Методи за откриване на Leishmania в остъргването на засегнатите тъкани чрез изолиране на чиста култура
При сеитба остъргване засегнатата тъкан на пациента към специфична хранителна среда Leishmania размножават и те могат да бъдат открити чрез микроскопия.
Реактив
Среда W.W.W. за отглеждането на Leishmania (14 г агар, 6 г натриев хлорид, около 150 мл дефибринирана кръв от заек, взети директно от сърцето преди да изготви средносрочен, 900 мл дестилирана вода). В дестилирана вода се добавя натриев хлорид и агар. Колбата, съдържаща среда се нагрява до пълно стопяване на агар, и 20-30 мин стерилизира в автоклав при 147,1 кРа (15 при).
Охлажда се до 56 ° C агар добави стерилна дефмбрирзна заешка кръв, разбърква чрез въртене на колбата и се пълни в стерилна пипета 4 тръби мл. Колба кръвен агар при наливане е водна баня при температура 58 ° С. Тръбите с върховете средни.
След втвърдяване на агар, те са поставени в инкубатор за един ден в 37 ° С за контрол стерилност и получаване на течен кондензат. Ако се произвежда не е достатъчно, преди сеитба в стерилни флакони, можете да добавите към 1 Един милилитър от следните решения: 0,85 % натриев хлорид, 1 % пептонът разтвор, Разтвор Ханкс, лакталбумин хидролизат или други хранителни среди в изотонични концентрации.
Методи за откриване на Leishmania в остърган на засегнатите тъкани чрез изолиране на чиста култура
Когато изберете една култура, внимателно следвайте правилата на стерилност. Мястото за опит на кожата се избърсва с памучен тампон, навлажнена 70 % алкохол.
След изпаряване на алкохола острието на стерилен скалпел офталмологичен разрез нарастък дължина 2-3 мм. От дъното на разреза със стерилна пипета на Пастьор се изстъргва тъкан. Полученият спад на серозен-кървава течност се прехвърля в епруветка с околната среда. Манипулацията се извършва няколко пъти, посевен материал всеки път нова епруветка. Тапи за уши, вградени в парафин или ги поставят гумени капачки и се поставят в инкубатор при 22-24 ° C.
Оценка на резултатите
Културите се изследват под микроскоп на дневна база за идентифициране на причинителя. Запознайте родния наркотици, получен по метода от натрошен капки, лещата 40×40. Резултатите се считат за отрицателни сеитба, ако в 40 Не е намерено дни патоген. Културите са удължени Leishmania (10-12 Микрона с окабеляване).
Прилагане на метода на културата е най-полезен, когато tuberculoid форма на лайшманиоза, диагностика, че други методи могат да бъдат по-малко ефективни.
