การวินิจฉัยภาวะมีบุตรยากเกิดจากภูมิคุ้มกัน
ในช่วงชีวิตที่แต่งงานนานโดยไม่ต้องใช้ยาคุมกำเนิด, และการปรากฏตัวของภูมิภาคไมโครของเยื่อเมือกในอวัยวะสืบพันธุ์สามารถเกิดขึ้นค่อยๆจุด แอนติเจนสร้างเสริมภูมิคุ้มกันโรคของสเปิร์ม. การตรวจร่างกายของคู่สมรส, ประกอบด้วยในการแต่งงานเป็นหมัน, ไม่สามารถหาสาเหตุของภาวะมีบุตรยากใน 10-15 % กรณี. มันอยู่ในกลุ่มที่มีบุตรยากของคู่สมรสนี้เมื่อใช้วิธีการพิเศษของการสืบสวนลับคลองปากมดลูก, พลาสม่าน้ำเชื้ออสุจิและแอนติบอดีในซีรั่มที่มักจะมีการตรวจพบ (ASAT), ใช้การทดสอบเชิงปริมาณและคุณภาพของการวิจัยภูมิคุ้มกัน.
ทดสอบPostkoytalnыy (FCT)
ทดสอบPostkoytalnыy (FCT) มันหมายถึง immunoassay คุณภาพ. ผลลบแสดงให้เห็นตัวตนของสเปิร์มในที่ลับคลองปากมดลูก, แต่คุณไม่สามารถระบุสาเหตุของการขาดงานของพวกเขา.
วิธี. จากจำนวนสเปิร์มเคลื่อนไหวในที่ลับคลองปากมดลูก, หลังจากที่มีเพศสัมพันธ์ได้, สร้างขอบเขตของการละเมิดความสามารถในการเจาะของพวกเขาด้วยการมีบุตรยากหรือภูมิคุ้มกันให้กับพวกเขาเมือกคลองปากมดลูก.
FCT มีความจำเป็นต้องดำเนินการเงื่อนไขต่อไปนี้: การศึกษาควรจะดำเนินการในช่วงเวลาของการตกไข่, ซึ่งเผยให้เห็น colpocytologic หรือวิธีการอื่น ๆ, หลังจากที่คู่สมรสก่อนการเลิกบุหรี่ภายใน 2-3 วัน.
วิธีการของ. หลังจากที่มีเพศสัมพันธ์ตามปกติสำหรับผู้หญิง 30 นาทีควรนอนบนหลังของเขา, ดัดเข่าของคุณ. Douching และการทำความสะอาดต้องห้าม, ต้องผ้าอนามัยเท่านั้น, ซึ่งจะถูกลบออกในระหว่างการจับภาพสำหรับการศึกษาของเมือกคลองปากมดลูกที่. หลังจาก 2-4 ชั่วโมง, หลังจากที่ได้รับอนุญาตและ 6-10 ชั่วโมง (เวลา, ผ่านไปก่อนที่จะศึกษา, ที่ระบุไว้ในการวิเคราะห์) หลังจากที่มีเพศสัมพันธ์สัมผัสปากมดลูกโดยใช้กระจก Cuzco และเมือก endocervical สำลักหรือเข็มฉีดยาวัณโรค (โดยไม่ต้องใช้เข็ม), ปิเปตกับหลอดยาง, หรือเอทิลินสายสวน.
เมื่อซักเครื่องไม่ควรใช้สารฆ่าเชื้อ, ขณะที่พวกเขาส่งผลกระทบต่อการเคลื่อนไหวของอสุจิ. หนึ่งหยดเมือกที่เกิดจากคลองปากมดลูกจะถูกโอนไปยังภาพนิ่งแก้วอุ่น, coverslip เคลือบ, ดินแดนหล่อลื่นด้วยพาราฟินเหลวที่จะรั่วไหล. สูตร mikroskopiruyut ทันที (ช่องมองภาพ 7X, วัตถุประสงค์ 40X), กำหนดจำนวนและลักษณะของการเคลื่อนไหวของอสุจิ. ยาเสพติดสามารถตรวจพบได้กับสเปิร์มที่ใช้งานเคลื่อนที่ที่ก้าวหน้า, การเคลื่อนไหวสั่น (ปรากฏการณ์ของการแกว่ง) และคง.
