφάνιση του ιζήματος; παρατηρήθηκε στην σύφιλη του εγκεφάλου, rasseânnom κατά πλάκας, όγκους του εγκεφάλου και του νωτιαίου μυελού, μαλάκωμα του εγκεφάλου, και άλλα.;
• φλεγμονώδη, οι οποίες τείνουν να αλλάζουν χρώμα στη δεξιά πλευρά ή στο κέντρο της σειράς των σωλήνων; μηνιγγίτιδα που παρατηρήθηκαν σε διάφορα εθνολογία;
• μικτός, όπου η μεταβολή χρώματος εμφανίζεται στο αριστερό, και στη δεξιά πλευρά της σειράς των σωλήνων; Μικτά αλλοιώσεις παρατηρήθηκαν σε μεμβράνες και εγκεφαλικό ιστό.

Αντίδραση Takata-Ara συμπληρώνει ή να επιβεβαιώνει την Lange αντίδραση. Βασισμένο σε πρωτεΐνες πήξης εγκεφαλονωτιαίο υγρό υπό την επίδραση του διχλωριούχου υδραργύρου και το διάλυμα αλλάζει χρώμα με την παρουσία ενός διαλύματος μείγματος φουξίνη.

Υπάρχουν Τέσσερις τύποι αντιδράσεων:

• αρνητικός (κανονικός) - Μοβ χρώμα των αλλαγών μείγματος, υγρό σαφή;
• εκφυλιστική - Απώλεια του μπλε-μωβ ίζημα, πάνω από το οποίο υπάρχει ένα διαυγές υγρό;
• φλεγμονώδη - Ένα μείγμα ροζ χρώμα χωρίς ιζήματα, χρόνου αποχρωματίζεται;
• μικτός - Διαφανές υγρό πάνω από ένα ροζ ίζημα.

Αντίδραση Takata-Ara είναι πιο ευαίσθητη, από την αντίδραση Lange.

Για τη διάγνωση των εκφυλιστικών και φλεγμονωδών διεργασιών στο ΚΝΣ που χρησιμοποιείται μαστίχα αντίδραση.

Η τρυπτοφάνη και η αντίδραση Levinson αντίδραση χρησιμοποιούνται για τη διάγνωση της φυματίωσης.

Friedman αντίδραση χρησιμοποιείται για την έγκαιρη διάγνωση της μηνιγγίτιδας. Η αρχή είναι, ότι υπό την επίδραση υπερμαγγανικού καλίου συμβαίνουν οξειδοαναγωγική διεργασίες και οι μεταβολές χρώματος του εγκεφαλονωτιαίου υγρού, και υπό την επίδραση του τριχλωροξεικού οξέος καταβυθισθέν πρωτεΐνη που περιέχονται σε αυτό. Για τους τραυματισμούς, όγκους, σύφιλη του εγκεφάλου, MS χρώμα του υγρού δεν αλλάζει.

Το εγκεφαλονωτιαίο υγρό ανιχνεύεται από 20 να 25 ελεύθερα αμινοξέα. Για τη μελέτη της σύνθεσης αμινοξέων του εγκεφαλονωτιαίου υγρού χρωματογραφία χρησιμοποιώντας σύγχρονες μεθόδους, ανταλλαγή ιόντων φθοριομετρία.

Η περιεκτικότητα σε ελεύθερα αμινοξέα και η αμινο άζωτο στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό μέσο όρο 0.6- 1,4 mmol / l, παρακάτω, σε σχέση με το πλάσμα - 1.9 έως 2.8 mmol / l.

Ένα σημαντικό ρόλο στη διάγνωση των ασθενειών του νευρικού συστήματος είναι το περιεχόμενο στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό γλυκόζη μελέτες, ένζυμα, xloridov, χολερυθρίνη, χοληστερόλης και υπολειμματικό άζωτο.

Γλυκόζης στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό

Κανονικά, στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό που περιέχεται 2,5- 3,33 mmol / L γλυκόζη. Για να προσδιοριστεί η ποσότητα αυτού στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό χρησιμοποιώντας οποιαδήποτε από τις μεθόδους, χρησιμοποιείται για να προσδιοριστεί το επίπεδο της γλυκόζης στο αίμα. Το υγρό εξετάζεται αμέσως μετά τη λήψη, γιατί έρχεται γρήγορα γλυκόλυση. Σε οξεία και υποξεία φλεγμονή των μηνίγγων επίπεδα γλυκόζης στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό μειώνεται, μερικές φορές (το οποίο είναι πολύ σπάνιο) εξαφανίζεται εντελώς. Πιο συχνά, στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό γλυκόζης είναι απούσα σε στρεπτοκοκκική και μηνιγγοκοκκική μηνιγγίτιδα.

Αυξημένο επίπεδο γλυκόζης παρατηρείται στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό και των επιληπτικών εγκεφαλίτιδα. Όταν οι όγκοι του εγκεφάλου γλυκόζης μπορεί είτε να αυξηθεί, and drop.

