Διάγνωση της ανοσολογικά προκάλεσε στειρότητα

Κατά τη διάρκεια μιας μακράς έγγαμο βίο χωρίς τη χρήση αντισυλληπτικών, και υπό την παρουσία μικρο-περιοχή των βλεννογόνων των γεννητικών οργάνων μπορεί να συμβεί βαθμιαία εντοπίσει αντιγόνα ανοσοποίηση των σπερματοζωαρίων. Η φυσική εξέταση των συζύγων, που συνίσταται σε ένα άγονο γάμο, δεν μπορεί να προσδιορίσει την αιτία της υπογονιμότητας σε 10-15 % περιπτώσεις. Είναι σε αυτή την ομάδα των υπογόνιμων συζύγων κατά την εφαρμογή ειδικών μεθόδων έρευνας μυστικό τραχήλου της μήτρας, Τα αντισώματα σπέρματος πλάσμα και το σπέρμα του ορού είναι συχνά ανιχνεύονται (ASAT), Χρησιμοποιεί ποιοτικές και ποσοτικές δοκιμές των ανοσολογικών έρευνας.

Δοκιμή Postkoytalnыy (FCT)

Δοκιμή Postkoytalnыy (FCT) Αναφέρεται σε ποιοτική ανοσοδοκιμασία. Ένα αρνητικό αποτέλεσμα δοκιμασίας υποδηλώνει την απουσία σπερματοζωαρίων στην αυχενική μυστικό κανάλι, αλλά δεν μπορείτε να προσδιορίσετε την αιτία της απουσίας τους.

Μέθοδος. Με τον αριθμό των κινητικών σπερματοζωαρίων στην αυχενική μυστικό κανάλι, λαμβάνεται μετά τη συνουσία, προσδιορίζουν την έκταση της παραβίασης της διείσδυσης ικανότητά τους με τη στειρότητα ή ασυλίας για τους βλέννα του τραχήλου της μήτρας.

FCT είναι αναγκαία για την εκτέλεση των παρακάτω όρων: Η μελέτη πρέπει να διεξαχθεί κατά την περίοδο της ωορρηξίας, η οποία αποκάλυψε colpocytologic ή άλλη μέθοδο, μετά από προηγούμενη σύζυγοι αποχή μέσα σε 2-3 ημέρες.

Η μεθοδολογία της. Μετά τη συνήθη συνουσία για μια γυναίκα 30 λεπτά θα πρέπει να βρίσκονται στην πλάτη του, λυγίζοντας τα γόνατά σας. Douching και τον καθαρισμό του απαγορεύεται, χρειάζεται μόνο σερβιέτας, η οποία απομακρύνεται κατά τη διάρκεια της σύλληψης για τη μελέτη της βλέννας του αυλού του τραχήλου. Μετά από 2-4 ώρες, επιτρεπτή και μετά από 6-10 ώρες (ώρα, παρέλθει πριν από τη μελέτη, αναφέρεται στην ανάλυση) μετά από την επαφή του τραχήλου της μήτρας που εκτίθενται χρησιμοποιώντας έναν καθρέφτη Cuzco και ενδοτραχηλικού βλεννογόνου αναρρόφηση ή με σύριγγα φυματίνης (χωρίς βελόνα), μια πιπέτα με μια λάμπα από καουτσούκ, ή καθετήρα πολυαιθυλενίου.

Όταν πλένετε το μέσο δεν θα πρέπει να χρησιμοποιούνται απολυμαντικά, που επηρεάζουν την κινητικότητα του σπέρματος. Μια σταγόνα του προκύπτοντος βλέννα του τραχηλικού καναλιού μεταφέρεται σε ένα γυάλινο πλακίδιο θερμάνθηκαν, επικαλυμμένο καλυπτρίδα, Επικράτεια λιπαίνονται με υγρή παραφίνη να διαρρεύσει. Διατύπωση mikroskopiruyut αμέσως (προσοφθάλμιο 7X, 40X στόχος), τον καθορισμό του αριθμού και της φύσης των κινητικότητα του σπέρματος. Το φάρμακο μπορεί να ανιχνευθεί με την ενεργό σπέρμα προοδευτική κινητικότητα, παλινδρομική κίνηση (το φαινόμενο της ταλάντευσης) και σταθερά.

