โรคโลหิตจาง, เกี่ยวข้องกับการขาดกรดโฟลิค

ไม่ว่าโรคโลหิตจางขาดกรดโฟลิคเหตุผลที่โดดเด่นด้วยการปรากฏตัวในไขกระดูก megaloblasts ที่, การทำลายไขสันหลัง erythrokaryocytes, patsitopeniey, macrocytosis และ hyperchromia เซลล์เม็ดเลือดแดงและบางครั้ง - ผิดปกติท​​างจิต.

Folievaya (pteroilglutaminovaya) กรด (วิตามินบี₉) ประกอบด้วยสามส่วน:

• แหวน pteridine;
• กรด P-aminobenzoic (ร่วมกันเป็นกรด pteroievuyu);
• กรดกลูตามิก.

น้ำหนักโมเลกุลของกรดโฟลิค - 441. กรดโฟลิกมีการใช้งานในรูปแบบของอนุพันธ์ของกรด tetrahydrofolic. เนื้อหากรดโฟลิกในรูปแบบที่แตกต่างกันในร่างกายมนุษย์คือประมาณ 5-10 มก.. หุ้นในการละเมิดของการรับสมัครที่เข้าสู่ร่างกายอาจจะหมดลงในช่วง 4 ของเดือน.

ความต้องการในชีวิตประจำวันของกรดโฟลิกเป็น 100-200 ไมโครกรัม, การตั้งครรภ์, โรคโลหิตจาง hemolytic มันจะเพิ่มหลายครั้ง.

จำนวนเงินรวมของกรดโฟลิคในอาหารที่มีอำนาจเต็มของ 500-600 ไมโครกรัมต่อวัน. โฟเลต - โฟเลต ที่มีอยู่ในจำนวนมากในตับ, ยีสต์, นิล, เนื้อ. มากกว่า 50 % กรดโฟลิค, ในอาหาร, มันสามารถถูกทำลายเมื่อสุก.

กรดโฟลิกจะถูกดูดซึมในลำไส้เล็กส่วนบน. ความสามารถของลำไส้เพื่อดูดซับกรดโฟลิคจะสูงกว่าความต้องการในชีวิตประจำวันของตน.

กรดโฟลิกมีส่วนร่วมในการสังเคราะห์และฐาน pyrimidine purine, พร้อมกับ methylcobalamin - สังเคราะห์ uridinmonofosfata timidinm nofosfata. โฟเลตโคเอนไซม์ ส่วนร่วมมากขึ้นในจำนวนของปฏิกิริยา. โดยเฉพาะอย่างยิ่ง, tetrahydrofolate มีส่วนร่วมในการสังเคราะห์กรดกลูตามิฮิสติดีน.

สาเหตุการเกิดโรคและโรคโลหิตจางในระหว่างการขาดกรดโฟลิค

การขาดกรดโฟลิก, เช่นเดียวกับการขาดดุลของ cobalamin, จะนำไปสู่​​การพัฒนาของโรคโลหิตจาง megaloblastic.

malabsorption ของโฟเลต ข้อสังเกตในบุคคล, การผ่าตัดของลำไส้เล็ก, jejunum โดยเฉพาะอย่างยิ่ง, เช่นเดียวกับในระยะยาวการเช่นยากันชัก diphenylhydantoin (difenina) และ phenobarbital (luminal). ปริมาณของกรดโฟลิคเสียเมื่อโรคป่วงและช่องท้อง. การขาดกรดโฟลิก, เช่นเดียวกับการขาดดุลของ cobalamin, สังเกตเห็น ห่วงโรคตาบอด. อธิบายกรณีที่หายากของความผิดปกติท​​างพันธุกรรมของการขนส่งกรดโฟลิคทั่วผนังลำไส้และเข้าไปในน้ำไขสันหลัง. การดูดซึมของสารอื่น ๆ โดยไม่ต้องทุกข์ทรมาน.

การขาดกรดโฟลิกในทารกแรกเกิด ข้อสังเกตในทารกเกิดก่อนกำหนด, การละเมิดของการดูดซึมในลำไส้, เลี้ยงนมแพะ, ที่มีจำนวนเล็ก ๆ ของกรดโฟลิค.

malabsorption สำคัญของกรดโฟลิคที่อาจเกิดขึ้นในผู้ป่วย, สุรา.

เพิ่มการบริโภคของกรดโฟลิคในระหว่างตั้งครรภ์ มันจะนำไปสู่​​การขาดกรดโฟลิค, แต่ในประเทศที่พัฒนาแล้วในวันนี้มันเป็นเรื่องยาก. การขาดกรดโฟลิกในหญิงตั้งครรภ์ที่พบในการใช้พลังงานต่ำ, การปรากฏตัวของโรคโลหิตจาง hemolytic, ใช้ก่อนการตั้งครรภ์จำนวนมากของเครื่องดื่มแอลกอฮอล์.

