Mikroskopické vyšetření mozkomíšního moku

Citoza definice

V míšní tekutiny zdravých lidí obsahuje velmi malé množství buněk. Klinický význam mají hlavně leukocyty (lymfocyty). Chcete-li spočítat bílých krvinek neruší erytrocyty, zničit ani rozpuštěného přidáním mozkomíšního moku 1/10 část kyseliny octové s fuksinom. Fuchsinu skvrnu âdrosoderžaŝie buněk v červené barvě. Pro barvení leukocytů pomocí činidla Samson (smíšený 30 ml ledové kyseliny octové, 2 ml tekuté fenol, 2 ml alkoholu řešení Fuchsin 1 : 10 a přidejte 100 ml destilované vody). Reagent odolný, Dobrý barvy buňky a během několika hodin je drží z buňky.

Aplikovaná řešení, zahrnující 5 ml 10 % kyselina octová a 0,1 g metilvioleta. Je méně odolný, modrá barva buňky.

V důsledku cytolytic mozkomíšního moku vlastnosti počítejte buněk ihned po jeho převzetí. Objem kapaliny v trubici kapky nebo mikropipeta v poměru 10 části mozkomíšního moku a 1 zbarvení roztoku a nechte 10-25 m pro malbu buňky. Pro chov, můžete použít mixer pro leukocyty. Mozkomíšního moku buňky velmi rychle držet stěny trubek, Tedy tekuté, in vitro se nachází, před vyšetření je nutné důkladně míchejte rotační pohyby mezi dlaněmi.

Pro výpočet citoza používané fotoaparát Fuchs-Rosenthal. Výpočet produkce celé tabulky pomocí 5 minuty po naplnění komory. Počet buněk v 1 l je dán vzorcem

X =((A) * 11)/(3.2*10)

kde X je počet buněk v 1 l; Je počet buněk, pohlížet na povrchu oka; 3,2 je objem komory; 11/10 -stupeň ředění.

Vytváření povoleno se počítá jako zlomek, např 14/3, kde 14 počet buněk je započítána v komoře, 3 je kulatý obrázek objem komory. Když velký počet buněk stačí je považovat ve stejném polovinu mřížky a zdvojnásobit počet. S ostře vyjádřené pleocitoze (značný nárůst počtu buněk) Je přípustné, aby počet buněk v 16 malé čtverečky a násobit výsledné číslo na 16.

V nepřítomnosti fotoaparát – můžete použít Rosenthal Fuchs Gorâeva komory účetních s podstatně menší kapacitou, tak to se počítá buňky v nejméně tři čtverce, vypočte se aritmetický průměr a vynásobit jej 1,2. Násobitel 1,2 pochází ze vzorce

X =((A) * 11)/(0.9*10)

kde je fotoaparát kapacita 0,9, 11/10 -stupeň ředění.

Při počítání buněk v mozkomíšním moku není rozpuštěn jeden z první kapky, vyplývající z jehly, umístěny ve fotoaparátu – a definovat Rosenthal Fuchs mobilní čísla, jak je uvedeno výše.

Za normálních okolností počet buněk (lymfocyty) v 1 MCL mozkomíšního moku z komor mozku a mozek mozžečkovo nádrž je 0 – 1, a v kapalině, získané z lumbální punkce – 2-4.

Děti do věku tří měsíců 1 MCL mozkomíšního moku se nachází až na 20-23 buňky, až na jeden rok je 14-15, až na dva roky, 11-14, od dvou do pěti let – 10-12, od pěti do sedmi let-8-10, sedm až deset let – 6-8, více než deset let-4-5.

Když meningitida, abscesse a mozkových nádorů počet buněk v mozkomíšním moku se zvyšuje.

Ve studii hemoragické mozkomišní tlak v některých případech je nezbytné stanovit její skutečnou citoz. Pro tento účel použití Friedman metoda: hemoragická tekutin zisk činidlem Sampson zjistit, citoza a izotoniceski roztoku chloridu sodného se počet červených krvinek 1 MCL mozkomíšního moku.