Αποδεκτές παρέχει πέντε είδη των συμπερασμάτων FCT.

• Άριστη (σχετικούς κανόνες): σε πέντε οπτικά πεδία έως 15-20 με ενεργό σπέρμα προοδευτική κινητικότητα και περισσότερα. Σπερματοζωάρια με το φαινόμενο της ταλάντωσης είναι μικρότερη από 25 %.
• Ικανοποίηση: σε πέντε τομείς θέα μέχρι 10 ενεργό σπέρμα προοδευτική κινητικότητα και λιγότερο 25 % σπέρματος με το φαινόμενο της ταλάντευσης.
• Κακή: μείον 5 σπερματοζωάρια σε πέντε οπτικά πεδία.
• Μείον: απουσία σπερματοζωαρίων.
• Επισφαλείς: σε πέντε τομείς δείτε περισσότερα 5 active-κινητικό σπέρμα και περισσότερο 25 % το φαινόμενο της ταλάντευσης.

Όταν ο πέμπτος τύπος των FCT Παρατηρείται συχνά το ανοσοποιητικό ασυμβατότητα μεταξύ των συζύγων, Ως εκ τούτου, είναι αναγκαίο να καθοριστεί η ACAT. Για τον προσδιορισμό της ACAT μυστικό ενδοτραχηλικών, πλάσμα, σπέρμα ή στον ορό του αίματος και να εμφανίσει τους (συγκόλληση ή ακινητοποιημένο) Απαιτεί το διορισμό των ποσοτικών ανοσολογικές δοκιμασίες.

Μια αρνητική PBC μελέτες αρχίζουν με τον ορισμό της διείσδυσης (διείσδυση) η ικανότητα του σπέρματος μέσω διεισδυτική δοκιμή (Παρ) και την επιδεκτικότητα σε έκκριση σπέρμα του αυλού του τραχήλου χρησιμοποιώντας μια επαφή δοκιμή του σπέρματος και τραχηλικής βλέννης (TKSTSS).

Δοκιμή Penetracionnyj (TP)

Το λεπτό τριχοειδή μήκος 10 Βλέπε πληκτρολογούνται κατά τη διάρκεια της ωορρηξίας βλέννα του αυλού του τραχήλου. Ένα ανοικτό άκρο του τριχοειδούς κλείνει αργίλου, και η δεύτερη τοποθετείται σε ένα δοκιμαστικό σωλήνα με ένα τεστ φρέσκο ​​εκσπερμάτωση (ΟΧΙ πια 3 ώρα μετά την εκσπερμάτωση). Με πηλό στο τριχοειδές είναι συνδεμένο με το σωλήνα σε όρθια θέση. Το δείγμα επωάζεται σε θερμοστάτη σε θερμοκρασία 37 ° C. 1 όχι. Από την ποιότητα του εκσπερμάτωση κρίνεται από το βάθος της διείσδυσης του σπέρματος στη βλέννα του αυλού του τραχήλου. Υπάρχουν τρεις τύποι των αερίων του θερμοκηπίου.

• Καταφατική - Το βάθος διείσδυσης (η μεγαλύτερη απόσταση σε εκατοστά, ταξίδεψε τουλάχιστον ένα σπερματοζωάριο) άνω 5 εκατοστά; ο αριθμός των σπερματοζωαρίων στο σημείο της μέγιστης διείσδυσης περισσότερο 5 στο θέαμα, και ο αριθμός των κινητικών σπερματοζωαρίων στο άνω τρίτο του τριχοειδούς είναι μεγαλύτερη από 50 %.
• Επισφαλείς - Το βάθος διείσδυσης μέχρι 5 Δείτε λιγότερο αριθμό των σπερματοζωαρίων 5, κινητικότητα τους στο ανώτερο τρίτο των τριχοειδών ρου 50%.
• Μείον - Το βάθος διείσδυσης του ρου του σπέρματος 1 εκατοστά.