อาการทางคลินิกของการขาดโฟเลต

การขาดกรดโฟลิกในเด็กและหญิงสาว. ในขณะเดียวกันผู้ป่วยบ่นของความอ่อนแอทั่วไป, เวียนหัว. ซึ่งแตกต่างจากการขาด cobalamin ลิ้นเจ็บไม่ค่อยสังเกต. paresthesias และอาการอื่น ๆ ของปู่ myelosis หายไป. ตาขาวมัก ikterichnost.

ในทางตรงกันข้ามกับการขาดดุลของการขาด cobalamin ของกรดโฟลิกเป็นที่สังเกตไม่ค่อย gistaminoupornaya Akhil, gastratrophia, ถึงแม้จะลดลงจากการหลั่งในกระเพาะอาหารมักจะเป็น.

การขาดโฟเลต, เช่นเดียวกับการขาด cobalamin, ลักษณะโดยลักษณะใน macrocytosis เลือดต่อพ่วง, megalocitov และ megaloblasts, การปรากฏตัวของโรคโลหิตจาง hyperchromic, การลดจำนวนของ reticulocytes, เกล็ดเลือดและเม็ดเลือดขาวที่มีการเปลี่ยนแปลง neutrophilic ไปทางซ้ายและขวา. ในไขกระดูก - megaloblasts.

การเปลี่ยนแปลงในระบบประสาทจะแตกต่างจากอาการที่บี₁₂-โรคโลหิตจางขาด.

ได้รับการพิสูจน์, คนที่มีโรคลมชัก, การขาดกรดโฟลิกนำไปสู่​​การโจมตีบ่อย, ความรุนแรงของพวกเขามากขึ้น. นี้เป็นสิ่งสำคัญโดยเฉพาะอย่างยิ่งเพราะความจริงที่, ยากันชักว่าการที่สามารถทำให้เกิด malabsorption ของโฟเลต. ตามวรรณคดี, ในบุคคลที่มีขาดกรดโฟลิคโรคจิตเภทนำไปสู่​​การถดถอยของการเกิดโรค, อาการรุนแรงมากขึ้นและการรักษาที่มีประสิทธิภาพน้อย.

การวินิจฉัยแยกโรคของการขาด cobalamin และกรดโฟลิก

สำหรับการวินิจฉัยแยกโรคของการขาด cobalamin และกรดโฟลิคจะใช้ วิธี radioimmunoassay สำหรับการวัดค่ากรดโฟลิคในซีรั่มและโดยเฉพาะอย่างยิ่งในเม็ดเลือดแดง. เนื้อหาของ cobalamin จะถูกกำหนดโดยวิธีทางจุลชีววิทยา. ในฐานะที่เป็นสิ่งมีชีวิตที่ทดสอบใช้เป็น Streptococcus faecalis และ Lactobacillis casei. โดยปกติเนื้อหาของกรดโฟลิคในช่วงซีรั่มเลือด, ตามที่ผู้เขียน, โดยใช้วิธีการที่แตกต่างกันการวิจัย, จาก 3 ไปยัง 25 ng / ml, และเม็ดเลือดแดง - จาก 100 ไปยัง 425 ng / ml.

ในการขาดกรดโฟลิคลดลงตามระดับของซีรั่ม, และในเม็ดเลือดแดง. ที่ขาด kolabaminov เนื้อหากรดโฟลิคในเลือดมักจะเพิ่มขึ้น, เม็ดเลือดแดงและบางครั้งอาจจะลดลง, แม้ว่าจะลดลง, มักจะ, ที่มีขนาดเล็ก.

สำหรับการวินิจฉัยการขาดกรดโฟลิกยังถูกนำมาใช้ ฮิสติดีนโหลดวิธี (15 ก.), แล้วกำหนดเนื้อหาของกรดใน formiminglutaminovoy ปัสสาวะ. โดยปกติจำนวนมากในรูปแบบของกรดกลูตามิฮิสติดีนที่. ด้วยปัสสาวะออก 1-18 มก. กรด formiminglutaminovoy. ที่ขาดกรดโฟลิคสำหรับ 8 ชั่วโมงหลังจากที่เปิดตัวเข้าสู่ร่างกายจะถูกปล่อยออกจากปัสสาวะ 20 ไปยัง 1500 กรด formiminglutaminovoy มิลลิกรัม. จำนวนมากของกรด formiminglutaminovoy ขับออกมาในปัสสาวะหลังจากที่การบริหารงานของฮิสทิดีในคน, รับการรักษาด้วย methotrexate. ที่ขาด cobalamin, โรคตับแข็งของตับขับถ่ายปัสสาวะของกรดเพิ่ม formiminglutaminovoy, ในระดับน้อย, กว่าการขาดดุลของกรดโฟลิ. ระดับปกติของทางเดินปัสสาวะเพิ่มขึ้นของปริมาณกรด methylmalonic formiminglutaminovoy กรดฮิสติดีนหลังจากที่ได้รับหลักฐานของการขาดของกรดโฟลิ, แทนการ cobalamin.