Například, počet buněk v 1 MCL je 20, počet červených krvinek – 3600. Počet erytrocytů a leukocytů v krvi pacienta se učit od celkové analýzy, provádí před lumbální punkce. Například, v 1 l krve 4 200 000 erytrocytů, 7000 leukocyty. Zde člověk musí leukocytů 4200000/7000 ISK = 600 erytrocyty.

Chcete-li získat hodnoty true citoza tvoří rovnici:

na 600 červených krvinek- 1 Leukocytů;

na 3600 erytrocytů, leukocytů X, Tudíž,

X = 3600/600 = 6 leikocitov.

Skutečný citoz mozkomíšního moku 20-6 = 14 buňky 1 l.

Použití této metody je omezená, protože pro takové studie mozkomíšního moku s příměsí krve.

Stanovení počtu červených krvinek v mozkomíšním moku je nastavena na stanovení závažnosti stavu pacienta s nitrolební krovoislianiah.

V přítomnosti 1 2000-5000 µl erytrocytů mozkomíšního moku barevné v růžové, 900— 1000 erytrocytů je jen mírně opalesciruet. Bezbarvé kapaliny mohou být detekovány nižším obsahem erytrocytů. Klinický význam sedimentace vzestup hladiny v dynamice.

Diferenciace buněk mozkomíšního moku se odehrává v počítání komoře v podobě nativní a barevné.

Při vysokém zvětšení (okulár 10 x a 15 x, objektivu 40 x) počitatelné komora dávat pozor na množství buněk, formulář, umístění a velikost zrn, přítomnost vměstků v cytoplasmě. Snadno rozlišit lymfocyty, neutrofilní granulocyty, makrofágy. OK v mozkomíšním moku obsahovala pouze lymfocyty.

Kompletní specifikace buněčné složení mozkomíšního moku je vyšetřovaného obarvený přípravy. Buňky malované horší, než krevní buňky. Existuje několik způsobů, jak barvy: od Rosina, Voznoj, Papanicolaou, Pavel, Květen Grunwald, Pappengejmu.

Definice pleocitoza metody luminiscenční mikroskopie

Sbírat snímku dal DAB mozkomíšního moku a promícháme s flûorohromov barvivo (směs voda sůl řešení akridinovogo Orange a rhodaminu v chovu 1:20000). Vařené lék zkoumal pod fluorescenční mikroskop ML-2 v modré fialové paprsky viditelného spektra, pomocí kombinace filtrů, buzení: FS 1-4, ESS 14-4, BS 8-2 a uzamčení filtru JS-1 s immersionnym objektivem. Jako neflûoresciruûŝego používá ponoření oleje pro výzkum dimethylftalat (ortoftalevoj kyseliny tereftalátové).

Na tmavém pozadí zorném polinukleary a lymfocyty jsou snadno identifikovat zelená záře cytoplazmy. Počet řádků 100 buňka, vzhledem k počtu lymfocytů a neutrofilní granulocyty.

Lymfocyty Neutrofilní granulocyty se liší od jádra v přírodě (glybčatoj struktura s Oranžové podtóny) a světle zelené fluorescence.

Neutrofilních granulocytů mít jasnou strukturu, chromatinu jejich jader lit diffusely, uniforma světlé- Zelená. Cytoplazma žlutá- Zelená, rozptýlené cihlově červené granulí.

V případě mírné citoza nativní spinnomozgovu kapaliny a Kal odstředivky.

Luminiscence mikroskopické vyšetření mozkomíšního moku je snadné učinit závěr o nejtrofil′nom, Lymfocytární nebo polymorphically mobilní pleocitoza.

Morfologické charakteristiky mozkomíšního moku buněk

Lymfocyty

V míšní tekutiny zdravých lidí nalézt malé a středně velké lymfocyty (1-2 v 1 l) velikost 4-6 µm. To je ve tvaru kulaté buňky s velkým glybčatym jádro a cytoplazmou velmi úzké.

Na limfoidnom pleocitoze (tuberkulózní meningitida, cysticerkóza) malé a střední velikosti se objeví velké lymfocyty (8— 9 μm), Občas můžete nalézt lymfocyty s přímé dělení jádra.