Η ικανότητα του σπέρματος να διείσδυσης Εξαρτάται από την φάση του έμμηνου κύκλου. Αρχίζει να βγει από την 9η ημέρα του έμμηνου κύκλου,, βαθμιαία ενεργοποίηση, φτάσει τη μέγιστη έκφρασή της στην περίοδο της ωορρηξίας, πραγματοποιήθηκε σε αυτό το επίπεδο για δύο ημέρες, και στη συνέχεια μειώνεται σταδιακά.

Σπέρματος Τεστ επαφής και τραχηλικής βλέννας (TKSTSS)

Στη slide τοποθετείται μία μικρή σταγόνα της βλέννας από του τραχήλου της μήτρας, ληφθεί από γυναίκες κατά τη διάρκεια της ωορρηξίας, και μια σειρά από το ίδιο μέγεθος σταγόνας από εκσπερμάτωση. Και οι δύο σταγόνες καλύπτεται με ένα γυάλινο κάλυμμα, το οποίο είναι ελαφρώς πατημένο για, ενώνονται σε πτώση. Το φάρμακο τοποθετείται σε ένα υγρό θάλαμο (Petri πιάτο με υγρό μπατονέτα) και επωάζονται σε θερμοστάτη σε θερμοκρασία 37 ° C. 1 όχι.

Υπό αυτές τις συνθήκες, η κανονική σπέρμα διαπεράσει το μυστικό της κανονικής τραχήλου της μήτρας, όπως μπορεί να δει κανείς κάτω από το μικροσκόπιο σε μεγέθυνση 200Χ. Για να ληφθεί υπόψη για την αντίδραση κοντά στο όριο μεταξύ δύο μέσων μετρά τον αριθμό των διαπερνούν το μυστικό του αυλού του τραχήλου σπέρμα σε δύο γειτονικά πεδία άποψη.

Με εξαιρετική TKSTSS σε δύο οπτικά πεδία αποκαλύπτει περισσότερα 25 ενεργά κινητικά σπερματοζωάρια στο φαινόμενο της ταλάντευσης μικρότερη 25 %. Αν ικανοποιητική TKSTSS σε δύο οπτικά πεδία αποκάλυψε περισσότερα 15 ενεργά κινητικό σπέρμα, TKSTSS σε χαμηλά - λιγότερο από 15. Ένα αρνητικό απουσιάζει TKSTSS διείσδυσης, εάν αμφισβητήσιμη - ένα φαινόμενο ταλάντωσης υπερβαίνει 25 %.

Σε αυτή τη δοκιμή, όπως στην PCT, το φαινόμενο της ταλάντευσης, υπερβαίνει 25 %, πιθανός, Δείχνει την παρουσία των ACAT και απαιτεί τον διορισμό των ποσοτικών ανοσολογικές δοκιμασίες.

Χρησιμοποιώντας το σπέρμα και του τραχήλου της μήτρας εκκρίσεις κανάλι άγονο και γόνιμα άτομα σε διάφορες ποσότητες με τη χρήση TKSTSS τον εντοπισμό του συζύγου άγονη.

• Παράδειγμα 1. Λαμβάνεται ένα μυστικό κανάλι του τραχήλου της μήτρας στις γυναίκες υπογόνιμα ζευγάρια και εκσπερμάτωση ελέγχου υγιών ανδρών. Εξαιρετική TKSTSS δείχνει μια αδύναμη ικανότητα διείσδυσης του σπέρματος του συζύγου της, και την ευαισθησία των φυσιολογική έκκριση του τραχήλου της μήτρας.
• Παράδειγμα 2. Ληφθεί πλήρως μυστικό του αυλού του τραχήλου υγιή γυναίκα και ο σύζυγός της εκσπερμάτωση των υπογόνιμων ζευγαριών. Bad TKSTSS δείχνει μια αδύναμη διείσδυση των σπερματοζωαρίων.
• Παράδειγμα 3. Μυστικών ενδοτραχηλικών γυναίκες υπογόνιμα ζευγάρια και εκσπερμάτωση ελέγχου υγιών ανδρών. Bad TKSTSS δείχνει κατωτερότητας μυστικό τραχήλου της μήτρας, η οποία προφανώς δεν διαπερνούν φυσιολογικών σπερματοζωαρίων.

