Anämie, mit Folsäure-Mangel assoziiert

Was immer der Grund Folsäuremangel-Anämie wird durch das Auftreten in den Knochenmark Megaloblasten gekennzeichnet, Markzerstörung erythrokaryocytes, patsitopeniey, Makrozytose und hyperchromia rote Blutkörperchen und manchmal - psychische Störungen.

Folic (pteroilglutaminovaya) Säure (Vitamin B₉) Es besteht aus drei Komponenten:

• Pteridinring;
• P-Aminobenzoesäure (bilden zusammen pteroievuyu Säure);
• Glutaminsäure.

Das Molekulargewicht der Folsäure - 441. Folsäure in Form von Tetrahydroderivaten aktiv ist. Folsäure in verschiedenen Formen in den menschlichen Körper ist etwa 5-10 mg. Aktien unter Verletzung seines Umsatzes in den Körper kann mehr als erschöpft sein 4 des Monats.

Der Tagesbedarf an Folsäure ist 100-200 Mikrogramm, Schwangerschaft, hämolytische Anämie, oft erhöht es.

Die Gesamtmenge von Folsäure in der Nahrung mit der vollen Leistung von 500-600 Mikrogramm pro Tag. Folsäure - Folate in erheblichen Mengen in der Leber enthaltenen, Hefe, Spinell, Fleisch. Mehr 50 % Folsäure, in Essen, Es kann brechen, wenn gekocht.

Folsäure ist im oberen Dünndarm resorbiert. Die Fähigkeit des Darms Folsäure absorbieren viel größer ist als die tägliche Erfordernis.

Folsäure ist an der Synthese von Pyrimidin und Purinbasen, zusammen mit Methylcobalamin - die Synthese von timidinm nofosfata uridinmonofosfata. Folate Coenzyme Mehrere in einer Reihe von Reaktionen beteiligt. Insbesondere, Tetrahydrofolat ist an der Synthese von Glutaminsäure Histidin.

Die Ätiologie und Pathogenese der Anämie bei Folsäuremangel

Folsäuremangel, sowie Defizit von Cobalamin, Es führt zu der Entwicklung von Megaloblastenanämie.

Malabsorption von Folsäure bei Personen beobachtet, Resektion des Dünndarms, insbesondere Jejunum, sowie im langfristigen Einnahme von Antikonvulsiva wie Diphenylhydantoin (difenina) und Phenobarbital (Lumen). Die Absorption von Folsäure wird gebrochen, als der Anguss und Zöliakie. Folsäuremangel, sowie Defizit von Cobalamin, beobachtet bei Blind loop-Syndrom. Durch die Darmwand und in die Rückenmarksflüssigkeit beschrieben, seltene Fälle von Erbkrankheiten der Folsäure Transport. Absorption anderer Stoffe ohne Leiden.

Folsäure-Mangel bei Neugeborenen in Frühgeburten beobachtet, Verletzung der Darmabsorption, fed Ziegenmilch, enthaltend eine geringe Menge an Folsäure.

Eine signifikante Malabsorption von Folsäure kann bei Patienten auftreten,, Alkoholiker.

Erhöhten Verzehr von Folsäure während der Schwangerschaft kann zu einem Mangel an Folsäure führen, Doch in den Industrieländern heute selten ist. Folsäuremangel in der Schwangerschaft auftreten, wenn schlechte Ernährung, die Anwesenheit von Anämie, verwenden Sie eine große Menge von vor der Schwangerschaft Alkohol.

Klinische Manifestationen der Folsäuremangel

Folsäuremangel bei Kindern und jungen Frauen,. Zur gleichen Zeit, Patienten klagen über allgemeine Schwäche, Schwindel. Im Gegensatz zu Cobalaminmangel wunde Zunge selten beobachtet. Parästhesien, und andere Zeichen der Standseilbahn Myelose fehlt. Lederhaut oft ikterichnost.

Im Gegensatz zu dem Mangel an Cobalaminmangel Folsäure selten beobachtet wird gistaminoupornaya Akhil, gastratrophia, Obwohl die Verringerung der Magensekretion oft.

