Anemi, i samband med folsyrabrist

Oavsett orsaken folsyrabrist anemi kännetecknas av framträdande i benmärgs megaloblasts, intramedullär förstörelse erythrokaryocytes, patsitopeniey, makrocytos och hyperchromia röda blodkroppar och ibland - psykiska störningar.

Folievaya (pteroilglutaminovaya) syra (vitamin B₉) Den består av tre delar:

• pteridin ring;
• P-aminobensoesyra (tillsammans utgör pteroievuyu syra);
• glutaminsyra.

Molekylvikten för folsyra - 441. Folsyra är aktiv i form av tetrahydrofolsyraderivat. Halt folsyra i olika former i människokroppen är ca 5-10 mg. Aktier i strid med sitt inträde i kroppen kan vara uttömda över 4 i månaden.

Dagsbehovet av folsyra är 100-200 mikrogram, Graviditet, hemolytisk anemi, ökar många gånger.

Den totala mängden folsyra i kosten med den fulla kraften i 500-600 mikrogram per dag. Folat - folater ingår i avsevärda mängder i levern, jäst, spenat, kött. Mer 50 % folsyra, i livsmedel, Det kan förstöras när kokta.

Folsyra absorberas i övre delen av tunntarmen. Förmågan av inälvorna för att absorbera folsyra är mycket högre än dess dagliga behovet.

Folsyra deltar i syntesen av pyrimidin- och purinbaser, tillsammans med metylkobalamin - syntesen av uridinmonofosfata timidinm nofosfata. Folat koenzymer Mer delaktiga i ett antal reaktioner. Särskilt, tetrahydrofolat deltar i syntesen av glutaminsyra histidin.

Etiologi och patogenes av anemi vid folsyrabrist

Folsyrabrist, samt underskott på kobalamin, Det leder till utveckling av megaloblastisk anemi.

Malabsorption av folat observerats hos individer, resektion av tunntarmen, särskilt Jejunum, liksom långtids tar antiepileptika såsom difenylhydantoin (difenina) och fenobarbital (luminala). Intag av folsyra bryts när utloppet och celiaki. Folsyrabrist, samt underskott på kobalamin, observerades vid blinda loop syndrom. Beskrivs sällsynta fall av ärftliga sjukdomar av folsyra transport över tarmväggen och i cerebrospinalvätskan. Absorptionen av andra ämnen utan att lida.

Folsyra brist hos nyfödda observerats i prematuritet, kränkning av intestinal absorption, fed getmjölk, innehållande en liten mängd av folsyra.

En signifikant malabsorption av folsyra kan inträffa hos patienter, alkoholister.

Ökad konsumtion av folsyra under graviditeten Det kan leda till en brist på folsyra, Men i dag är det sällsynt i utvecklade länder. Folsyrabrist hos gravida kvinnor finns i låg effekt, närvaron av hemolytisk anemi, Använd före graviditeten ett stort antal av alkoholdrycker.

Kliniska manifestationer av folatbrist

Folsyrabrist hos barn och unga kvinnor. Samtidigt, patienter klagar över allmän svaghet, yrsel. Till skillnad från kobalaminbrist öm tunga sällan observeras. Parestesier, och andra tecken på linbana myelosis saknade. Sklera ofta ikterichnost.

I motsats till underskott på kobalaminbrist av folsyra är sällan observerade gistaminoupornaya Akhil, gastratrophia, Även om minskningen av gastrisk sekretion är ofta.

För folatbrist, samt för brist på kobalamin, kännetecknas av framträdande i perifert blod makrocytos, megalocitov och megaloblasts, närvaron av hyperchromic anemi, minska antalet retikulocyter, trombocyter och leukopeni med neutrofilt övergång till vänster och höger. I benmärgen - megaloblasts.

Förändringarna i nervsystemet skiljer sig från de manifestationer på B₁₂-bristanemia.

Bevisade, att personer med epilepsi, Folsyrabrist leder till täta attacker, till deras högre svårighetsgrad. Detta är särskilt viktigt på grund av det faktum, att om man tar antiepileptika kan orsaka malabsorption av folat. Enligt litteraturen, hos personer med schizofreni folsyrabrist leder till försämring av sjukdomen, allvarligare symptom och mindre effektiv behandling.

Differentialdiagnos av kobalaminbrist och folsyra

För differentialdiagnos av kobalaminbrist och folsyra används radioimmunoanalys metod för bestämning av folsyra i serum och i synnerhet i erytrocyter. Halten av kobalamin bestäms av mikrobiologisk metod. Som en testorganism som används som Streptococcus faecalis och Lactobacillis casei. Normalt halten av folsyra i blodserum intervallen, Enligt författarna, med olika forskningsmetoder, från 3 till 25 ng / ml, och erytrocyt - från 100 till 425 ng / ml.