Počet lymfocytů (spolu s ostatními buňkami) zvýšení mozkomíšního moku v mozku nádory, chronický průběh meningitidy. Zvýšený počet lymfocytů v období doléčovací u neurochirurgických onemocnění dochází v důsledku zvýšení počtu neutrofilní granulocyty a svědčí o příznivém výsledku.

Plazmatické buňky

Plazmatické buňky v mozkomíšním moku mohou být detekovány jen tehdy, když dlouhodobě probíhající zánětlivé procesy v mozkové tkáně a mozku střeva. Plazmatické buňky morfologie je stejná, krve nebo kostní dřeně punctate.

Toto kulaté buňky s èkscentričeski nachází jádro a intenzivně barevné, Bazofilní Cytoplazma. V některých případech jejich počet může dosáhnout 26%. Plazmatické buňky se nacházejí také v pooperačním období a když pomalý proud reparativní procesů poranění mozku.

Gistiocitы

V normálním mozkomíšního moku se někdy detekován jako jediné kopie.

V přípravcích, obarvený Histiocyty mají velké jádro a relativně úzké cytoplazmy. Velikost buněk 7 na 10 m, oblé nebo nepravidelné. Jádra bobovidnoj nebo nepravidelně laločnaté tvar, normohromnoe. Jadérko viditelné v přírodní produkty s fazovokontrastnoj mikroskopie.

Když meningitida tuberkulóza v spinální tekutině zjištěno velké množství histiocyty, nachází se odděleně a akumulace, Bazofilní Cytoplazma, malované intenzivněji.

Podle dostupných údajů, Některé typy buněk se může stát nejroglii histiocyty. Velký počet Histiocyty v spinální tekutině zjištěna u pacientů, po operaci na mozku nebo míchy (označuje aktivní tkáň reakci a normální hojení ran), a u jedinců, Meningitida a cisticerkozom v malátný během zánětlivého procesu. Když nádory na mozku s klíčení v podpautinnoe prostoru nebo ventrikulární zdi v Histiocyty může objevit v mozkomíšním moku ve spojení s makrofágů a modifikované buňky, Co je charakteristické pro vznik kolem nádoru reaktivní zóna.

Makrofágy

Makrofágy jsou tvořeny z jedné- a buňky endotelu vícejádrové arachnoidální mater a monocyty. Prvky endotelu arachnoidální mater je oddělen od sincitiâ a stát se zaoblenými buňky, jaderné amebovidnym hnutí a pronikání do mozkomíšního moku.

Makrofágů aktivně pohlcují a trávení, buňky a další prvky, patřící do mozkomíšního moku v patologických procesů, přispívá k jeho čištění. V cytoplazmě makrofágů snadno diferencované buňky a v barvených preparátech.

Makrofágů phagocytize erytrocytů, zničené nebo neupravená neutrofilů granulocytů, tukové kapičky, krystaly gematoidina, atd. Často cytoplazmě makrofágů jsou vakuol různých velikostí nebo jedna velká vakuola, která zabírá téměř celé cytoplazmě, Toto jádro je odsunut na periferii. V takových případech se buňka má jakýsi prstenec prstencová makrofágů.

Za normálních okolností jsou nepřítomné makrofágů v mozkomíšním moku. Vystoupení na normální citoze svědčí krvácení nebo zánětlivého procesu v centrálním nervovém systému. Velký počet makrofágů v mozkomíšním moku v pooperačním období označuje aktivní záchrany (pozitivní – předpověď). Malý počet makrofágů nebo ve vyjádřené pleocitoze – nepříznivý prognostický znak.

Ve formě kuliček – ksantomnye buňky

Ve formě kuliček (ksantomnye buňky) Makrofágy jsou velké několik inkluze kapiček tuku v cytoplasmě.

To je nejčastěji kulaté buňky, malované fuksinom tmavě hnědá. Při zpracování mozkomíšního moku Sudan III-velké míče jsou malované v oranžovo červené barvě.

Zjištěn v mozkomíšním moku při kontaktu s její tekutiny z cysta různé etiologie, degradace mozkové tkáně (společně se kapičky tuku), někdy v pooperačním období, v některých mozkových nádorů (kraniofaringiome, èpendimome, atd.). Je-li nádor se nachází poblíž komor mozku, ve formě kuliček jsou nejčastěji detekovány v mozkomíšním moku z komor. Zdroj zrnitý kuličky jsou mikrogliocity, stejně jako oligodendrocytů, buňky vnější obklady plavidel a arachnoidální.