Für Folsäuremangel, sowie für Cobalaminmangel, gekennzeichnet durch das Auftreten in dem peripheren Blut Makrozytose, Megalozyten und Megaloblasten, die Anwesenheit von hyperchrome Anämie, Reduzieren der Anzahl von Reticulozyten, Blutplättchen und Leukopenie mit neutrophilen Verschiebung nach links und rechts. Im Knochenmark - Megaloblasten.

Die Veränderungen im Nervensystem, die sich von der Erscheinungsformen an B₁₂-Mangelanämie.

Bewiesen, dass Menschen mit Epilepsie, Folsäuremangel führt zu häufigen Angriffe, ihrer größeren Schweregrad. Dies ist besonders wichtig aufgrund der Tatsache, dass die Einnahme von Antiepileptika kann Malabsorption von Folsäure führen. Nach der Literatur, bei Personen mit Schizophrenie Folsäure-Mangel verursacht Exazerbationen, schwereren Symptomen und weniger wirksamen Behandlung.

Differentialdiagnose von Cobalaminmangel und Folsäure

Zur differentiellen Diagnose von Cobalaminmangel und Folsäure verwendet wird Radioimmunverfahren zur Bestimmung von Folsäure im Serum und insbesondere in Erythrozyten. Für den Inhalt der Cobalamin durch mikrobiologische Verfahren bestimmt. Als Testorganismus Streptococcus faecalis und Lactobacillis casei verwendet. Normalerweise ist der Gehalt an Folsäure im Blutserum Bereiche, Nach Ansicht der Autoren, mit verschiedenen Forschungsmethoden, von 3 bis 25 ng / ml, und Erythrozyten - von 100 bis 425 ng / ml.

Folsäuremangel ab, wenn die Höhe des Serum-, und in Erythrozyten. Bei Mangel kolabaminov Folsäure-Gehalt im Blutserum oft steigt, und Erythrozyten manchmal reduziert werden, obwohl der Rückgang, meistens, ein kleines.

Für die Diagnose der Folsäuremangel auch verwendet wird, Load-Methode Histidin (15 g), dann definieren Sie den Inhalt der Säure im Urin formiminglutaminovoy. Normalerweise wird der Hauptteil der Form von Glutaminsäure Histidin. Mit Urin 1-18 mg formiminglutaminovoy Säure. Bei Mangel an Folsäure für 8 Stunden nach der Einführung in den Körper wird aus dem Urin frei 20 bis 1500 mg formiminglutaminovoy Säure. Eine signifikante Anzahl von formiminglutaminovoy Säure im Urin nach der Verabreichung von Histidin in Personen ausgeschieden, mit Methotrexat behandelt. Bei Mangel an Cobalamin, Leberzirrhose die renale Ausscheidung von Säure erhöht formiminglutaminovoy, in geringerem Maße, als mit einem Defizit von Folsäure. Normale Konzentrationen im Urin Methylmalonsäure Gehalt steigt formiminglutaminovoy Säure Histidin nach Erhalt Beweis Mangel an Folsäure, anstelle von Cobalamin.

Es hilft, diese beiden Staaten und Radionuklid-Studie unterscheiden. Bei Mangel an Cobalamin, Es handelt sich um eine Verletzung der Sekretion von Intrinsic-Faktor, eingeschränkter Aufnahme von markiertem Cyanocobalamin, ein Mangel an Folsäure, wird richtig absorbiert.

Bei Mangel an Folsäure, dessen Einführung in den Körper führt zu einem höheren Gehalt von Retikulozyten, wohin Injektion von Cyanocobalamin (Derivate) unwirksam. Folsäuremangel Methylcobalamin erhöht den Grad der Retikulozyten.

Definieren von Index Segmentierung Neutrophilen

Zählen Sie die Anzahl der neutrophilen Granulozyten, mit 4 Segment und mehr (Gesamt 200 Zelle). Bestimmen den Prozentsatz an Zellen, mit 5 Segmente und mehr, bezogen auf die Menge an Zellen, mit 4 Segment. Der Index wird nach der Formel:

IS =(KS (5 und mehr))/KS(4);

wo IC - index Segmentierung;

KS (5 und mehr) - Die Anzahl der segmentierten neutrophilen Granulozyten (auf 200 Zelle), bei dem die Anzahl von Segmenten gleich ist 5 oder mehr;

KS (4) - Die Anzahl der segmentierten neutrophilen Granulozyten, bei dem die Anzahl von Segmenten gleich ist 4.