I folsyrabrist minskar nivån av serum, och i erytrocyter. Vid brist kolabaminov folic syrahalt i blodet serum ofta stiger, och erytrocyter kan i vissa fall reduceras, även om nedgången, vanligen, en liten.

För diagnos av folsyrabrist används också Metoden load histidin (15 g), sedan definiera innehållet av syra i urinen formiminglutaminovoy. Normalt, huvuddelen av de former av glutaminsyra histidin. Med urinproduktion 1-18 mg formiminglutaminovoy syra. Vid brist på folsyra för 8 timmar efter dess införande i kroppen frisätts från urinen 20 till 1500 mg formiminglutaminovoy syra. Ett stort antal formiminglutaminovoy syra utsöndras i urinen efter administrering av histidin hos personer, behandlades med metotrexat. Vid brist på kobalamin, levercirros urinutsöndring av syra ökar formiminglutaminovoy, i mindre utsträckning, än med ett underskott på folsyra. Normala nivåer av urin metylmalonsyra syrahalt ökar formiminglutaminovoy syra histidin efter att ha fått bevis på brist på folsyra, istället för kobalamin.

Det bidrar till att skilja dessa två delstater och radionuklid studie. Vid brist på kobalamin, i samband med brott mot utsöndring av intrinsic factor, försämrad absorption av märkt cyanokobalamin, en brist på folsyra, är det absorberas ordentligt.

Vid brist på folsyra, leder dess införande i kroppen till en högre halt av retikulocyter, medan injektion av cyanokobalamin (derivat) ineffektiv. Folsyrabrist metylkobalamin ökar nivån av retikulocyter.

Definiera indexsegmente neutrofiler

Räkna antalet neutrofiler, med 4 segmentet och mer (Totalt 200 cellen). Bestäm procentandelen celler, med 5 segment och mer i förhållande till mängden av celler, med 4 segmentet. Indexet bestämmes av formeln:

IS =(KS (5 och mer))/KS(4);

där IC - index segmente;

KS (5 och mer) - Antalet segmenterade neutrofiler (på 200 cellen), i vilken antalet segment är lika med 5 eller mer;

KS (4) - Antalet segmenterade neutrofiler, i vilken antalet segment är lika med 4.

Normalt är detta indexintervall 2,5 till 25 %. Var, när den överstiger 30 % (oscillationer 120%), Du kan prata om hypersegmentation neutrofiler. Det observerade brist på folsyra, metilkoʙalamina, och uremi.

Fastställande av metylmalonsyra i urin av Giordio och PLAUD

Reagens.

1. Jonbytarhartset Dowex-ZX4 (kloridform, 200-400 Mesh). Hartset tvättades med fem volymer destillerat vatten 3 gånger, suspenderades i två volymer destillerat vatten och förvarades i en mörk skål vid 4 ° C.

2. En lösning av para-nitroanilin 0,075 % framställd genom upplösning av 37,5 mg reagens 500 ml 0,2 M lösning av saltsyra. Förvara i en mörk pott, Det förblev stabil under flera månader vid rumstemperatur.

3.Acetatbuffert (pH 4,3) tillverkad av 1 M natriumacetat och 1 M lösning av ättiksyra.

4.Diazoreaktiv: 4 ml 0,5 % natriumnitratlösning blandades med 15 ml para-nitroanilin. Blandningen placerades i ett kylskåp vid 4 ° C och den kylda lösningen sattes 4 ml 0,2 M natriumacetat. Reagens stabila vid temperaturer 4 ° C under en dag.

5.Normal 0,05 M lösning av metylmalonsyra: 295 mg metylmalonsyra löses i 50 ml vatten.

Metod

Urin uppsamlades i en glasflaska och frystes tills studien. För att studera laddningsdelen av urin (20- 25 ml), tinade, tsentrifugiruyut, och supernatanten uppsamlades med användning av en svag lösning av natriumhydroxid eller saltsyra för att justera pH 6,5.

Kromatografisk kolonnhöjd 20 cm och en diameter 1 cm fylldes med Dowex-ZX4. Hartsskiktet bör ligga inom 3 cm. Ledes genom hartset 5 ml urin, tvättades med destillerat vatten (2 × 50 ml vid en hastighet av ej mer än 15 ml 1 från). Metylmalonsyra kan elueras från hartset 20 ml 0,1 M lösning av saltsyra. Vidare 2 ml eluat blandades med 3 ml 1 M acetatbuffert pH 4,3 i ett provrör med en glaspropp (15×2cm). Till blandningen sättes 3 ml kall diazoreaktiva, vari pH höjes till 4,0. Blandningen värmdes i ett vattenbad vid en temperatur 94 ° C 3 min och 2 ml 3 M natriumhydroxidlösning. Röret avlägsnades sedan från vattenbadet, med propp och innehållet omrördes. Blandningen kyldes vid rumstemperatur under 10 min och vid fotometriruyut 620 nm i en kyvett med en banlängd 1 cm.

