Metoder för detektion av Leishmania i skrapning av den påverkade vävnaden genom isolering av renkultur

Vid sådd skrapning den drabbade vävnaden hos patienten till en specifik näringsmedium Leishmania föröka sig och de kan detekteras genom mikroskopi.

Reagens

Среда W.W.W. för odling av Leishmania (14 g agar, 6 g natriumklorid, om 150 ml defibrinerat kaninblod, tas direkt från hjärtat innan förbereda medel, 900 ml destillerat vatten). I destillerat vatten tillsattes natriumklorid och agar. Kolven innehållande mediet upphettades tills fullständig smältning av ägarn, och 20 till 30 min steriliseras i en ångsterilisator vid 147,1 kPa (15 vid).

Kyldes till 56 ° C-agar tillsatt sterilt defibrinerat kaninblod, omrördes genom att rotera kolven och fylls i steril pipett 4 ml rör. Kolv blodagar under dispense är ett vattenbad vid en temperatur 58 ° C. Rören med medel tips.

Efter stelning av ägarn, placeras de i en inkubator för en dag på 37 ° C för sterilitet kontroll och ta emot vätskekondensatet. Om det är framställt inte är tillräckligt, före sådd i sterila flaskor, kan du lägga om 1 En ml av följande lösningar: 0,85 % natriumklorid, 1 % pepton lösning, Hanks lösning, laktalbuminhydrolysat eller andra näringsmedier i isotoniska koncentrationer.

Metoder för att detektera Leishmania i avskrap för drabbade vävnader genom isolering av ren kultur

När du väljer en kultur följer noga reglerna för sterilitet. Provningsytan av huden torkas med en bomullstuss, fuktad 70 % alkohol.

Efter indunstning av alkoholen den vassa änden av en steril oftalmisk skalpell snitt tuberkel längd 2-3 mm. Från botten av skåran med sterilt pasteurpipett inte skrapa vävnad. Den resulterande droppe serös-blodig vätska överfördes till ett provrör med miljön. Manipulation genomföres flera gånger, sådd material varje gång ett nytt rör. Öronproppar är inbäddade i paraffin eller sätta dem gummihättor och placeras i en inkubator vid 22-24 ° C.

Utvärdering av resultaten

Grödor undersöks under ett mikroskop på en daglig basis för att identifiera smittämnen. Utforska nativa läkemedel, ställdes genom metoden av krossade droppar, linsen 40×40. Resultaten anses negativa sådd, om i 40 dagar patogen hittades inte. Kulturer är långsträckta Leishmania (10-12 Mikron med ledningar).

Tillämpning av odlingsmetoden är mest användbart när tuberculoid form av leishmaniasis, diagnostik som andra metoder kan vara mindre effektiva.