Neutrofilních granulocytů

Neutrofilů granulocytů v mozkomíšním moku Podobně jako nejtrofil′nymi krev granulopitami, jejich cytoplazmy (v komoře účetních a původní produkty) často se natáhla nebo má výstupek (psevdopodii). Tato rozmanitost buněk dochází v prvních 10-15 minut po zabavení mozkomíšního moku a označuje zachování nejtrofil′ny- MI granulozitami schopnost pohybovat. Charakterizované segmentované jádro, počet bloků v rozmezí od dvou do pěti; pruhované neutrofilní Granulocyty jsou poměrně vzácné.

Při ukládání změn neutrofilů granulocytů CSF před, než ostatní buňky. Neutrofilní granulocyty jádra Lýza nebo segmenty mohou stát se zaokrouhlí, s jasnými konturami, Sjednocené jemný svetr; stávají se druh samostatných granulí. Neitrofilny granulocite, z nichž je pouze jeden segment zaoblené jádra, vzhledem připomíná normoblast. Tam oteklé neutrofilů granulocytů s obrysy segmentů, zabírá téměř celé cytoplazmě. V přípravcích, mořený, je možné sledovat všechna stadia rozpadu neutrofilní granulocyty – od otok až po úplné zničení buněčných struktur, Když není vidět obrysy cytoplasmy, a hlavní segmenty stala beztvará, skládající se z jemné strouhání chromatinu. Vlastnictví buněk nejtrofil′nym granulocitam lze nainstalovat pouze na reakci na peroxidáza: přítomnost zeleno žluté nebo hnědé pelet v troskách cytoplasmy.

Někdy v mozkomíšním moku se nacházejí neutrofilů granulocytů piknotičnym jádro jako nepravidelného tvaru kostky giperhromnyh.

Neutrofilní granulocyty objeví v mozkomíšním moku krvácení v podpautinnoe prostoru, zánětlivé nemoci nervové soustavy, Po neurochirurgických operacích. Přítomnost neutrofilní granulocytů s nečistoty z krve v mozkomíšním moku, znamená zánět mozkových plen.

Převaha neupravená neutrofilní granulocyty označuje akutní zánětlivý proces.

Náhlé vznik nejtrofil′nogo pleocitoza Když se protrhne absces pod krunýřem mozku.

Na abscesse, nachází se hluboko v mozkové tkáni, běžně pozorována rozostřený vyslovováno pleocitoz s převahou lymfocytů.

Při výpadku napájení zánětlivého procesu v mozkomíšním moku, objevují degenerirovannye formy neutrofilní granulocyty.

Přítomnost upravená a neupravená neutrofilní granulocyty, je charakteristický probíhající zánětlivý proces. Mělo by se vzít v úvahu, že se neupravená neutrofilů granulocytů v mozkomíšního moku s čerstvou krví nečistot, v takových případech je nutné definovat opravné citoza.

Eozinofilní granulocyty

Eosinofilů granulocytů v vzorky mozkomíšního moku nativní rozlišovat s ostatními buňkami s přítomností charakteristický lesklý velké flíčky, vyplní cytoplasmy. Buňky s jádrem dvoulistý, jsou vzácné, více často než ne, tam jsou mononukleární formy. Barevný vzorek morfologie èozinofil′nyh granulozitov je stejná, stejně jako v krvi. V míšní tekutiny nejčastěji zjištěné zničil granulocytů.

Obsah èozinofil′nyh granulocytů v mozkomíšním moku v cisticerkoze se pohybuje od 1 na 46%.

Vznik jako komplikace cisticerkoznogo arachnoiditidy vznik nejtrofil′nogo pleocitoza a snížení èozinofil′nyh granulozitov. Pro abscedirovaniâ èhinokokkovogo bubliny v mozku je charakterizována přítomností v jeho obsahu a èozinofil′nyh neutrofilní granulocyty, to slouží jako pomocné přihlásit odlišuje ji od. Někdy lze nalézt velké množství èozinofil′nyh granulozitov v obsahu cysty nádory mozku a míchy (nevrinome, kraniofaringiome, èpendimome, Metastázy rakoviny mozku). Vyjádřena nárůst v počtu èozinofil′nyh granulocytů v mozkomíšním moku lze pozorovat po komorové cisternoskopii.

