Методи за откриване на Leishmania в натривка от инфилтрацията на кожата

За откриване на Leishmania изследва фиксирани и оцветени намазка инфилтрация съдържание.

Реактиви

• Метилов алкохол, или абсолютен етилов алкохол, или смес от Никифоров (смес от равни количества сяра етер и абсолютен етанол).
• Фосфатный буфер рН 6,9-7,1, за получаването на който е смесен 40 мл KH₂RO₄ (9,078 г сухо вещество KH₂RO₄ аз н 1 литър разтвор) и 60 мл Na₂PHO₄ (11,876 г сухо вещество 1 литър разтвор).
• Azureozin Романовски.

Методи за откриване на Leishmania в натривка от инфилтрация на кожата

Материал за изследване взети от нарастък (на ранен етап от процеса) или от регионалните язви инфилтрация (на по-късен етап), намаляла до известна степен от този край.

Протерев ватой со спиртом бугорок или выбранный участок инфильтрата, сдавливают его двумя пальцами для обескровливания и, не ослабляя давления пальцев, концом острого скальпеля (желательно глазного) делают поверхностный надрез кожи. При появлении крови ее следует удалить марлевым тампоном. Со дна и краев надреза делают этим же скальпелем соскоб пораженной ткани и быстро размазывают содержимое соскоба тонким слоем на предметном стекле.

Готовят несколько мазков. Мазки высушивают на воздухе, фиксируют и окрашивают по Романовскому.

Оценка результатов обнаружения лейшманий в мазке из инфильтрата кожи

В препарате должны быть хорошо различимы макрофаги, ендотелна, плазматические и лимфоидные клетки, фибробласты и небольшая примесь клеток периферической крови.

Наличие в препарате эпителиоцитов, а также бесструктурных глыбок, окрашенных в равномерно-сиреневый цвет, средства, что соскоб был взят слишком поверхностно и его следует повторить. В мазке не должно быть слишком много крови, а также гноя и бактерий.

Лейшмании L. tropica обнаруживаются в макрофагах, а также вне клеток в виде округлых, овальных или удлиненных телец размером 3— 5 м. При окраске по Романовскому цитоплазма лейшманий приобретает светло-голубой или сиреневый цвет, ядро становится красно-фиолетовым.

Хорошо виден кинетопласт, окрашенный интенсивнее, от ядрото.

На начальных стадиях изъязвления лейшмании легко выявляются в бугорках и в краевом инфильтрате язвы. В гнойном отделяемом язвы могут быть найдены лишь деформированные и разрушающиеся лейшмании, которые трудно дифференцировать. На стадии заживления в пораженных тканях лейшмании выявляются редко.