Normalerweise wird diese Indexbereiche 2,5 bis 25 %. Wo, wenn es überschreitet 30 % (Vibration 120%), Sie können über Hochsegmentierung Neutrophilen sprechen. Er beobachtete Mangel an Folsäure, metilkoʙalamina, und Urämie.

Bestimmung von Methylmalonsäure im Urin von Giordio und Plaud

Reagenzien.

1. Das Ionenaustauschharz Dowex-ZX4 (Chlorid-Form, 200-400 Mesh-). Das Harz wurde mit fünf Volumen destilliertem Wasser gewaschen 3 mal, wurde in zwei Volumina destilliertem Wasser suspendiert und in einer dunklen Schale bei 4 ° C gelagert.

2. Eine Lösung von para-Nitroanilin 0,075 % hergestellt, indem man 37,5 mg Reagenz 500 ml 0,2 M Salzsäurelösung. An einem dunklen Topf, Es blieb für mehrere Monate bei Raumtemperatur stabil.

3.Acetat-Puffer (pH-Wert 4,3) hergestellt aus 1 M Natriumacetat und 1 M Essigsäurelösung.

4.Diazoreaktiv: 4 ml 0,5 % Natriumnitrat-Lösung wurde gemischt mit 15 ml para-Nitroanilin. Die Mischung wurde in einem Kühlschrank bei 4 ° C gegeben, und die gekühlte Lösung wurde zugegeben 4 ml 0,2 M Natriumacetat. Reagenz stabil bei Temperaturen 4 ° C für einen Tag.

5.Standard 0,05 M-Lösung von Methylmalonsäure: 295 mg Methylmalonsäure in gelöster 50 ml Wasser.

Verfahren

Urin wurde in eine Glasflasche gesammelt und eingefroren, bis die Studie. Um die Ladungsteil von Urin untersuchen (20- 25 ml), aufgetaut, zentrifugiert, und der Überstand wurde unter Verwendung einer schwachen Lösung von Natriumhydroxid oder Salzsäure zum Einstellen des pH gesammelten 6,5.

Chromatographiesäule Höhe 20 cm und einem Durchmesser 1 cm wurde mit Dowex-ZX4 gefüllten. Die Harzschicht sollte innerhalb sein 3 cm. Wird durch das Harz geleitet 5 ml Urin, mit destilliertem Wasser gewaschen (2 × 50 ml bei einer Rate von nicht mehr als 15 ml 1 von). Methylmalonsäure kann von dem Harz eluiert werden, 20 ml 0,1 M Salzsäurelösung. Weiter 2 ml Eluat wurden gemischt mit 3 ml 1 M Acetatpuffer, pH 4,3 in einem Teströhrchen mit einem Glasstöpsel (15×2cm). Zu dem Gemisch wird 3 ml kaltem diazoreaktiva, wobei der pH-Wert angehoben 4,0. Die Mischung wurde in einem Wasserbad auf eine Temperatur erhitzt 94 ° C 3 min und 2 ml 3 M Natronlauge. Das Rohr wurde dann aus dem Wasserbad entfernt, mit Stopfen verschlossen und der Inhalt gerührt,. Das Gemisch wurde bei Raumtemperatur abgekühlt 10 min und bei einer photometrischen 620 nm in einer Küvette mit einer Weglänge 1 cm.

Als Kontrolle wurde eine Mischung aus, bestehend aus 2 ml 0,1 M Salzsäurelösung, 3 ml und diazoreaktiva 3 ml Acetatpuffer. Methylmalonsäure Standardlösung besteht aus den gleichen Komponenten und 0,02 ml 0,05 M-Lösung von Methylmalonsäure. Die Absorption dieser Lösungen wurden unter den gleichen Bedingungen gemessen.

Inhalt Methylmalonsäure (mg) pro Volumeneinheit der Urin (1 l) bestimmt durch die Formel:

(IS_Beispiel-IS_Steuerung)/(IS_Standard-IS_Steuerung)*EIN *((1000*T)/M)

wobei E - Absorption verschiedener Proben;

A - die Höhe der Methylmalonsäure in einem Standard-Teströhrchen, ml;

1000 - Die Menge des Urins, für die Forschung genommen, ml;

T - die Menge an Chlorwasserstoffsäure, zur Elution genommen, ml;

M - die Nummer des Eluats, für die Forschung genommen, ml.

