Исследование фибринолиза
對於診所是為提高血液纖溶活性的鑑定非常重要, 其減少, 這可能是由於要么纖溶酶原活化劑和時的重耗 激活和固定在一堆，和血栓, 無論是增加血漿antiplazminovoy antiaktivatornoy和活動. 它應該永遠記住, 在束和血栓的纖維蛋白溶解激烈, 可檢測的改善FDP在血漿中的含量, 邏輯上與血漿的減少和儲備纖溶酶原激活劑結合 (血液循環).
天然凝塊溶解的狀態
天然凝塊溶解的狀態概述 可以提供一種方法Kotovshchikova，Kuznik修改. P. Baluda或修改Ë. P. 伊万諾娃.
該方法的原理是, 該給定的血細胞比容和血紅細胞含量是由最後的數目來確定, 跌出一堆的存款培養一定時間. 通過增加該部分的血纖維蛋白溶解活性的量 (第三) 紅細胞增多. 在深抗凝和低纖維蛋白原血症的情況下，, 其產生有缺陷的和寬鬆的束, 這些方法可以給誤導性的結果.
在一個修改程序比德韋爾ð. IN. Andreenko纖溶纖維蛋白凝塊的損失評估.
等離子體的研究纖溶活性組分優球蛋白
研究纖溶活性優球蛋白血漿組分是最重要的基本測試, 這是歐洲社會對血栓委員會證實.
要做到這一點，使用古典確定優球蛋白溶解血塊的方法, 在纖維蛋白板一溶解活性優球蛋白部分的定義 (在後一種情況下，不同量的血纖維蛋白的測試讀數的影響拉平). 裂解在這些測試是由於, 在優球蛋白部分是分離的和纖維蛋白溶酶原活化劑, 而纖維蛋白溶解酶抑製劑，大頭刪除. 因此，使用優球蛋白溶酶原激活劑的血漿水平測量的測試和.
在血液在基礎代謝的準備, Ť. 它是. 在空腹的早晨, 從床上抬起病人之前, 在血液組織纖維蛋白溶酶原活化劑是幾乎沒有. 故, 在這樣的條件下由內部狀態初步確定 (正常的血液) 纖維蛋白溶酶原的激活.
這個過程可以通過預先接觸活化的因子XIIA-激肽釋放酶 - 激肽原VM高嶺土大大加快, 從而減少優球蛋白溶解用2.5-3小時，以2-10分鐘. 這一原則是基於接觸激活 確定方法 XII-依賴纖溶.
血管內皮分泌到血流中的外部激活纖溶的能力 (組織型活化劑, 橋接數字鴻溝) 據估計從單位壓縮容器袖帶測量血壓後加速優球蛋白溶解 (品嚐Oyvina-Chekalinoy), 或之後在功率自行車劑量體力負荷, 或藥物刺激 (後葉加壓素的衍生物 - 去氨加壓素或adiuretinom).
在文獻中，許多這些技術的修改.
所以, 例如：, 中 古典技術壓縮試驗 袖帶壓力維持在 10,7 千帕 (80 毫米汞柱. 藝術。) 或 1,3 千帕 (10 毫米汞柱. 藝術。) 15-20分鐘更高舒張, 在測試的最近修改的. P. 球 - 3 分鐘的壓縮 1,3 千帕 (10 毫米汞柱. 藝術。) 更高的收縮壓. 在這兩種情況下，第二時間研究從夾持容器所抽取的血液以除去袖口.
用這樣的樣品可以研究壓縮的效果不僅纖溶, 和其他抗血栓的血管壁的性質 (抗凝, antiaggregant等等。).
壓力測試 標準化的方式, 正常優球蛋白溶解在加速 2 次或更多次 (不是做研究的基礎代謝會導致非常大的隨機誤差, 因此，在早上的研究之前，患者開始不應該下床, 靜脈穿刺應在眾議院進行).
該反應的削弱到壓縮 負載或表明缺乏纖溶系統的反應性和血栓形成的風險增加, 驗證研究數量.
纖維蛋白溶酶原在血漿中的含量
纖維蛋白溶酶原在血漿中的含量 它可以是半定量評估通過將鏈激酶的優球蛋白派特定劑量. 按程序Slobozhankinoy - 菲德洛娃, 選擇這樣的活動鏈激酶, 它提供了優球蛋白溶解為9-11分鐘, 然而，有可能使用高濃度的 (標準值是分別顯示在每個實驗室). 在纖溶酶溶解時間在該試驗中缺乏延伸到更, 小本酶原.
