Metoder för detektion av Leishmania i benmärg smeta

Reagensen för påvisande av Leishmania

• Metylalkohol, eller absolut etylalkohol, eller en blandning av Nikiforov (blandning av lika stora mängder av eter och absolut etanol).
• Фосфатный буфер pH 6,9-7,1, för framställning av vilken är blandad 40 ml KH₂RO₄ (9,078 g torrsubstans KH₂RO₄ i 1 liter lösning) och 60 ml Na₂PHO₄ (11,876 g torrsubstans 1 liter lösning).
• Azureozin Romanovsky.

Metoder för detektion av Leishmania i benmärgen smeta

Från benmärg punktat omedelbart efter att ha tagit hand, inte krossa eller deformera celler,framställning tunna utstryk. Om tät punktat, göra avtryck. När betydande blod i punktat från den isolerade på glaset lite vitaktig klumpar av fett, om de är urskiljbara, och förbereda dem smutsfläckar.

Den beredda smeta lufttorkas, fixeras sedan, som blodutstryk. Torra fasta utstryk kan lagras i flera dagar.

I utstryk hällde späddes i buffert färgning Romanovsky (ca 3-5 ml) och lämnade för 30 50 m. Efter färgning sköljdes med destillerat vatten, torkades och undersöktes under ett mikroskop med nedsänkning systemet.

Utvärdering av resultaten av detektion av Leishmania i benmärg smeta

I mitten av Leishmania sjukdom vanligtvis finns i benmärgen punktat i en betydande mängd, och därför är de lätta att hitta. Men i ett tidigt skede av sjukdomen och hos patienter som behandlades för, att identifiera det förorsakande medlet, Det kräver en lång utsikt över hela smeta (inte mindre 40 m).

Leishmania finns i makrofager eller extracellulärt som rundade eller risovidnyh celler 3-5 mikrometer i diameter. Cytoplasman är färgad grå-blå färg, och kärnan - i en rödlila. I cytoplasman, ligger kinetoplasts - stavformade eller rundade utbildning, intensivt färgad kärna.

För Leishmania ibland ta blodplättar eller "skärvor" av celler (Komocki citoplazmy, innehållande kärnämne), finns i benmärgs utstryk, främmande mikroorganismer (t.ex, encelliga alger), instängd i ett utstryk under målning. Den färgade utstryket är svårare, än Leishmania (mörkblå cytoplasman och kärnan av ljusa crimson), kinetoplasts saknas.