Som en kontroll, en blandning av, bestående av 2 ml 0,1 M lösning av saltsyra, 3 ml och diazoreaktiva 3 ml acetatbuffert. Metylmalonsyra standardlösning består av samma komponenter och 0,02 ml 0,05 M lösning av metylmalonsyra. Absorbansen av dessa lösningar uppmättes under samma förhållanden.

Innehåll metylmalonsyra (mg) per enhetsvolym av urin (1 l) definieras av formeln:

(IS_Prov-IS_kontroll)/(IS_standard-IS_kontroll)*EN*((1000*T)/M)

där E - absorbans av olika prover;

A - mängden metylmalonsyra i en vanlig provrör, ml;

1000 - Den mängd urin, tas för forskning, ml;

T - den mängd saltsyra, tas för eluering, ml;

M - antalet av eluatet, tas för forskning, ml.

Under ovanstående villkor, kan formeln förenklas enligt följande::

(IS_Prov-IS_kontroll)/(IS_standard-IS_kontroll)*236

Var, när mängden metylmalonsyra i urin är större än 300 mg / l, bör åter blandas med acetatbuffert eluatet och diazoreaktivom, men i stället 2 ml eluat är lämpligt att ta 4- 10 gånger lägre och ta volymen till 2 ml 0,1 M saltsyralösning. Beräkningen skall ta hänsyn till utspädning.

Normalt per dag med urinproduktion 0,6-4,7 mg metylmalonsyra. Vid brist på kobalamin daglig utsöndring av metylmalonsyra når 294 mg. Normalt mottagning 10 g valin inte öka clearance av metylmalonsyra, kobalaminbrist ökar utsöndringen av metylmalonsyra.

Bestämning av metylmalonsyra i urin av Green

Reagens.

1. Eter.
2. Etanol.
3. En lösning av klorvätesyra 0,1 M.
4. Ammoniumsulfat.
5. Starkt basiska hartset deatsidit FF (200 mesh, kloridform).
6. En lösning av natriumnitrat 0,5 % (vikt / volym).
7. En lösning av para-nitroanilin (750 mg löst i 1 l 0,2 M lösning av saltsyra).
8. Natriumacetat 0,2 M.
9. Acetatbuffert 1 M, pH 4,3: blandad 1 M natriumacetatlösning och 1 M lösning av ättiksyra i förhållandet 16,35:33,9.
10. En vattenlösning av natriumhydroxid 3 M.

EN. Standardlösning metylmalonsyra: 100 mg löst i 100 ml vatten, förvaras i kylskåp.

B. Arbeta standard metylmalonsyra: standardlösning utspädd i 20 tid 0,1 M saltsyralösning (1 ml standard och 19 ml saltsyra). Denna mängd av metylmalonsyra ekvivalent 100 mg metylmalonsyra 1 l urin testförhållanden.

För framställning av blandade diazoreaktiva 4 ml 0,5 % natriumnitratlösning och 15 ml para-nitroanilin. Blandningen placerades i ett isbad och tillsätt 4 ml 0,2 M natriumacetat.

Metod.

Urin uppsamlades under en dag, mätte dess volym och 10 ml podkislyayut 1 M svavelsyralösning till pH 2,0 eller något under. Ammoniumsulfat tillsattes till mättnad. Blandningen placerades i en separationstratt och extraherades tre gånger med eter och etanol i ett förhållande av 3:1. För att förhindra bildningen av emulsioner extraktionsmedel blandning används i överskott.

Extraktet fick passera genom en liten kolonn-kromatografi (1 – 1,5 cm diameter), färdig 5 ml harts. Kolonnen tvättades 50 ml destillerat vatten. Metylmalonsyra eluerade 0,1 M saltsyralösning. Efter eluering valts 2 ml eluat, W tillsättes ml av acetatbufferten, och 3 ml diazoreaktiva.

Efter blandning röret placerades i ett vattenbad vid en temperatur 95 ° C 3 m. Därefter tillsättes 2 ml 3 M natriumhydroxid och en gång slutna röret propp för att minimera kontakt med luft. Efter kylning, mättes absorbansen vid våglängden 620 dem. För blind istället för att använda eluatet 2 ml 0,1 M lösning av saltsyra, och för standardlösningen - 2 ml arbetsstandard.