該研究血塊溶解漿
凝塊溶解漿的平行研究 通過在鏈激酶的刺激相同的過程允許所得的數字估算抗纖溶酶的活性的測試血漿中的差異, 由於優球蛋白部分-antiplasmin幾乎沒有, 而凝結在整個等離子體它具有.
量來計算在抗纖溶酶的速率
(PLC SAND)/SAND;
где ПЛС — время лизиса сгустка плазмы в присутствии стрептокиназы,
ELS - 優球蛋白凝塊溶解時間在相同劑量鏈激酶的存在.
進一步, 使用這個因素, 抗纖溶酶的活性被確定為預稀釋曲線的百分比編譯 (正常血漿的混合樣品中獲得).
更確切地說，且易於實現 研究方法纖溶通過拆分azofibrina, 代表複合纖維蛋白, 與hromogennыmsubstratom共價svyazannogo (azopeptidom)
該方法的原理是, 三個管移液器 10 毫克azofibrina, 與緩衝液混合 (pH值 7,4), 然後他們兩個移液器 0,15 毫升血漿和在這些管中的一個進一步研究 - 10000 U / ml的鏈激酶.
孵化後 1 小時後，將溶液過濾並測光分光光度計在波長 440 納米或醫療比色計在藍光濾光片.
纖溶酶活性通過等離子體而不鏈激酶的樣品中測定 變化中，濾液的光密度與第三管的內容相比, 和血漿纖溶酶原的水平 - 鏈激酶樣品中. 纖溶酶和在同一基板上的等離子體的研究的孵化確定antiplazminovaya活動. 基準, 在正常血漿的研究中獲得的, 接受 100 %.
從而, 具有相對小的一組簡單的實驗室官能的方法的幫助下可以得到有關纖溶的各種機制的狀態的想法, 血漿中的內容，並從血管壁的纖維蛋白溶酶原釋放, 它的激活劑和抑製劑.
作為在血液凝固的研究, 這些數據可以顯著補充免疫測定纖溶系統的組件的纖維蛋白原和纖維蛋白的降解產物的.
檢測方法“證人”和血管內凝血和纖溶的分子標記物
在血管內凝血的過程和相關激烈纖溶發生, 一邊, 消耗和一個或多或少明顯降低在止血系統的一些部件的血, 另一方面 - 部分的外觀, 碎片和代謝物, 在正常血漿中含有沒有或者有少量的.
識別性血管內凝血，纖溶這些“目擊者”，並活化標誌是瀰漫性血管內凝血很大的診斷價值, 不同產地和mikrotrombovaskulitah血栓栓塞性疾病 (傳染的, 免疫的, 腫瘤等。. D。).
標記消耗和血小板活化的止血
對於消費和活化指標血小板止血的 血小板減少, 提高顆粒的血漿成分 - antigeparinovogo因子 4 血小板, (3-血小板球蛋白等。, 以及功能循環的保存較少活性和血小板凝聚少.
損傷和功能障礙的血管內皮細胞的主要標誌物 - 血管性血友病因子增加血漿水平, 在壓縮袖口優球蛋白溶解血管舒張反應, 加壓素類似物的體育鍛煉或管理.
高凝狀態
高凝狀態, 如果可用, 可以指示凝血的活化. 她透露，一般凝血功能檢查和影像學檢查 (血栓彈力圖), 和診所 - 基於獲得的血液從靜脈的困難 - 無論是肺血管栓塞, 和針, 和不完全穩定的血液通過與檸檬酸攪拌它 (教育在體外宏- 和microclots).
這部分血塊是完全不適合止血系統的進一步研究, 所以一定要離心血液，應檢查, 無論血塊. 在血液凝塊的存在是不受進一步的研究 (但它可以用於製備血清和一系列生化分析). 經驗顯示, 它是不夠堅持這一建議往往是嚴重的錯誤，在止血系統的研究來源.
高凝狀態在某些測試中仍沒有證據表明血栓形成的危險. 此外, 大量血栓形成的, 其特徵是在初始低滲, 高凝狀態，而不是. 這些措施包括血栓形成, 引起因子XII虛證, 前血管舒緩素和激肽原VM, disfibrinogenemiyami, 蛋白質C等的缺乏. D. 凝血在傾向血栓形成幾乎沒有變化，由於增加的血細胞比容指數 (往往同時有hypocoagulation), 血小板增多症, 自卑纖維蛋白溶解，因此. D.
