Kostní dřeň – Příprava materiálu a vaření přípravky pro mikroskopické vyšetření kostní dřeně
Detailní studium buněčné složení a struktury kostní dřeně byla zahájena zavedením do klinické praxe sternální metoda punkce, Navrhovaná M. A. Arinkin v 1927 město, a pak intravitální histologické Výzkum tečkovaný Ilium použitím trepanobiopsie.
Způsob sterna defektu
Chcete-li provést sternotomii defekt pro M. A. Arinkin-použitý punkční jehlou biopsie, mající ochrannou fólii, který může být nastaven na požadovanou hloubku, v závislosti na tloušťce kůže a podkožního tuku, zajištění defekt zadní deska hrudní kosti.
Kostní dřeň nasasyvayut stříkačka 10-20 ml přiléhající píst aby byla zajištěna požadovaná vakua. Punkce ve zkušební poloze ležící na zadní straně na úrovni připojení III-IV žebra střední čáře, jako přední stěna tělesa hrudní kosti je tenčí a má plochou nebo mírně konkávní povrch, nejvhodnější pro punkci. Kromě, v oblasti buněk kostní dřeně, že obsahuje velké množství.
Může žebra a proražený trnové výběžky obratlů (často - III a IV bederní). Při propíchnutí z trnové výběžky obratlů pacient sedí, naklonil. U dětí, je riziko hrudníku defektu vzhledem k jeho větší pružnosti, a individuální rozdíly v tloušťce kosti. Proto děti, zejména novorozenci a kojenci, vhodnější, aby se defekt v horní třetině holeně na vnitřní straně distálního femuru epifýzy nebo kosti patní. Punkce kyčelní produkují 10 až 20 milimetrů posteriorně na přední páteře.
Způsob získání studii kostní dřeně od hrudní kosti punkcí
Vpichu je dezinfikována s alkoholem a alkoholovém roztoku jodu. Potom se kůže, podkožní tuk a periost infiltrovali jemné jehly 2 ml 1-2 % Novokain. Možná, že proražení bez anestezie nebo narkózy pokožky pomocí chlorethyl.
Injekční stříkačka a jehla punkce se sterilizuje varem nebo suchým způsobem, důkladně vysušit s alkoholem, potom etherem.
Před provedením defektu, pomocí závitu, bezpečnostní štít na požadovanou hloubku vpichu a vložen trn. Orientační údaje, které je třeba dodržovat při instalaci bezpečnostního štítu při defektu hrudní kosti, jsou uvedeny v tabulce.
Indikativní z hrudní kosti defektu | |||
Věk pacienta, léta | Úroveň bezpečnostního štítu uspořádáním (hloubka vpichu), mm | ||
pro podvyživených pacientů | pro pacienty s střední výkon | U pacientů s vysokým výkonem | |
Na 3 | 2-3 | 3-4 | 4-5 |
4-5 | 3-4 | 4-5 | 5-6 |
6-10 | 5-6 | 6-7 | 7-8 |
11-14 | 7-8 | 8-9 | 9-10 |
15-17 | 9-10 | 10-11 | 11-12 |
Senior 17 | 10-11 | 11-12 | 12-13 |
Nasměrování jehly kolmo k hrudní kosti jeho středové čáry, rychlý pohyb prorazit kůže, podkožního tuku a vnější deska z hrudní kosti. V tomto okamžiku, odpor klesá a jehlu, jako by potopení, zahrnuty v kostní dřeni. Tak je ve svislém směru nastavena, nehybně. V případě, že jehla není ve svislé poloze, pak, bez jeho odstranění, tlačit pojistka je o něco vyšší, a re-podporující jehlu.
Mělo by se vzít v úvahu, že rakovina, mnohočetný myelom, osteomyelitida a další osteolytická proces jehla, dostat se do léze, splňuje menší odpor a není pevně ke kosti.
Poté, co jehla vstoupí do kostní dřeň, Stylet je odstraněn a stříkačka je pevně zatlačena. Další, zatažením za píst stříkačky, nasasyvayut ne více 0,5 ml kostní dřeně (když více punctate to může dostat hodně periferní krve).
Pokud se vám kostní dřeně selže, pak, bez odstranění jehly, vyjměte stříkačku, opět do jehly stylet a přenesen do jiné polohy - výše, pod nebo na stranu. Pak znovu nasasyvayut stříkačka mírně tečkovité. Po kostní dřeně sklizně jehly, Není razъedinяя s shpricem, odstraněn z hrudní kosti, a místo vpichu je uzavřena sterilní nálepkou.
Výsledný materiál byl převeden do hodinovým sklem a rychle v mixéru nasasyvayut leukocytů nebo červených krvinek s ochrannou známkou 0,5 (za normálního nebo zvýšeného počtu bílých krvinek v periferní krvi se doporučuje používat mixer-melanzhera erytrocyty, a pokud leukopenie - mixer melanzhera pro leukocyty).