ได้รับการยืนยันให้ห้าประเภทของข้อสรุป FCT.
- ที่ดีเยี่ยม (บรรทัดฐานที่เกี่ยวข้อง): ในห้าด้านของมุมมองได้ถึง 15-20 สเปิร์มที่มีการเคลื่อนไหวที่ใช้งานมีความก้าวหน้าและอื่น ๆ. สเปิร์มที่มีปรากฏการณ์ของการสั่นน้อยกว่า 25 %.
- ความพึงพอใจ: ในห้าด้านของมุมมอง 10 สเปิร์มที่ใช้งานคล่องตัวและความก้าวหน้าน้อย 25 % สเปิร์มที่มีปรากฏการณ์ของการแกว่ง.
- แย่: น้อยกว่า 5 สเปิร์มในห้าด้านของมุมมอง.
- ลบ: ตัวตนของสเปิร์ม.
- หนี้สงสัยจะสูญ: ในห้าด้านของมุมมองมากขึ้น 5 สเปิร์มที่ใช้งานเคลื่อนที่และอื่น ๆ 25 % ปรากฏการณ์ของการแกว่ง.
เมื่อประเภทที่ห้าของ FCT สังเกตมักจะเข้ากันไม่ได้ของระบบภูมิคุ้มกันระหว่างคู่สมรส, ดังนั้นจึงจำเป็นที่จะต้องตรวจสอบ ACAT. เพื่อระบุ endocervical ลับ ACAT, พลาสม่า, น้ำอสุจิหรือซีรั่มเลือดและแสดงให้พวกเขา (เกาะติดกันหรือตรึง) มันต้องมีการแต่งตั้ง immunoassays เชิงปริมาณ.
ลบ PBC เริ่มต้นด้วยการศึกษาความหมายของการเจาะ (การเจาะ) ความสามารถของสเปิร์มผ่านการทดสอบทะลุ (ศุกร์) และไวต่อการหลั่งอสุจิของคลองปากมดลูกโดยใช้การติดต่อการทดสอบของสเปิร์มและมูกปากมดลูก (TKSTSS).
ทดสอบ Penetracionnyj (TP)
ความยาวของเส้นเลือดฝอยบาง 10 ดูพิมพ์ในช่วงการตกไข่เมือกคลองปากมดลูก. ปลายด้านหนึ่งที่เปิดกว้างของเส้นเลือดฝอยปิดดิน, และครั้งที่สองจะอยู่ในหลอดทดลองที่มีการทดสอบสดอุทาน (ไม่มีอะไรมาก 3 หลังจากที่พุ่งออกมาชั่วโมง). ด้วยดินเหนียวในเส้นเลือดฝอยที่แนบมากับท่อตรง. กลุ่มตัวอย่างที่มีการบ่มในอุณหภูมิที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส 1 ไม่. กับคุณภาพของอุทานจะตัดสินโดยความลึกของการรุกของสเปิร์มในเมือกคลองปากมดลูกที่. มีสามประเภทของก๊าซเรือนกระจกที่มี.
- ซึ่งยืนยัน - ความลึกของการเจาะ (ระยะทางที่ยิ่งใหญ่ที่สุดในเซนติเมตร, เดินทางไปที่สเปิร์มน้อยเดียว) เหนือ 5 ซม.; จำนวนสเปิร์มในจุดสูงสุดของการเจาะมากขึ้น 5 ในสายตา, และจำนวนตัวอสุจิเคลื่อนที่ในไตรมาสที่สามบนของเส้นเลือดฝอยที่มีค่ามากกว่า 50 %.
- หนี้สงสัยจะสูญ - ความลึกของการเจาะถึง 5 ดูจำนวนอสุจิน้อย 5, การเคลื่อนไหวของพวกเขาในไตรมาสที่สามบนของต้นน้ำฝอย 50%.