上的原因給出的依據, 不能與血凝過快和血栓形成風險等同, 因此該功能目前留下烙印血栓形成中不包括.
的因素XIIA 激肽釋放酶和因子Ⅶ之間的“橋樑”激活
的因素XIIA 激肽釋放酶和因子Ⅶ之間的“橋樑”激活, 是通過檢查凝血酶原時間與牛凝血和冷卻在 4℃下以研究血漿為18-24小時後確認 (冷啟動測試). 在一些血栓形成的冷卻觀察減少凝血酶原時間後，25-50 %. 其他凝血, 除了牛, 這項研究是不適合.
游離肽A的血漿中存在
游離肽A的血漿中存在, 通過免疫學方法檢測, 它是直接證據thrombinemia, 這主要是因為凝血酶從纖維蛋白原分裂分子關一肽. 有限的由於獲得免疫抗A血清困難的技術.
除了, 提高血漿中的肽通常是暫時性的, 因為它是快速地從單核吞噬細胞的循環系統消除. 在這方面，肽的A級信息只有當增加, 這是活性凝血酶在血液中存在的可靠標誌.
分層和纖維蛋白原的一池在等離子體可溶性纖維蛋白單體複合物的形成 (RFMK)
纖維蛋白原的健康人，性質, 電泳遷移率和敏感性凝血酶, 通過加入12-14秒凝血酶的凝血酶測定完全凝固.
相反，當激活該血管內凝血 (trombinemii) 和纖維蛋白溶解發生束纖維蛋白原游泳池, 教育SFMC, 血纖維蛋白原的結合 (鎖定纖維蛋白原), 以及或許, 纖溶早期的產品 (片段X和V的), 與早期和晚期FDP自由狀態. SFMC及相關纖維蛋白原或凝血酶的影響不凝固 (仍然在血清中), 或凝結緩慢且僅當暴露於高濃度的凝血酶 (3-秒). 為了檢測血漿和血清SFMC和其它惰性組分的纖維蛋白原池，下面的測試副凝固.
beta測試naftolovyj
beta測試naftolovyj (前者的名字 - 纖維蛋白原B的定義) 具體不足, 所以現在很少使用.
其實質在於, 該血漿溶液中加入β萘酚在 50 % 乙醇 (5 下降到 1 毫升). 如果在 10 分鐘，搖動，沉澱物粗薄片形式, 樣品被認為是陽性.
乙醇測試
乙醇測試 - legkovypolnim, 為它 0,4 毫升血漿調查, 穩定的檸檬酸鈉混合氨基己酸 (阻止纖維蛋白溶解), 添加 0,15 毫升 50 % 乙醇 (檢查濃度酒精比重).
通過教育 10 分鐘溫和表示凝塊的血漿SFMC存在. 具體測試, 但揭示了SFMC的一部分 (基本上 - krupnomolekulyarnyh), 它給出了一個肯定的結果中的DIC, 血栓形成和其他類型的thrombinemia. 在第三階段的嚴重低纖維蛋白原血症的背景引擎 (小於0.5-0.7克/升), 作為肝素, 乙醇試驗常為負.
Protaminsulfatny測試
Protaminsulfatny測試是基於硫酸魚精蛋白的纖維蛋白溶解的早期產品的沉積和SFMC, 從魚的乳汁得到. 測試是相當具體, 但對於他的行為適用於只有某些類型的硫酸魚精蛋白.
滅活肝素和硫酸魚精蛋白導致副凝固無關的能力. 由此，樣品硫酸魚精蛋白, 用於測試副凝固, 我們首先必須在溶液或血纖維蛋白單體測試, 或正常血漿, 向其中加入少量的預凝血酶和鏈激酶 (或者只是鏈激酶).
當這個測試變為正, 硫酸魚精蛋白是適合於診斷應用. 在許多專有的診斷試劑盒包括控制 (參考) 血漿, 給予積極的測試protaminsulfatnogo. 它是用於檢驗試劑.
應當考慮, 什麼 用乙醇和protaminsulfatnogo試驗確定不同的組件的纖維蛋白原池, 在連接與它們的結果並不總是彼此重合. 所以, 部分患者有DIC兩個測試是正面的, 其他人 - 只是其中之一. 因此，對於一可靠的診斷必須執行兩個測試.
Ortofenantrolinovy測試
Ortofenantrolinovy測試 (OFT) - 高度信息, 它允許在等離子體定性和定量測定SFMC的用少量血小板 (進一步離心 20 在分 4000 /分鐘).