Η γαλακτικού οξέος στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό

Στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό υγιών ανθρώπων ενζυματικές μεθόδους προσδιορίζεται μέση 1,54 (0,89-2,8) mmol / L γαλακτικού οξέος.

Αυξάνει πιο σημαντικά το περιεχόμενο του γαλακτικού οξέος στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό κάτω από υποξικές και καταστροφικές διαδικασίες στον ιστό του εγκεφάλου, ότι δεν είναι μόνο για διαγνωστικούς, και προγνωστική αξία. Ένζυμα, εμπλέκονται στο μεταβολισμό του ΚΝΣ, βρέθηκε στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό σε πολύ μικρότερους αριθμούς, από ό, τι στο αίμα, και προσδιορίζονται με τις ίδιες μεθόδους, και ότι στο αίμα.

Λόγω των γλυκολυτικών ενζύμων αλδολάσης συχνά ορίζονται και γαλακτικής αφυδρογονάσης και των ισοενζύμων της.

Χλωρίδια στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό

Η περιεκτικότητα σε χλωριούχο στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό φυσιολογικό ενήλικα 197 - 242 mmol / l, στα παιδιά - 195-204 mmol / l. Για τον προσδιορισμό του επιπέδου των χλωριδίων στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό μπορεί να χρησιμοποιηθεί με οποιαδήποτε τεχνική, που χρησιμοποιούνται για τη μελέτη των χλωριούχων αλάτων στο αίμα, αλλά μάλλον με την εφαρμογή της μεθόδου προσδιορισμού του όγκου με τιτλοδότηση με υγρό νιτρικό άργυρο.

Η μείωση της ποσότητας των χλωριόντων παρατηρήθηκαν σε φυματιώδη μηνιγγίτιδα, μερικές φορές - με εγκεφαλίτιδα, povyshenie- στην ουραιμία.

Χολερυθρίνης στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό

Χολερυθρίνης στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό και υγρό από τις κύστεις του εγκεφάλου είναι αιματογενή προέλευση και προκαλεί xanthosis. Για τον ποιοτικό και ποσοτικό προσδιορισμό της χολερυθρίνης χρησιμοποιεί το ίδιο δείγμα, και ότι για τον προσδιορισμό της χολερυθρίνης στο αίμα. Κανονικά χολερυθρίνης στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό δεν ανιχνεύονται.

Χοληστερόλη στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό

Σε υγιή χοληστερόλης στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό ή απουσιάζει, ή το περιεχόμενο της κυμαίνεται από ίχνη έως 0,003 - 0,005 mg / dL. Αυξημένα επίπεδα χοληστερόλης παρατηρούνται σε μηνιγγίτιδα και όγκους του εγκεφάλου, ιδιαίτερα κακοήθη.

Για τον προσδιορισμό της χοληστερόλης στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό μπορούν να χρησιμοποιηθούν Μέθοδο Engelhardt-Smirnov ή μέθοδο της Ilka.

Κανονικά, η υπολειμματική περιεκτικότητα σε άζωτο στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό μέσο όρο 8,6-14,3 mmol / l, t. Αυτό είναι. επί 50 % παρακάτω, από ό, τι στο αίμα.

Το επίπεδο των υπολειμματικών αζώτου στο ΕΝΥ ερευνάται με τις ίδιες μεθόδους, και ότι η περιεκτικότητα του υπολειμματικού αζώτου στο αίμα.

Οι γλυκοπρωτεΐνες και λιποπρωτεΐνες στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό

Η μελέτη των γλυκοπρωτεϊνών και λιποπρωτεϊνών που πραγματοποιήθηκε με ηλεκτροφόρηση σε χαρτί σε ένα προ-πυκνωμένου άγαρ πηκτή πολυακρυλαμιδίου ή φυσικού ή εγκεφαλονωτιαίο υγρό. Οι μελέτες αυτές χρησιμοποιούνται για τη διάγνωση φλεγμονωδών ασθενειών και των όγκων.

Στο εγκεφαλονωτιαίο υγρό αποκάλυψε βιολογικά ενεργές ουσίες διαφορετικής χημικής φύσης:

• Διαμεσολαβητές (ακετυλοχολίνης, νοραδρεναλίνη, dofamin, Η σεροτονίνη, γάμμα-αμινοβουτυρικό οξύ);
• ορμόνες της υπόφυσης, επίφυση και άλλων ενδοκρινών αδένων;
• νευροπεπτίδια (endorfiny, εγκεφαλίνες);
• κυκλικά νουκλεοτίδια (adenozincnklofosfat, γουανιλικό οξύ);
• προσταγλανδίνες;
• κινινών.

Οι περισσότερες από αυτές βιολογικά δραστικών ενώσεων προσδιορίζεται με ραδιοανοσοπροσδιορισμό, η οποία χρησιμοποιείται όλο και περισσότερο στην κλινική εργαστηριακή διάγνωση.