- ลบ - ความลึกของการรุกของสเปิร์มถึง 1 ซม..
ความสามารถของสเปิร์มที่จะเจาะ มันขึ้นอยู่กับขั้นตอนของรอบเดือน. เธอเริ่มที่จะออกจากวันที่ 9 ของรอบประจำเดือน, ค่อยเปิดใช้งาน, การแสดงออกถึงสูงสุดในช่วงเวลาของการตกไข่, ที่จัดขึ้นในระดับนี้เป็นเวลาสองวัน, แล้วค่อยๆลดลง.
น้ำอสุจิติดต่อทดสอบมูกปากมดลูก (TKSTSS)
ในสไลด์ใส่หยดเล็ก ๆ ของเมือกจากคลองปากมดลูก, ที่นำมาจากในช่วงการตกไข่ของผู้หญิง, และจำนวนของการลดลงขนาดเดียวกันของอุทาน. หยดทั้งสองจะถูกปกคลุมไปด้วยแก้วปก, ซึ่งถูกกดลงเล็กน้อย, เข้าร่วมในการลดลง. ยาเสพติดที่ถูกวางไว้ในห้องที่มีความชื้น (จานเลี้ยงเชื้อด้วยสำลีชุบ) และบ่มในอุณหภูมิที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส 1 ไม่.
ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้อสุจิปกติเจาะความลับของคลองปากมดลูกปกติ, ที่สามารถมองเห็นภายใต้กล้องจุลทรรศน์ที่กำลังขยาย 200X. บัญชีสำหรับปฏิกิริยาใกล้เขตแดนระหว่างสองสื่อนับจำนวนของการเจาะความลับของสเปิร์มคลองปากมดลูกในสองช่องที่อยู่ติดกันในมุมมองของ.
ด้วย TKSTSS ยอดเยี่ยมในสองช่องมองเผยให้เห็นมากขึ้น 25 สเปิร์มอย่างแข็งขันเคลื่อนที่ในปรากฏการณ์ของการแกว่งน้อย 25 %. หาก TKSTSS ที่น่าพอใจในสองด้านของมุมมองที่เปิดเผยมากขึ้น 15 สเปิร์มอย่างแข็งขันเคลื่อนที่, TKSTSS ต่ำ - น้อยกว่า 15. เจาะขาดเชิงลบ TKSTSS, ถ้าสงสัย - ปรากฏการณ์ของการสั่นเกิน 25 %.
ในการทดสอบนี้, ในขณะที่เปอร์เซ็นต์, ปรากฏการณ์ของการแกว่ง, เกิน 25 %, น่าจะ, มันแสดงให้เห็นการปรากฏตัวของ ACAT และต้องแต่งตั้ง immunoassays เชิงปริมาณ.
การใช้น้ำอสุจิหลั่งปากมดลูกและช่องทางที่คนที่มีบุตรยากและความอุดมสมบูรณ์ในปริมาณที่แตกต่างจากการใช้ TKSTSS ระบุสามีมีบุตรยาก.
- ตัวอย่าง 1. เอาความลับของช่องปากมดลูกในสตรีที่มีบุตรยากคู่และการควบคุมอุทานคนที่มีสุขภาพดี. TKSTSS ที่ดีแสดงให้เห็นความสามารถในการเจาะที่อ่อนแอของสเปิร์มของสามีของเธอและความไวต่อการหลั่งปกติของปากมดลูกคลองที่.
- ตัวอย่าง 2. ความลับที่นำมาเต็มรูปแบบของปากมดลูกคลองผู้หญิงที่มีสุขภาพดีและสามีของเธออุทานของคู่ที่มีบุตรยาก. TKSTSS Bad บ่งชี้ว่ามีการรุกที่อ่อนแอของสเปิร์ม.
- ตัวอย่าง 3. ถ่ายผู้หญิง endocervical ลับคู่ที่มีบุตรยากและการควบคุมอุทานผู้ชายที่มีสุขภาพ. TKSTSS Bad บ่งชี้คลองปากมดลูกลับด้อยกว่า, ซึ่งเห็นได้ชัดไม่เจาะตัวอสุจิปกติ.