為了進行測試只適合 鹽酸ortofenantrolin. 該解決方案ortofenantrolina 0,033 M (0,78 %) 它是在室溫下混合為等量 (由 0,1 毫升) 以研究等離子體在幻燈片和搖擺確定外觀混合第一片的時間.
記錄為完成 2 米.
結果 (在幾秒鐘內) 通過校準曲線中的量SFMC轉換. 校正曲線的製備是fibrinmonomera加入各種濃度, 由該方法Radzevich-Hodorova得到, 健康人的血漿池 (捐贈者). 通常情況下薄片出現在 120 從; 他們出現的更快, 包含的受檢血漿中更SFMC.
測試可靠的疾病, 比乙醇和protaminsulfatny.
SFMC的紅細胞凝集鑑定, pokrыtыh纖維蛋白monomerami (FM-測試)
我人紅細胞(Ø) 涵蓋的血纖維蛋白單體組在診斷液用.
血漿是用玻璃試管混合紅細胞. 凝集的外觀 (通過估算 + 至 +++) 它表示SFMC的存在, 與纖維蛋白單體的紅血細胞的表面上的相互作用.
測試是高度敏感的, 上面顯示SFMC濃度 10 毫克/毫升.
充分識別纖維蛋白原和SFMC的凝固池中使用毒沙伊法
該解決方案毒沙量器或凝結分數 (ehitoks, ekarin) 完全凝固的纖維蛋白原, 所有產品SFMC和早期纖溶, 在連接與它可用於評估纖維蛋白原凝結部件的血液中的血漿池的總量和鎖定SFMC和纖維蛋白原的數目, 血清初步崩潰後剩餘, 凝血酶凝結後獲得.
使用毒物的濃度, 這會導致正常血漿凝血20-30.
在樣本SFMC毒血漿纖維蛋白原的存在透露了更多的, 比在測試與凝血酶, 血清, 一個15秒的凝血酶凝結後獲得, 通過加入毒液的產生的第二凝塊, 肚裡所有SFMC和相關鎖定纖維蛋白原, 以及較早的PDF.
這些現象是典型的thrombinemia和大規模性血管內凝血 (DIC, 血栓栓塞，和等。), 而健康測試的人的血清中揭示了無毒害SFMC和鎖定纖維蛋白原. 經過混凝毒纖維蛋白原和大分子衍生物沒有發現任何色譜, 通過測試膠粘劑葡萄球菌音頻.
在除了上述, 確定纖維蛋白原的SFMC和早期裂解產物 (或纖維蛋白) 纖溶酶可以應用於以下測試.
葡萄球菌的附著力測試
葡萄球菌的附著力測試 (TSS, 金黃色葡萄球菌klamping測試) - 檢測血清SFMC及纖溶早期產品簡單，內容豐富的方法 (фрагментовX, 以及相關聯的鎖定的纖維蛋白原).
它基於葡萄球菌的某些菌株的能力 (紐曼Д2Sидр。) 由於在其表面上存在的特定因素klamping經受凝集影響其餘血清, SFMC凝血和早期PDF後， (фрагментовX).
血液研究 採取的穩定溶液與氨基己酸防止纖溶體外混合.
該測試是在玻璃或平板上進行 74 巢由混合的診斷工具等體積和血液血清中的稀釋液的研究 1:2, 1:4, 1:8 和T. D.
考慮到最終的稀釋, 它仍然決心凝集. 在健康人群中，SFMC和早期FDP血清中含量不超過 0,002 克/升 (2 微克/毫升).
血清免疫學檢測早期和晚期的FDP
免疫學測定血清中的早期和晚期FDP是基於以產生免疫血清antifibrinogenovoy沉澱組分纖維蛋白原池的能力 (чувствительность сыворотки определяется на разведениях фибриногена).
При иммуноэлектрофорезе в силу разной подвижности РФМК, фрагментовX, 與, D и E возможно ориентировочное их определение. Количественная оценка производится путем исследования разных разведений фибриногена, плазмы и сыворотки крови. Более специфичны тесты со специфическими сыворотками анти-D, анти-димер D и др.
ПДФ-латекс тест
Тест склеивания частиц латекса, нагруженных антителами анти-D, анти-E, антидимер D и др. (ПДФ-латекс тест), заключается в определении с помощью диагностических наборов перечисленных ПДФ по склеиванию частиц латекса при смешивании с разными разведениями исследуемой сыворотки.