มันจะช่วยให้แยกความแตกต่างเหล่านี้ทั้งสองรัฐและการศึกษา radionuclide. ที่ขาด cobalamin, ที่เกี่ยวข้องกับการละเมิดการหลั่งของปัจจัยที่แท้จริง, การดูดซึมบกพร่องของ cyanocobalamin ติดป้าย, การขาดของกรดโฟลิจะถูกดูดซึมได้อย่างถูกต้อง.

ที่ขาดกรดโฟลิคเปิดตัวเข้าสู่ร่างกายนำไปสู่​​เนื้อหาที่สูงขึ้นของ reticulocytes, ในขณะที่การฉีด cyanocobalamin (สัญญาซื้อขายล่วงหน้า) ไม่ได้ผล. การขาดกรดโฟลิก methylcobalamin เพิ่มระดับการ reticulocytes.

นิวโทรฟิแบ่งส่วนการกำหนดดัชนี

นับจำนวนนิวโทรฟิ, กับ 4 ส่วนและอื่น ๆ (ทั้งหมด 200 เซลล์). กำหนดอัตราร้อยละของเซลล์, กับ 5 กลุ่มและญาติมากขึ้นในจำนวนของเซลล์, กับ 4 ส่วน. ดัชนีจะถูกกำหนดโดยสูตร:

IS =(KS (5 และอื่น ๆ))/KS(4);

ที่ IC - การแบ่งส่วนดัชนี;

KS (5 และอื่น ๆ) - จำนวนนิวโทรฟิแบ่ง (บน 200 เซลล์), ซึ่งในจำนวนของกลุ่มจะมีค่าเท่ากับ 5 หรือมากกว่า;

KS (4) - จำนวนนิวโทรฟิแบ่ง, ซึ่งในจำนวนของกลุ่มจะมีค่าเท่ากับ 4.

โดยปกติช่วงนี้ดัชนี 2,5 ไปยัง 25 %. สถานที่, เมื่อมันเกิน 30 % (แนบแน่น 120%), คุณสามารถพูดคุยเกี่ยวกับนิวโทรฟิ hypersegmentation. มันสังเกตเห็นการขาดกรดโฟลิค, metilkoʙalamina, และ uremia.

การกำหนด methylmalonic กรดในปัสสาวะโดย Giordio และ Plaud

รีเอเจนต์.

1. เรซินแลกเปลี่ยนไอออน Dowex-Zx4 (รูปแบบคลอไรด์, 200-400 ตาข่าย). เรซินถูกล้างด้วยห้าเล่มของน้ำกลั่น 3 ครั้ง, ถูกระงับในสองเล่มของน้ำกลั่นและเก็บไว้ในจานสีเข้มที่ 4 ° C.

2. วิธีการแก้ปัญหาของพารา nitroaniline 0,075 % จัดทำขึ้นโดยการละลาย 37,5 น้ำยามก. 500 มล. 0,2 วิธีการแก้ปัญหา M ของกรดไฮโดรคลอ. เก็บในหม้อที่มืด, มันยังคงมีเสถียรภาพเป็นเวลาหลายเดือนที่อุณหภูมิห้อง.

3.บัฟเฟอร์ Acetate (พีเอช 4,3) ที่ทำจาก 1 M acetate โซเดียมและ 1 วิธีการแก้ปัญหา M กรดอะซิติก.

4.Diazoreaktiv: 4 มล. 0,5 % วิธีการแก้ปัญหาโซเดียมไนเตรทผสมกับ 15 มล. พารา nitroaniline. ส่วนผสมที่ถูกวางไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสและการแก้ปัญหาการระบายความร้อนถูกเพิ่ม 4 มล. 0,2 M โซเดียมอะซิเตท. สารเคมีที่มีความเสถียรที่อุณหภูมิ 4 ° C สำหรับวัน.

5.ปกติ 0,05 วิธีการแก้ปัญหาของ M methylmalonic กรด: 295 methylmalonic กรดมิลลิกรัมจะละลายใน 50 ml ของน้ำ.