การทดสอบภูมิคุ้มกันเชิงปริมาณ
Mikroagglyutinatsionny ทดสอบไฟร์เบิร์ก
Mikroagglyutinatsionny ทดสอบไฟร์เบิร์ก (TF) พอมีความสำคัญและสามารถใช้ได้สำหรับการวินิจฉัยทางคลินิกห้องปฏิบัติการ. TF ใช้สามารถตรวจสอบสถานะของ ACAT titer และการเกาะติดกันในวัสดุต่างๆ (อุทานพลาสม่า, สารสกัดจากเมือกคลองปากมดลูกและในซีรั่มของคู่สมรสทั้งสอง).
รีเอเจนต์:
1. น้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (เอฟเอส) 0,01 Мค่า pH 7,2-7,4.
2. น้ำมัน Vazelinovoe.
อุปกรณ์: กล้องจุลทรรศน์, เข็มฉีดยาวัณโรค, mikroagglyutinatsionnye pipetter 1 มล., กำลังการผลิตไมโคร 0,1 มล..
วิธี. เลือดซีรั่มทดสอบการใช้งานโดยศูนย์บ่มเพาะบ่มในที่ 56 องศาเซลเซียส 30 ม.. อุทาน, ที่ได้จากการช่วยตัวเอง, ปรับลดทันทีเพื่อให้เอฟเอส, ความเข้มข้นของสเปิร์มเป็น 40 ล้าน. ใน 1 มล..
เพราะของวัสดุ (อุทานพลาสม่า, ดึงความลับของคลองปากมดลูกหรือซีรั่ม) มีการเตรียมชุดของเจือจาง 1:4 ไปยัง 1:128 ใช้เป็นของเหลวสำหรับการเจือจางเอฟเอส. ในหลุมที่มี mikroagglyutinatsionnyh น้ำมันพาราฟิน planchettes tuberculin เข็มฉีดยาด้วยเข็มเป็นที่รู้จัก (ภายใต้น้ำมัน vazelinovoe) หยดเล็ก ๆ ของการลดสัดส่วนของแต่ละการทดสอบวัสดุ. หลังจากที่แต่ละตัวอย่างจะล้างครั้งที่สี่เข็มฉีดยา. ในการลดสัดส่วนแต่ละจะถูกเพิ่มใน 5 ครั้งลดลงเล็กอุทาน, และโดยการ 4 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้องตรวจพบติดเป็นก้อน. พันธุ์ล่าสุด, โดยภายใต้กล้องจุลทรรศน์ที่กำลังขยาย 100X ตรวจพบ 3 รวมกันภายใต้การทบทวนและอื่น ๆ, เกาะติดกัน titer สอดคล้อง ACAT.
Spermoimmobilizuyuschy ทดสอบ Izodzhima (SIT).
titer ตรึงซีรั่ม ACAT, พลาสม่าหรือสารสกัดจากน้ำอสุจิคลองปากมดลูกลับถูกกำหนดโดยจำนวนสเปิร์มเคลื่อนไหวในการปรากฏตัวของแอนติเจน (สเปิร์ม).
ส่วนประกอบ.
1. อุทาน, ซึ่งผลิตและเตรียมความพร้อมในทำนองเดียวกัน, สำหรับ TF ใช้เอฟเอส; การเคลื่อนไหวเกิน 70 %.
2. ซีรั่ม Komplementsoderzhaschaya ของหนูตะเภา.
3. ภูมิคุ้มกันในซีรั่มของมนุษย์ (ICHs), ให้ในการปรากฏตัวของส่วนประกอบที่ผ่านการ 1 ชั่วโมงการตรึงบ่ม 90 % สเปิร์ม.
4. เซรั่มปกติของมนุษย์ (NCHs), การใช้งานด้วยความร้อนที่อุณหภูมิ 56 องศาเซลเซียส 30 ม..