Unter den obigen Bedingungen kann die Formel wie folgt vereinfacht werden::

(IS_Beispiel-IS_Steuerung)/(IS_Standard-IS_Steuerung)*236

Wo, Wenn die Menge des Methylmalonsäure im Urin größer ist 300 mg / l, sollte mit Acetatpuffer Eluat und diazoreaktivom neu gemischt werden, aber stattdessen 2 ml Eluat ist ratsam, 4- nehmen 10 mal niedriger und bringen Sie die Lautstärke auf 2 ml 0,1 M Salzsäurelösung. Bei der Berechnung der Verwässerung berücksichtigt werden.

Normalerweise pro Tag mit Urin 0,6-4,7 mg Methylmalonsäure. Bei Mangel an Cobalamin täglichen Ausscheidung von Methylmalonsäure Lauf 294 mg. Normalerweise Empfang 10 g Valin nicht Clearance von Methylmalonsäure erhöht, Cobalaminmangel erhöht die Ausscheidung von Methylmalonsäure.

Bestimmung der Methylmalonsäure im Urin von Green

Reagenzien.

1. Äther.
2. Ethanol.
3. Eine Lösung von Chlorwasserstoffsäure 0,1 M.
4. Ammoniumsulfat.
5. Сильноосновная смола деацидит FF (200 Gitter, Chlorid-Form).
6. Eine Lösung von Natriumnitrat 0,5 % (Gewicht / Volumen).
7. Eine Lösung von para-Nitroanilin (750 mg, gelöst in 1 l 0,2 M Salzsäurelösung).
8. Natriumacetat 0,2 M.
9. Acetat-Puffer 1 M, pH 4,3: gemischt 1 M Natriumacetatlösung und 1 M Lösung von Essigsäure in dem Verhältnis 16,35:33,9.
10. Eine wässrige Lösung von Natriumhydroxid 3 M.

EIN. Standardlösung Methylmalonsäure: 100 mg, gelöst in 100 ml Wasser, im Kühlschrank gelagert.

B. Arbeitsstandard Methylmalonsäure: Standardlösung in verdünnte 20 Zeit 0,1 M Salzsäurelösung (1 ml des Standards und 19 ml Salzsäure). Diese Menge an Methylmalonsäure äquivalente 100 mg Methylmalonsäure 1 l Urin-Testbedingungen.

Zur Herstellung von gemischten diazoreaktiva 4 ml 0,5 % Natriumnitrat-Lösung und 15 ml para-Nitroanilin. Das Gemisch wurde in ein Eisbad gestellt und fügen 4 ml 0,2 M Natriumacetat.

Verfahren.

Urin wurde für einen Tag gesammelten, gemessen sein Volumen und 10 ml angesäuertem 1 M Schwefelsäurelösung auf pH 2,0 oder etwas darunter. Ammoniumsulfat wurde bis zur Sättigung zugegeben. Das Gemisch wurde in einen Scheidetrichter dreimal mit Ether und Ethanol in einem Verhältnis eingebracht und extrahiert 3:1. Um die Bildung der Emulsionsmischung zu verhindern, extrahiert im Überschuss verwendet.

Der Extrakt wurde durch eine kleine Säule geleitet Chromatographie (1 – 1,5 cm Durchmesser), fertiggestellt 5 ml Harz. Die Säule wurde gewaschen, 50 ml destilliertem Wasser. Methylmalonsäure eluiert 0,1 M Salzsäurelösung. Nach der Elution ausgewählt 2 ml Eluat, W angefügt ml Acetatpuffer und 3 ml diazoreaktiva.

Nach dem Mischen wurde das Röhrchen in ein Wasserbad bei einer Temperatur platziert 95 ° C 3 m. Dann fügte 2 ml 3 M Natronlauge und einmal geschlossenes Rohr Stopper, um Kontakt mit Luft zu minimieren. Nach dem Abkühlen wurde die Absorption bei einer Wellenlänge gemessen, 620 Sie. Für die Blindprobe anstelle der Verwendung des Eluats 2 ml 0,1 M Salzsäurelösung, und für die Standardlösung - 2 ml des Arbeitsstandards.