วิธี

ปัสสาวะที่ถูกเก็บรวบรวมลงในขวดแก้วและแช่แข็งจนการศึกษา. เพื่อศึกษาค่าใช้จ่ายในส่วนของปัสสาวะ (20- 25 มล.), ละลาย, tsentrifugiruyut, และใสถูกเก็บรวบรวมโดยใช้วิธีการแก้ปัญหาที่อ่อนแอของโซดาไฟหรือกรดไฮโดรคลอปรับพีเอช 6,5.

คอลัมน์โครมาสูง 20 ซม. และขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 1 ซม. ก็เต็มไปด้วยเรซิน Dowex-Zx4. ชั้นเรซินควรจะอยู่ใน 3 ซม.. จะถูกส่งผ่านเรซิน 5 มล. ของปัสสาวะ, ล้างด้วยน้ำกลั่น (2 × 50 มล. ในอัตราไม่เกิน 15 มล. 1 จาก). methylmalonic กรดอาจจะชะจากเรซิน 20 มล. 0,1 วิธีการแก้ปัญหา M ของกรดไฮโดรคลอ. ต่อไป 2 มิลลิลิตร eluate ถูกผสมกับ 3 มล. 1 M pH บัฟเฟอร์อะซิเตท 4,3 ในหลอดทดสอบที่มีอุดแก้ว (15×2ซม.). ส่วนผสมจะมีการเพิ่ม 3 มล. diazoreaktiva เย็น, ประเด็นค่า pH จะเพิ่มขึ้นถึง 4,0. ส่วนผสมที่ถูกความร้อนในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 94 องศาเซลเซียส 3 นาที 2 มล. 3 M สารละลายโซเดียมไฮดรอกไซ. หลอดจะถูกลบออกจากห้องอาบน้ำแล้วน้ำ, จุกและเนื้อหากวน. ส่วนผสมที่ได้รับการระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้อง 10 นาทีที่ fotometriruyut 620 นาโนเมตรใน cuvette ที่มีความยาวทางเดิน 1 ซม..

ในฐานะที่เป็นการควบคุมส่วนผสมของ, ซึ่งประกอบด้วย 2 มล. 0,1 วิธีการแก้ปัญหา M ของกรดไฮโดรคลอ, 3 มล. และ diazoreaktiva 3 บัฟเฟอร์อะซิเตทมล.. สารละลายมาตรฐานกรด methylmalonic ประกอบด้วยองค์ประกอบเดียวกันและ 0,02 มล. 0,05 วิธีการแก้ปัญหาของ M methylmalonic กรด. การดูดกลืนแสงของการแก้ปัญหาเหล​​่านี้ถูกวัดภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน.

เนื้อหา methylmalonic กรด (มก.) ต่อหน่วยปริมาณของปัสสาวะ (1 ล.) ที่กำหนดโดยสูตร:

(เป็น_{กลุ่มตัวอย่าง}-เป็น_{การควบคุม})/(เป็น_{มาตรฐาน}-เป็น_{การควบคุม})*A *((1000*ต)/ม)

ที่ E - การดูดกลืนแสงของกลุ่มตัวอย่างต่างๆ;

เอ - ปริมาณของกรด methylmalonic ในหลอดทดสอบมาตรฐาน, มล.;

1000 - ปริมาณของปัสสาวะ, นำสำหรับการวิจัย, มล.;

T - จำนวนเงินของกรดไฮโดรคลอริก, ดำเนินการสำหรับการชะ, มล.;

M - จำนวนของ eluate ที่, นำสำหรับการวิจัย, มล..

ภายใต้เงื่อนไขดังกล่าวข้างต้นสูตรได้ง่ายดังนี้:

(เป็น_{กลุ่มตัวอย่าง}-เป็น_{การควบคุม})/(เป็น_{มาตรฐาน}-เป็น_{การควบคุม})*236

สถานที่, เมื่อปริมาณของกรด methylmalonic ในปัสสาวะมากกว่า 300 มิลลิกรัม / ลิตร, ควรจะ re-ผสมกับ eluate บัฟเฟอร์อะซิเตทและ diazoreaktivom, แต่แทนที่จะ 2 มิลลิลิตร eluate เป็นการสมควรที่จะใช้ 4 10 ครั้งลดลงและปริมาณนำไป 2 มล. 0,1 แก้ปัญหา M กรดไฮโดรคลอ. การคำนวณควรคำนึงถึงการลดสัดส่วนบัญชี.