Ποσοτικές ανοσολογικές δοκιμές

Mikroagglyutinatsionny δοκιμή Friberg

Mikroagglyutinatsionny δοκιμή Friberg (TF) αρκετά ευαίσθητα και είναι διαθέσιμο για κλινική διαγνωστικά εργαστήρια. Χρησιμοποιώντας TF μπορεί να προσδιοριστεί η παρουσία ΑΟΑΤ και συγκόλληση τίτλος σε διάφορα υλικά (εκσπερμάτωση πλάσμα, αποσπάσματα της βλέννας του τραχήλου της μήτρας και στον ορό και των δύο συζύγων).

Αντιδραστήρια:

1. Αλατόνερο ρυθμισμένο με φωσφορικό (FSB) 0,01 М pH 7,2-7,4.

2. Vazelinovoe πετρελαίου.

Εξοπλισμός: μικροσκόπιο, σύριγγα φυματίνης, mikroagglyutinatsionnye σιφωνισμού 1 ml, χωρητικότητα μικροπιπέττα 0,1 ml.

Μέθοδος. Ορού εξέταση αίματος αδρανοποιείται με επώαση σε επωαστήρα στους 56 ° C. 30 m. Εκσπερματίζω, που λαμβάνεται με αυνανισμό, αραιώνεται αμέσως, έτσι ώστε η FSB, η συγκέντρωση του σπέρματος ήταν 40 εκατομμύριο. σε 1 ml.

Λόγω του υλικού (εκσπερμάτωση πλάσμα, εξαγάγετε το μυστικό του αυλού του τραχήλου ή του ορού) ετοιμάζει μια σειρά αραιώσεων 1:4 να 1:128 χρησιμοποιώντας ως υγρό για FSB αραίωση. Σε φρεάτια με mikroagglyutinatsionnyh παραφινέλαιο πλακιδίων φυματίνης με σύριγγα εισάγεται μια βελόνα (υπό vazelinovoe πετρελαίου) Μικρές σταγόνες από κάθε αραίωση του υλικού δοκιμής. Μετά από κάθε δείγμα πλένεται τέσσερις φορές η σύριγγα. Σε κάθε αραίωση προστίθεται στο 5 φορές μικρότερη πτώση της εκσπερμάτισης, και 4 h σε θερμοκρασία δωματίου που ανιχνεύεται συσσωματώματα. Τελευταία αναπαραγωγής, σύμφωνα με την οποία κάτω από ένα μικροσκόπιο σε μεγέθυνση 100Χ ανιχνεύεται 3 συγκολλήσει υπό αναθεώρηση και περισσότερα, συγκόλληση τίτλος αντιστοιχεί ACAT.

Spermoimmobilizuyuschy δοκιμή Izodzhima (SIT).

Ο τίτλος ακινητοποίησης ACAT ορού, εκχύλισμα πλάσμα ή σπέρμα μυστικό τραχήλου καθορίζεται από τον αριθμό των κινητικών σπερματοζωαρίων με την παρουσία αντιγόνων (σπέρμα).

Εξαρτήματα.

1. Εκσπερματίζω, που παράγεται και παρασκευάζεται παρομοίως, TF για χρήση FSB; κινητικότητα υπερβαίνει 70 %.

2. Komplementsoderzhaschaya ορό των ινδικών χοιριδίων.

3. Immune ανθρώπινου ορού (ICHS), δίνοντας με την παρουσία του συμπληρώματος μέσω 1 h επώαση ακινητοποίηση 90 % σπέρμα.

4. Φυσιολογικό ανθρώπινο ορό (NCHS), αδρανοποιείται με θέρμανση σε μία θερμοκρασία 56 ° C. 30 m.

5. Η δοκιμή απενεργοποιημένο ορό, πλάσμα και σπέρμα απόσπασμα μυστικό τραχήλου της μήτρας.