Vedle označení "11" v mixéru pro leukocyty, nebo označení "101" do mixéru pro erytrocytů získání 3-5 % octová kyselina. Obsah mísiče jsou důkladně smíchány, vypouštěné z kapilární části kapaliny, a následné kapky a zaplnil počítací komůrce byly počítány jako leukocyty krvinek, s ohledem na zředění ve vhodném mixéru. Celkem myelokaryocytes (buňky s jádry) v rozmezí od 50 G 250 T v 1 l, zřejmě, vzhledem k složení nestejné dřeně v jeho různých oblastech.
Počítání absolutní číslo není podstatné myelokaryocytes. Ve většině případů omezeno na počítání procenta stěr tečkovité různých nukleárních buněk. Ve stejné době počet buněk posuzována odhadovanou stěr.
Pro přípravu léčiv od hrudní kosti punktátu na hodinky skleněné částice shromažďují kostní dřeni a připravit je tenké tahy, krev přísada se odvádí filtrační papír nebo Pasteurovou pipetou.
Velký praktický význam je správné příprava stěru z tkáně kostní dřeně, jako příměs periferní krve zkresluje složení svých buněk. V řádně připravené vzorku buňky jsou hustě, ale odděleně, a jejich struktura je jasně viditelná. Doporučuje se připravit sérii mrtvic, využití celého materiálu, se získá ve vpichu. Skvrny by měl být připraven rychle, protože skládání kostní dřeně dojde dříve, než srážení periferní krvi, a buňky mohou být poškozeny, že nemohou rozlišovat.
Stavy aplastickou kostní dřeně šmouhy odhalil malé množství buněk, Někdy tam jsou žádný. K objasnění, To je důsledkem chorobného procesu nebo nesprávně provedena punkce, nutné opakované průrazu a výzkum punctate.
Upevňovací a malování tahy provádí stejným punktátu, jakož i nátěru periferní krve, nejlepší ze všech, které jsou zabarveny Pappenheim-Kryukov.
Kyčelní kost biopsie
Potřeba pro studium in vivo preparátů kostní dřeně, získá trepanobiopsii, Vyvstává, při defektu není možné získat dostatek materiálu, aby se potvrdila přítomnost patologického procesu.
Zvláště důležité získává histologické metody pro nemoci, jako jsou, Jak je leukémie, polycythemia vera (erythremia), osteomyelofibrosis, gipoplasticheskaya anémie.
K propíchnutí a extrakce kostní tkáně se navrhuje použít jehly-trocar, postaven na principu propíchnutí biopsie jehlou. Tloušťka jehly trokaru 3 mm, vnitřní průměr 2 mm, délka 40 mm. Distální konec jehly jako frézy, eiloid, tak, že může být řez při otáčení kost. Jehla se skládá z trnu (stylet se špičatým koncem) a rukojeti.
Způsob získání studii kostní dřeně od trepanobiopsie
Punkce vyrábí v lopaty kosti kyčelní, v určité vzdálenosti 20-30 mm posterior k horní přední páteře. Technicky, to je výhodnější provést biopsii levé křídlo.
Vpichu dezinfikuje s alkoholem a alkoholickým roztokem jodu. Jehla je předem sterilizovány v páře, nebo suchým způsobem, a poté se suší s alkoholem a etherem. Se závitem, bezpečnostní jehly štítu na požadovanou hloubku vpichu, s ohledem na tloušťku podkožního tuku.
Před zavedením trokarové jehly produkují anestézie kůže, podkoží a periost 2 % Roztok novokain.
Penetrační jehla-trokar v měkké tkáni, Lance trn cítit o místo na kosti, kam chcete udělat defekt. Jehla se pak rotační pohyby pod určitým tlakem se zavádí do kosti. Když se cítíte silnou fixaci jehly styletu odstraněn. Odpojte trn a rukojeť, Ten je našroubován na jehlu, stanovené v kosti. Kruhové pohyby ve směru hodinových ručiček je jehla vložena do kosti. Pak, jak rotační pohyb odstranit jej. Válcová sloupec kost, se nachází v hrotu, tlačit styletu z lumen jehly na snímku, a odtud se přenášejí do sklenice s formalinem a poslal pro histologické vyšetření.
Ze zbývajících sklo, jehla a styletu kosti Nátěry dřeně dělat. Více často než ne schopen snížit a odstranit kus kosti v délce 6 na 10 mm, a někdy i více.
V kostní dřeni u zdravých lidí a pacientů s hyperplastických procesů odhaluje mnoho různých buněk. V těžké hypoplastická (aplastická) trepanat proces je žlutý, vzhledem k téměř úplný nedostatek kostní dřeně a nahrazovat to tukové tkáně.
Ve všech formách osteomyelofibrosis myelofibrózou a extrahuje kus kosti vypadá "suchý" a z něj je možné extrahovat pouze velmi malé množství kostní dřeně pro přípravu nátěrů.