ปกติต่อวันมีปัสสาวะออก 0,6-4,7 มิลลิกรัม methylmalonic กรด. ที่ขาด cobalamin ขับถ่ายประจำวันของต้นน้ำ methylmalonic กรด 294 มก.. โดยปกติการรับสัญญาณ 10 valine กรัมไม่เพิ่มการกวาดล้างของ methylmalonic กรด, ขาด cobalamin เพิ่มการขับถ่ายของ methylmalonic กรด.

การกำหนด methylmalonic กรดในปัสสาวะสีเขียว

รีเอเจนต์.

1. อีเทอร์.
2. เอทานอล.
3. วิธีการแก้ปัญหาของกรดไฮโดรคลอ 0,1 M.
4. แอมโมเนียมซัลเฟต.
5. เรซินฐานที่แข็งแกร่ง deatsidit FF (200 กินกัน, รูปแบบคลอไรด์).
6. วิธีการแก้ปัญหาของโซเดียมไนเตรท 0,5 % (น้ำหนัก / ปริมาณ).
7. วิธีการแก้ปัญหาของพารา nitroaniline (750 มิลลิกรัมละลายใน 1 ล. 0,2 วิธีการแก้ปัญหา M ของกรดไฮโดรคลอ).
8. โซเดียมอะซิเตท 0,2 M.
9. บัฟเฟอร์ Acetate 1 M, พีเอช 4,3: ผสม 1 แก้ปัญหา M acetate โซเดียมและ 1 วิธีการแก้ปัญหา M กรดอะซิติกในอัตราส่วน 16,35:33,9.
10. สารละลายโซเดียมไฮดรอกไซ 3 M.

ก. สารละลายมาตรฐาน methylmalonic กรด: 100 มิลลิกรัมละลายใน 100 ml ของน้ำ, ที่เก็บไว้ในตู้เย็น.

B. ทำงาน methylmalonic กรดมาตรฐาน: สารละลายมาตรฐานเจือจางใน 20 เวลา 0,1 แก้ปัญหา M กรดไฮโดรคลอ (1 มิลลิลิตรมาตรฐานและ 19 มล. ของกรดไฮโดรคลอ). เงินจำนวนนี้เทียบเท่า methylmalonic กรด 100 มก. กรด methylmalonic 1 ลิตรเงื่อนไขการทดสอบปัสสาวะ.

สำหรับการเตรียม diazoreaktiva ผสม 4 มล. 0,5 % วิธีการแก้ปัญหาและโซเดียมไนเตรท 15 มล. พารา nitroaniline. ส่วนผสมที่ถูกวางไว้ในห้องอาบน้ำน้ำแข็งและเพิ่ม 4 มล. 0,2 M โซเดียมอะซิเตท.

วิธี.

ปัสสาวะที่ถูกเก็บรวบรวมเป็นเวลาหนึ่งวัน, วัดปริมาณและ 10 มล. podkislyayut 1 แก้ปัญหา M กรดกำมะถันค่าพีเอช 2,0 หรือต่ำกว่าเล็กน้อย. แอมโมเนียมซัลเฟตถูกบันทึกอยู่ในความอิ่มตัว. ส่วนผสมที่ถูกวางไว้ในช่องทาง separatory และสกัดสามครั้งกับเอทานอลอีเธอร์และในอัตราส่วนของ 3:1. เพื่อป้องกันการก่อตัวของอีมัลชั่ส่วนผสมสารสกัดที่ใช้ในส่วนที่เกิน.

สารสกัดได้ผ่านคอลัมน์ที่มีขนาดเล็ก (1 – 1,5 เส้นผ่าศูนย์กลางซม.), เสร็จ 5 มลเรซิน. คอลัมน์ถูกล้าง 50 มล. น้ำกลั่น. methylmalonic กรดชะ 0,1 แก้ปัญหา M กรดไฮโดรคลอ. หลังจากชะเลือก 2 eluate มล., W ถูกเพิ่มมล. ของบัฟเฟอร์อะซิเตทและ 3 มล. diazoreaktiva.

หลังจากผสมหลอดถูกวางไว้ในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 95 ° C 3 ม.. เพิ่มแล้ว 2 มล. 3 M โซดาไฟและเมื่ออุดท่อปิดเพื่อลดการสัมผัสกับอากาศ. หลังจากที่ระบายความร้อนที่ถูกดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่นวัด 620 พวกเขา. สำหรับว่างเปล่าแทนการใช้ eluate 2 มล. 0,1 วิธีการแก้ปัญหา M ของกรดไฮโดรคลอ, และสำหรับการแก้ปัญหามาตรฐาน - 2 มิลลิลิตรมาตรฐานการทำงาน.