5. การทดสอบการใช้งานในซีรั่ม, พลาสม่าและน้ำอสุจิแยกคลองปากมดลูกที่เป็นความลับ.
วิธี. เพื่อประเมินกิจกรรมเสริมตรึงท่อ 1 เป็นที่รู้จัก 0,5 มล. ของการแก้ปัญหาโซเดียมคลอไรด์ isotonic, เพื่อตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงในการเคลื่อนไหวของอสุจิโดยไม่ต้อง ASAT หลอดทดลองที่ 2 - 0,5 มลพลุกพล่าน, การควบคุมการตรึงท่อที่สาม - 0,5 มิลลิลิตร ICHs และการกำหนด ACAT ตรึงท่อ 4 - 0,5 มิลลิลิตรซีรั่ม, หรือพลาสม่าของอุทาน, สารสกัดหรือการหลั่ง endocervical.
จากนั้นแต่ละหลอดเป็นที่รู้จักโดย 0,1 เติมเต็มมล.. สิ่งสุดท้ายที่หลอดทั้งหมดจะถูกเพิ่ม 0,05 ระงับอสุจิมล. ในความเข้มข้น 40 ล้าน. ใน 1 มล.. ท่อขาตั้งกล้องถูกวางไว้ในตู้อบที่อุณหภูมิ 37 ° C 1 ไม่. หลอดจะถูกลบออกจากเตาอบและเขย่าอย่างระมัดระวังเพื่อสะท้อนให้เห็นถึงการตัดสินของตัวอสุจิติดเป็นก้อน.
เพื่อประเมินผลภายใต้กล้องจุลทรรศน์กำลังขยายสูง (400เอ็กซ์) คำนวณร้อยละของสเปิร์มในการเคลื่อนที่ลดลงของหลอดทดสอบ, วางลงบนสไลด์แก้วและปกคลุมด้วยฝาครอบ. ในทำนองเดียวกันก็กำหนดร้อยละของสเปิร์มเคลื่อนไหวในหยดของหลอดทดสอบที่มีความพลุกพล่านและ ICHs ที่. ผลที่ตามมาของการเกิดปฏิกิริยาในบัญชีตามสูตร
SIT = K /
ที่ K - จำนวนของสเปิร์มเคลื่อนไหวในการควบคุมกับ ICHs และพลุกพล่านที่;
เกี่ยวกับ - จำนวนของสเปิร์มเคลื่อนไหวในหลอดทดสอบ (การทดสอบซีรั่ม, หรือพลาสม่าของอุทาน, หรือความลับของคลองปากมดลูกที่).
ด้วย SIT เฉลี่ย<2 การทดสอบเป็นลบ (จำนวนของเซลล์สเปิร์มเคลื่อนไหวในการควบคุมและในหลอดทดลองประมาณเดียวกัน), หากดัชนีซีทีไอ>2 - การทดสอบเป็นบวก, เสื้อ. มันคือ. ในวัสดุ (ซีรั่ม, พลาสม่าหรือน้ำอสุจิแยกคลองปากมดลูกที่เป็นความลับ) จะตรึง ACAT.
- ตัวอย่าง 1. ควบคุมภาคพื้นดินเพื่อ ICHs - 10 % สเปิร์มเคลื่อนไหว. การควบคุมที่สองกับพลุกพล่าน - 80% สเปิร์มเคลื่อนไหว. ทั้งสองควบคุมร่วมกัน - 90 % สเปิร์มเคลื่อนไหว. ในหลอดทดลอง - 80 % สเปิร์มเคลื่อนไหว.
SIT = R / D = 90/80 = 1.1
การทดสอบเป็นลบ, ตรึงขาด ACAT.
- ตัวอย่าง 2. ในหลอดทดลอง - 40 % สเปิร์มเคลื่อนไหว, อย่างไรก็ตามในการควบคุม, ในตัวอย่างที่ 1.
KN = 90/40 = 2.2
การทดสอบในเชิงบวก. มีแอนติบอดีตรึงคือ (ASAT), โดยที่การเคลื่อนไหวของอสุจิลดลงอย่างมีนัยสำคัญ.