Po odstranění nádorů mozku s aktivním hojící se rány zvyšuje počet èozinofil′nyh granulozitov, Co lze považovat za lokální alergické reakce na trauma a plen indukční rozpad tkáně produktů.

Modifikované buňky a buňky stín

Díky citolitičeskim vlastnostem mozkomíšního moku buněk, v ní dlouhou dobu, ponechat pouze obrysy cytoplasmy a zbytky jádra. Určení jejich morfologické příslušenství není možné. Nejčastěji tyto změny se podrobí neutrofilů granulocytů, Někdy je to buněk zhoubných nádorů. Snadno podléhají zitolizu buněk a arachnoidální èpendimy komor mozku.

Tkáňové bazofily se nacházejí v mozkomíšním moku po neurochirurgických zásahů.

Buňky arachnoidální mater v míšní tekutiny

Buňky arachnoidální Mater (arahnoèndoteliâ) je jediné vrstvy epiteliálních buněk, při výpočtu citoza v kameře, může jak rozlišit, a obarví, vyrobeno z kalu mozkomíšního moku. To je poměrně velké buňky nepravidelně tvarované nebo zaoblené, s relativně malé kulaté nebo oválné jádro, centrálně umístěný.

Jádra jsou malované gipohromno, Cytoplazma je světle- nebo šedavě modrá barva, To má zubaté okraje a často obsahuje inkluze phagocytized částice (kapičky tuku, buněčné elementy, vakuol). Cytoplazma buněk arachnoidální mater je často zničeny, v takových případech zjištěny charakteristické jádro a cytoplazmu zápisků. Chromatinu jader je melkopetlistuû nebo zrnité struktury, někdy patrný jeden modré jádro. Velikost jádra od 5 na 19 m.

Přítomnost jednotlivých buněk v mozkomíšním moku ještě arachnoidální svědčí patologie, protože tyto buňky řádku podpautinnoe prostoru a, sluŝivaâs′, dostat se do mozkomíšního moku. Nárůst počtu buněk arachnoidální je pozorována na arahnoidite, cisticerkoze mozku. V obsahu arahnoidal′noj cysty zjištěna odděleně umístěny arachnoidální buněk a jejich simplasty v podobě skupiny jader různé velikosti a intenzity zbarvení, obklopený světlé cytoplazmě bez jasné hranice mezi buňkami.

Buňky choroid Plexus

Ventrikulární choroid plexus v mozkomíšním moku mohou vstoupit polygonální, zaoblený, někdy Velká válcová (15— 19 mm) buňka. Malý (4— 5 μm) nachází se v centru jádro nebo èkscentričeski, hyperchromatická, Eozinofilní cytoplazmy, zbarven intenzívněji. V cytoplazmě buněk choroid Plexus má velikost zrna, někdy v podobě glybok a inkluzí, velikost 1-3 mikronů, oblé nebo nepravidelný tvar, nazelenalá nebo namodralé barvy. Některé buňky mohou být zjištěny vakuol nebo sebraných erytrocytů.

Buňky choroid Plexus nejvíce často nalezené v tekutině z komor mozku.

Èpendimy buňky z komor mozku do mozkomíšního moku

Èpendimy buňky z komor mozku do mozkomíšního moku, získané z lumbální punkce, snadno zničena během vaření a malování příprava. V barevném nátěru mají druh entit, skládající se z oválné jader s jemnou strukturou. V cytoplazmě některých buněk zachováno obklopuje jádro jako úzký okraj.

V tekutině z komor mozku jsou nejhojnější èpendimy buněk s dochovanou strukturou, morfologicky se podobají buňky arachnoidální Mater, Ale jádro jejich malované bledší a mají větší něžností, rovnoměrné rozložení chromatinu. Oválné buňky často èpendimy Poláci ukázal, Cytoplazma je šedivý odstín. Odděleně umístěny klece a velká akumulace, která nesmí být stanovena hranice jednotlivých buněk.