Определение содержания в плазме крови активированного фактора XIII как показателя циркуляции в крови тромбина
Фактор XIII, активируемый тромбином в присутствии ионов кальция, расщепляется на цепь A, обладающую фибрин-стабилизирующей активностью, и инертную цепь S.
Раздельное определение их содержания (по степени стабилизации фибрин-олигомеров и иммунологическое) позволяет диагностировать внутрисосудистое свёртывание крови по наличию тромбинемии. Метод сложен, используется в основном для научных исследований. В настоящее время разрабатываются более доступные способы определения фактора XIIIa.
Выявление активации протромбина
При активации протромбина фактором Xa происходит отщепление от субстрата фрагмента Ф1—2, определяемого иммунологически. Нарастание содержания последнего в плазме свидетельствует об активации системы свертывания крови.
Выявление клеточных маркеров активации внутрисосудистого свертывания крови
Феномен повреждения (фрагментации) 紅血球
При ДВС-синдроме и других видах блокады микроциркуляции в мелких сосудах эритроциты подвергаются травмированию, в связи с чем в мазках крови увеличивается число фрагментированных клеток (более 7— 10%).
Более точно этот феномен определяется путем разделения клеток крови в градиенте плотности фиколла-верографина (плотность 1,077) по методике, используемой в иммунологии для выделения лимфоцитов и моноцитов. В норме кольцо лейкоцитарной интерфазы имеет беловатый опалесцирующий цвет и в нем при подсчете в камере Горяева содержится менее 400 紅細胞 1 升 (чаще до 200).
При ДВС-синдроме число всплывающих (поврежденных) эритроцитов резко возрастает (до 1000—40 000 在 1 мкл и более), в связи с чем кольцо окрашивается в розовый или красный цвет. Количественно феномен оценивается путем подсчета содержания эритроцитов в интерфазе (室Goryaeva).
Метод позволяет дифференцировать ДВС-синдром с блокадой микроциркуляции и тромбирование магистральных сосудов, при котором повреждение эритроцитов незначительно.
Феномен продукции тромбопластина моноцитами
При некоторых видах ДВС-синдрома (особенно иммунного и инфекционного генеза) моноциты активируются и приобретают способность продуцировать тканевый тромбопластин.
Для выявления этого феномена клетки крови разделяются в градиенте плотности (фиколл-верографиновая смесь, плотность 1,077) для получения фракции, содержащей большое количество моноцитов, кратковременно культивируются, и затем определяется свертывающая активность суспензии до и после разрушения клеток. При тяжелом инфекционно-септическом процессе эта функция моноцитов может подавляться.
Выявление снижения уровня в плазме крови (потребления) компонентов свертывающей, фибринолитической и калликреин-кининовой систем
При остром и подостром ДВС-синдроме отмечается усиленное потребление и метаболизм ряда компонентов системы гемостаза, в связи с чем уровень их в плазме существенно снижается. Особенно выражено подавление факторов VIII, V, антитромбина III, белков C и S, фибронектина, prekallikreina, 高分子量激肽原, 纖維蛋白溶酶原.
Определение некоторых из этих параметров имеет значение не столько для диагностики, сколько для оценки остроты процесса и эффективности заместительной терапии.
Уровень фактора I (纖維蛋白原) также часто снижается, 什麼, 然而, маскируется исходно повышенным содержанием его в плазме при инфекционных и иммунных заболеваниях, токсикозах беременности и других видах патологии.
Выявление неоантигенов
В процессе активации факторов свертывания и фибринолиза и последующего образования их комплексов с физиологическими антагонистами возникают новые антигенные маркеры, отсутствующие отдельно в составных частях этих пар. 所以, 例如：, комплекс тромбин-антитромбин III образует антиген, не свойственный» отдельно ни тромбину, ни антитромбину III.
Точно так же образуется неоантиген в парном соединении плазмин — антиплазмин и т. D. При наличии антисывороток к этим неоантигенам легко установить наличие в крови активированных ключевых ферментов свертывания крови (凝血酶) и фибринолиза (纖溶酶).
Современная клиника располагает достаточно большим набором тестов, выявляющих внутрисосудистую активацию свертывания крови и фибринолиза.
Многие из этих тестов общедоступны, быстро и легко выполнимы. 結合使用他們提供一些其他的研究提供了可靠的實驗室診斷DIC和其他類型的海量性血管內凝血. 性血管內凝血的注視標記它被設置為的病理過程的動力學的正確的評估, 的效果和治療充足.