Μέθοδος. Για να αξιολογηθεί δραστηριότητα συμπληρώματος ακινητοποιώντας το 1ο σωλήνας εισάγεται 0,5 ml ισοτονικού διαλύματος χλωριούχου νατρίου, να προσδιορίσει τις μεταβολές στην κινητικότητα του σπέρματος, χωρίς ASAT το δεύτερο δοκιμαστικό σωλήνα - 0,5 ml ΕΣΥ, ελέγχου ακινητοποίηση τρίτο σωλήνα - 0,5 ml του ICHS και για τον προσδιορισμό της ACAT ακινητοποίηση του 4ου σωλήνα - 0,5 ml ορού, ή στο πλάσμα του σπέρματος, εκχύλισμα ή έκκριση ενδοτραχηλικών.

Στη συνέχεια, κάθε σωλήνας εισάγεται με 0,1 ml συμπλήρωμα. Το τελευταίο πράγμα σε όλους τους σωλήνες προστίθενται 0,05 ml εναιωρήματος σπέρματος σε μία συγκέντρωση 40 εκατομμύριο. σε 1 ml. Τρίποδο σωλήνες τοποθετήθηκαν σε έναν επωαστήρα σε θερμοκρασία 37 ° C 1 όχι. Οι σωλήνες απομακρύνθηκαν από το φούρνο και προσεκτικά ανακινείται ώστε να αντικατοπτρίζει πάγια συγκόλληση σπέρμα.

Για την αξιολόγηση των αποτελεσμάτων, σε μεγάλη μεγέθυνση μικροσκόπιο (400Χ) υπολογίζεται το ποσοστό κινητικού σπέρματος σε μια σταγόνα του δοκιμαστικού σωλήνα, εναποτίθεται σε γυάλινο slide και καλύπτεται με ένα κάλυμμα. Ομοίως, καθορίζει το ποσοστό του κινητικού σπέρματος στα σταγονίδια των δοκιμαστικών σωλήνων με το NHS και ICHS. Το αποτέλεσμα της αντίδρασης υπόψη από τον τύπο

SIT = K / A

όπου K - ο αριθμός των κινητικών σπερματοζωαρίων στον έλεγχο με τον ICHS και του NHS;

Σχετικά με - τον αριθμό των κινητικών σπερματοζωαρίων σε ένα δοκιμαστικό σωλήνα (δοκιμή ορός, ή στο πλάσμα του σπέρματος, ή το μυστικό του τραχήλου της μήτρας).

Με μέσο όρο SIT<2 το τεστ είναι αρνητικό (αριθμός κινητικών σπερματοζωαρίων στον έλεγχο και στους δοκιμαστικούς σωλήνες του περίπου το ίδιο), Αν ο δείκτης CTI>2 - Το τεστ είναι θετικό, t. Αυτό είναι. στο υλικό (ορρός, πλάσμα ή σπέρμα απόσπασμα μυστικό τραχήλου της μήτρας) Τα ακινητοποιημένα ACAT.

• Παράδειγμα 1. Ελέγχου επί του εδάφους για να ICHS - 10 % κινούμενα σπερματοζωάρια. Ο δεύτερος έλεγχος με το ΕΣΥ - 80% κινούμενα σπερματοζωάρια. Οι δύο μηχανισμοί ελέγχου μαζί - 90 % κινούμενα σπερματοζωάρια. Στο δοκιμαστικό σωλήνα - 80 % κινούμενα σπερματοζωάρια.

SIT = R / D = 90/80 = 1,1

Το τεστ είναι αρνητικό, ακινητοποιημένο απουσιάζει ACAT.

• Παράδειγμα 2. Στο δοκιμαστικό σωλήνα - 40 % κινούμενα σπερματοζωάρια, Ωστόσο, με τον έλεγχο, στο Παράδειγμα 1.

KN = 90/40 = 2,2

Η θετική δοκιμασία. Υπάρχει ακινητοποιημένο αντίσωμα (ASAT), μέσω της οποίας την κινητικότητα του σπέρματος μειώνεται σημαντικά.